中药复方对高尿酸血症大鼠相关免疫炎症因子的影响

目的:探讨刘延庆教授临床治疗痛风的经验方对于高尿酸血症大鼠模型相关免疫炎症因子的影响,为该复方的临床应用及后期开发提供实验依据。方法:复方水煎剂在扬州市中医院中药制剂室制备。高尿酸血症模型造模通过给大鼠喂食定制高酵母饲料和腺嘌呤溶液,同时皮下注射氧嗪酸钾悬液进行造模。模型组大鼠分为阴性对照组(不给药)、给药组以及阳性对照组(秋水仙碱),连续给药10 d。全自动生化分析仪用来检测血尿酸水平,蛋白热荧光芯片用来检测痛风相关的免疫炎症因子的表达情况。显微镜下观察大鼠肝肾组织是否损伤。结果:与阴性对照组比较,该复方能明显降低高尿酸血症大鼠模型的血尿酸水平(P<0.01);与对照组相比,该复方对痛风相关的免疫炎症因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-13、TNF-α等具有明显的抑制作用。显微镜下观察大鼠的肝肾组织,未发现明显的肝肾组织损伤。结论:该复方可以明显降低高尿酸血症大鼠模型的尿酸水平,同时抑制痛风相关免疫炎症因子,短期内并未发现明显的肝肾损害。这说明该复方具有明显的抗炎免疫作用,对于高尿酸血症具有明显治疗作用且无毒副作用。

金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响

目的：探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法：体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组（0.1,0.2,0.4,0.8 g·L-1）,空白组和5-氟尿嘧啶（5-FU）组,采用噻唑蓝（MTT）比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率（IC50）;采用细胞侵袭（transwell）小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素（E-cadherin）,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达情况。结果：金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性（P〈0.05）;金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性（P〈0.05）;与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系（P〈0.05）。结论：金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。

华蟾素通过调控基质金属蛋白酶抑制人胃腺癌细胞MGC-803侵袭与迁移

目的：探讨华蟾素对人胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移的影响及其分子机制。方法：噻唑蓝（MTT）比色法检测华蟾素（10,20,40,80,160,320 mg·L-1）对人胃腺癌MGC-803细胞增殖的抑制影响;transwell小室法检测华蟾素对MGC-803细胞侵袭与迁移能力的影响;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测经华蟾素作用后的MGC-803细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases-2,MMP-2）,基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1）,基质金属蛋白酶抑制因子-2（tissue inhibitors of metalloproteinases-2,TIMP-2）的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测经华蟾素处理后的MGC-803细胞中MMP-2,MMP-9,TIMP-1,TIMP-2的mRNA表达情况。结果：（1）MTT比色法结果显示,与空白组比较,华蟾素（10,20,40,80,160,320 mg·L-1）对胃腺癌MGC-803细胞的增殖具有显著抑制作用（P〈0.01）,并且华蟾素对MGC-803细胞的抑制作用呈浓度和时间依赖。（2）transwell实验结果显示,与空白组比较,华蟾素（10,20,40 mg·L-1）对胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移能力具有不同程度的抑制作用（P〈0.05）（3）Real-time PCR和Western blot实验结果显示,与空白组比较,华蟾素（10,20,40 mg·L-1）能够下调MMP-2,MMP-9蛋白和mRNA的表达,上调TIMP-1,TIMP-2蛋白和mRNA的表达。结论：华蟾素能明显抑制胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移,其机制可能与上调TIMP-1,TIMP-2的转录水平,进而下调MMP-2,MMP-9蛋白水平有关。