期刊文献+
共找到16篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
红蓝光促进陆地棉愈伤组织诱导和增殖
1
作者 李凯利 魏云晓 +5 位作者 种智力 孟志刚 王远 梁成真 陈全家 张锐 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期638-649,共12页
【目的】陆地棉(Gossypium hirsutum)的遗传转化技术存在转化周期长、转化效率低等问题,其中,愈伤组织增殖速度慢是导致棉花转化周期长的关键因素。探究陆地棉愈伤组织增殖的最适光照条件,为缩短棉花转化周期提供技术基础。【方法】以... 【目的】陆地棉(Gossypium hirsutum)的遗传转化技术存在转化周期长、转化效率低等问题,其中,愈伤组织增殖速度慢是导致棉花转化周期长的关键因素。探究陆地棉愈伤组织增殖的最适光照条件,为缩短棉花转化周期提供技术基础。【方法】以陆地棉受体品种WC的下胚轴为外植体诱导愈伤组织,设置红光、蓝光、红蓝光(1﹕1)和白光(CK)4种不同光照处理,研究不同光质下愈伤组织的增殖速度、形态特征,以及相关基因表达水平和相关酶活性的差异,解析光照对愈伤组织增殖的影响并获得最优光照条件。【结果】不同光质对诱导棉花外植体出愈和愈伤组织生长具有明显影响。在4种不同光照处理下,红蓝光相较其他光质具有更显著地促进外植体出愈和愈伤组织增殖的效果,表现为愈伤组织分化时间更短,7—15 d,即与其他处理存在明显表型差异,7 d愈伤组织鲜重红蓝光(0.39 g)>蓝光(0.34 g)>白光(0.24 g)>红光(0.23 g),15 d时,红蓝光(1.15 g)>蓝光(0.98 g)>白光(0.69 g)>红光(0.51 g),红蓝光照射下的愈伤组织鲜重是白光对照的1.65倍,比单一蓝光或红光照射下的愈伤组织鲜重增加16.5%或125.5%;与此相一致的是,红蓝光处理下,第二周的愈伤增殖率也最高,达14.67%,比红光处理(7.17%)增加1倍多。4种光质下,愈伤增殖及体胚再生相关基因的表达量,红蓝光处理均显示最高。此外,红蓝光处理下愈伤组织的过氧化氢酶(CAT)活性显著提高,活性氧(ROS)含量低于白光对照。【结论】不同光质条件下,棉花外植体的愈伤组织增殖速度不同,红蓝光(1﹕1)促进外植体出愈和愈伤增殖表现最优,其次为蓝光,再次为白光,单独的红光不利于棉花出愈和愈伤增殖。红蓝光(1﹕1)处理诱导光受体及其互作因子、愈伤增殖等相关基因的表达,增强愈伤组织内过氧化氢酶的活性,降低活性氧含量,促进细胞分裂,进而促进愈伤增殖。 展开更多
关键词 陆地棉 红光 蓝光 愈伤组织增殖速度 活性氧
下载PDF
耐除草剂棉花GGK2的遗传稳定性分析及性状鉴定 被引量:1
2
作者 梁成真 臧有义 +7 位作者 孟志刚 王远 MUBASHIR Abbas 何海焱 周琪 魏云晓 张锐 郭三堆 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期3251-3260,I0001,共11页
【目的】明确转基因耐除草剂棉花GGK2的遗传稳定性和营养品质等性状,为其产业化应用提供数据基础和技术支撑。【方法】针对实验室培育的新型耐除草剂棉花GGK2,选取其T3、T4、T5代开展试验研究。利用特异性PCR和Southern blot开展基因组... 【目的】明确转基因耐除草剂棉花GGK2的遗传稳定性和营养品质等性状,为其产业化应用提供数据基础和技术支撑。【方法】针对实验室培育的新型耐除草剂棉花GGK2,选取其T3、T4、T5代开展试验研究。利用特异性PCR和Southern blot开展基因组整合稳定性分析;利用实时荧光定量PCR、ELISA和胶体金试纸条开展表达稳定性分析;通过田间喷施草甘膦测试其除草剂耐受稳定性,以及依据相关国际或国内行业标准进行棉籽营养成分分析等。【结果】抗除草剂基因GR79 EPSPS和GAT,以及筛选标记基因NPTⅡ以单拷贝形式整合到棉花GGK2基因组D10染色体,且能够在T3、T4、T5代转基因棉花中稳定遗传,同时发现基因组中不含有遗传转化载体的骨架片段。表达分析发现GR79 EPSPS、GAT和NPTⅡ3个基因在棉花GGK2的不同时期、不同组织部位均有表达,其中,叶片中的表达量相对较高。四叶期、盛花期、吐絮期3个蛋白在叶片中表达量分别介于128.7—192.4μg·g^(-1)、24.4—35.0μg·g^(-1)和17.0—23.9μg·g^(-1)鲜重,利用GR79 EPSPS单克隆抗体制备的胶体金试纸条可以对田间棉花GGK2叶片实现快速鉴定。除草剂耐受性分析结果显示,转基因棉花GGK2可耐受4倍生产使用剂量的草甘膦除草剂。T3—T5不同世代棉花喷施除草剂后均未发现受害症状,而且整个生育期的生长发育未受影响。棉籽营养成分分析表明,来源于新疆、河北和河南种植的GGK2棉籽中,水分、灰分、蛋白质、脂肪、粗纤维、维生素及脂肪酸含量与非转基因对照之间无显著差异,各指标的含量水平均位于ILSI数据库报道的范围内。【结论】转基因棉花新种质GGK2的耐除草剂性状遗传稳定性好、除草剂耐受能力强、籽粒营养成分与非转基因对照之间无显著差异,在耐除草剂棉花生物育种具有重要的应用价值且产业化前景好。 展开更多
关键词 棉花 GGK2 耐除草剂 草甘膦 遗传稳定性
下载PDF
基于物联网的智能家居控制系统设计 被引量:1
3
作者 孟志刚 张园园 《开封大学学报》 2023年第1期89-92,共4页
设计了一个基于物联网的智能家居控制系统。它的功能实现是:当监测到室内有人时灯会自动点亮,当室内温度高时风扇会自动开启,室内的湿度达到一定数值时加湿器会自动开启,当室外光照达到一定温度时窗帘会自动下拉。实际应用表明,该系统... 设计了一个基于物联网的智能家居控制系统。它的功能实现是:当监测到室内有人时灯会自动点亮,当室内温度高时风扇会自动开启,室内的湿度达到一定数值时加湿器会自动开启,当室外光照达到一定温度时窗帘会自动下拉。实际应用表明,该系统实用性强,判断精确,操作简单,扩展功能强。 展开更多
关键词 ZIGBEE CC2530 智能家居
下载PDF
游戏场景中基于直接交互机制的蚁群路径规划算法
4
作者 孟志刚 郑佳欣 李海泉 《长沙大学学报》 2023年第5期1-6,共6页
针对即时战略游戏环境中传统的路径规划算法寻路因素较为单一、信息传递较少、被敌方单位击杀概率较大等问题,提出了一种仅仅基于直接交互机制的蚁群寻路算法。这种算法不仅仅是通过在蚂蚁之间直接交互信息来传递代表寻路目标点位置的信... 针对即时战略游戏环境中传统的路径规划算法寻路因素较为单一、信息传递较少、被敌方单位击杀概率较大等问题,提出了一种仅仅基于直接交互机制的蚁群寻路算法。这种算法不仅仅是通过在蚂蚁之间直接交互信息来传递代表寻路目标点位置的信息,同时蚂蚁还与敌方单位进行直接交互,获取在路径上对己方单位带来伤害的敌方单位的位置信息,提高我方侦察单位的存活率,从而规划出一条避开敌方攻击单位到达敌方基地的更合理路径。这种算法同时还扩大了蚂蚁的感知范围,提高了蚂蚁之间进行交互的概率,缩短了完成路径规划所需的时间。通过栅格网络和游戏《星际争霸:母巢之战》仿真地图与A*算法、人工势场算法等常见的路径规划算法做对比实验,结果表明,基于直接交互机制的蚁群算法在某些栅格地图中取得了最短的路径,而且在特定游戏场景中有最长的停留时间,有效解决了游戏场景中的路径规划问题。 展开更多
关键词 游戏场景 路径规划 直接交互 感知范围 栅格地图
下载PDF
基于深度学习的手绘图形识别的研究
5
作者 孟志刚 廖帅元 《计算机与数字工程》 2023年第4期949-953,共5页
为了更好地去研究深度学习理论与算法在手绘图形的实际应用,论文通过采集手绘图形的HOG特征,采用常用的识别方法K近邻(KNN)、随机森林、SVM、逻辑回归与卷积神经网络中经典模型LeNet比较手绘图形训练识别的准确率,识别速度。研究发现Le... 为了更好地去研究深度学习理论与算法在手绘图形的实际应用,论文通过采集手绘图形的HOG特征,采用常用的识别方法K近邻(KNN)、随机森林、SVM、逻辑回归与卷积神经网络中经典模型LeNet比较手绘图形训练识别的准确率,识别速度。研究发现LeNet模型训练与其他几种主流的手绘图形识别方法相比具有良好的准确率,对于十分类的手绘图形识别正确率最高可达93.7%。经过对手绘图形识别做进一步的探究,将最后对深度学习在手绘图形识别领域做一个总结。 展开更多
关键词 深度学习 手绘图形识别 K近邻 随机森林 卷积神经网络
下载PDF
高职院校人事管理系统设计的思考 被引量:1
6
作者 孟志刚 《科教文汇》 2018年第35期94-95,118,共3页
高职院校人事管理的发展需要采用信息化进行管理,通过对系统需求进行分析,采用B/S架构,对各个功能模块进行设计,可以此模块分析来进行程序代码的编写。
关键词 高职院校 人事管理系统 设计
下载PDF
AtNEK6在棉花旱盐胁迫响应中的功能分析 被引量:6
7
作者 范鑫 赵雷霖 +6 位作者 翟红红 王远 孟志刚 梁成真 张锐 郭三堆 孙国清 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期4230-4240,共11页
【目的】AtNEK6是在拟南芥中发现的一种NIMA相关激酶,在拟南芥中过表达AtNEK6能够促进植物的生长发育,提高植物的耐盐耐旱性。通过将AtNEK6转化棉花,研究其在抗逆中的分子机理,为培育耐旱耐盐碱棉花新品种提供理论基础和种质资源。【方... 【目的】AtNEK6是在拟南芥中发现的一种NIMA相关激酶,在拟南芥中过表达AtNEK6能够促进植物的生长发育,提高植物的耐盐耐旱性。通过将AtNEK6转化棉花,研究其在抗逆中的分子机理,为培育耐旱耐盐碱棉花新品种提供理论基础和种质资源。【方法】采用农杆菌转化法,将来源于拟南芥的AtNEK6导入棉花,通过实时荧光定量PCR分析转基因株系中AtNEK6的表达量;通过观察转基因植株表型和扫描电镜观察细胞表皮细胞,分析转基因棉花的生长发育情况;利用甘露醇和NaCl模拟干旱处理和盐处理分析转基因棉花的耐盐耐旱能力,通过测定相关生理指标,鉴定AtNEK6对转基因棉花耐逆的贡献。【结果】利用卡那霉素筛选获得转基因幼苗,通过PCR鉴定获得10个不同的转基因株系;利用qRT-PCR分析筛选出表达量较高的L7、L17、L25株系。正常条件下,与野生型相比,转基因棉花的株高增高、叶面积增大,生长发育得到了促进,通过扫描电镜观察发现转基因棉花叶片的细胞表面积与野生型并无明显差异,细胞周期相关基因CYCB1;1和CYCA3;1及生长发育相关基因GhGRF5、GhEOD、GhAN3和GhEBP1的表达量均上调。通过耐盐耐旱性分析,正常条件下,与野生型相比,转基因株系的根长、鲜重和干重均无明显差异,仅侧根数增多;在250 mmol·L^(-1)甘露醇处理条件下,转基因株系的根长、侧根数、鲜重和干重均显著高于野生型,表现出更好的生长状态;在200 mmol·L^(-1)NaCl处理条件下,转基因株系的侧根数、鲜重和干重均显著高于野生型,相比于野生型生长状态更好。温室中正常生长1月龄的转基因棉花,在300 mmol·L^(-1)甘露醇处理条件下,转基因植株的SOD活性比野生型提高了0.65倍、0.42倍和1.45倍,CAT活性提高了0.65倍、0.64倍和0.42倍,MDA含量降低了0.51倍、0.41倍和0.22倍;250 mmol·L^(-1)NaCl处理结果与甘露醇类似,转基因棉花的耐盐生理指标均优于野生型。另外,相关胁迫响应基因GhAREB、GhDREB、GhNCED和GhLEA5在转基因棉花中的表达量均显著高于野生型棉花。【结论】AtNEK6通过参与细胞周期和生长发育的调控过程促进棉花的生长发育,同时提高棉花在逆境中的耐盐耐旱性。 展开更多
关键词 AtNEK6 转基因棉花 耐盐耐旱性 功能分析
下载PDF
异源表达irrE转基因烟草的耐盐耐旱性 被引量:4
8
作者 赵雷霖 范鑫 +7 位作者 聂星 梁成真 张锐 孙国清 孟志刚 林敏 王远 郭三堆 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期3860-3870,共11页
【目的】IrrE是从耐辐射异常球菌中发现的全局调控蛋白,主要通过修复强辐射等逆境条件下DNA损伤,提高耐辐射异常球菌对极端逆境环境的抗性。研究按植物密码子优化的irrE后导入烟草对转基因烟草耐逆能力的提高,为棉花等作物耐逆育种研究... 【目的】IrrE是从耐辐射异常球菌中发现的全局调控蛋白,主要通过修复强辐射等逆境条件下DNA损伤,提高耐辐射异常球菌对极端逆境环境的抗性。研究按植物密码子优化的irrE后导入烟草对转基因烟草耐逆能力的提高,为棉花等作物耐逆育种研究打下基础。【方法】按照植物密码子优化细菌irrE并合成基因;通过酶切连接法构建irrE植物表达载体;通过叶盘法转化烟草并PCR验证获得阳性转基因再生苗;通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析转基因株系中irrE的表达量;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IrrE编码蛋白;通过NaCl和甘露醇模拟盐处理和干旱处理分析纯和转基因株系的耐盐耐旱性,通过测定抗逆相关生理指标鉴定其对植物耐逆的贡献。【结果】按照植物密码子对irrE进行改造,共优化了241个密码子;构建了高效植物表达载体GBI-IE;利用除草剂草甘膦作为筛选剂获得转基因再生幼苗,并通过PCR验证共获得15个独立的转基因株系;通过q RT-PCR分析从中选取两个表达量最高的株系GO1和GO2进行后续的抗逆性分析;Western blot验证IrrE编码蛋白在GO1和GO2中能正确翻译。转基因烟草耐盐耐旱性分析:种子萌发试验表明,正常1/2 MS培养基上,转基因株系GO1和GO2发芽率和非转基因野生型对照之间没有明显的差异。然而250 mmol·L^(-1)NaCl培养基上GO1和GO2萌发率分别为78.8%和90.0%,野生型仅为10.3%,分别提高了68.5%和79.7%。类似地,300 mmol·L^(-1)甘露醇条件下,野生型的萌发率为39.7%,转基因株系GO1和GO2分别提高了42.9%和50.8%;正常萌发的种子移栽到250 mmol·L^(-1) NaCl和300 mmol·L^(-1)甘露醇条件12 d后,转基因株系根长、侧根数以及鲜重等生理指标显著高于野生型对照;温室中正常生长30 d的苗期烟草在250 mmol·L^(-1) NaCl处理下,转基因烟草SOD、CAT活性比野生型对照分别提高了48.80%和88.55%,而MDA含量比野生型对照降低了61.61%,胁迫响应基因Nt ABF2、Nt LEA5、Ntzfp、Nt CDPK2在GO1和GO2转基因株系中表达量均显著高于非转基因野生型。和盐处理结果类似,300 mmol·L^(-1)甘露醇的处理下,转基因烟草的耐旱生理生化指标均优于非转基因对照。【结论】烟草中异源表达耐辐射异常球菌irrE可以显著提高耐盐耐旱性;其多效性耐非生物胁迫能力的提高表明其可作为植物耐逆基因工程的优良基因源。 展开更多
关键词 密码子优化 irrE 转基因烟草 耐旱耐盐
下载PDF
茎尖法转基因棉花植株真实性鉴定方法探究 被引量:1
9
作者 肖荣 魏云晓 +4 位作者 王远 孟志刚 梁成真 陈全家 张锐 《生物技术进展》 2022年第1期83-89,共7页
棉花茎尖转化法具备不受基因型限制、转化周期短的优点,是理想的棉花转化体系,但据报道其所获得的转基因植株普遍存在遗传不稳定、高代植株基因丢失的现象。以陆地棉TM-1品种为受体材料,利用茎尖转化法将DsRed2载体转入棉花,经卡那霉素... 棉花茎尖转化法具备不受基因型限制、转化周期短的优点,是理想的棉花转化体系,但据报道其所获得的转基因植株普遍存在遗传不稳定、高代植株基因丢失的现象。以陆地棉TM-1品种为受体材料,利用茎尖转化法将DsRed2载体转入棉花,经卡那霉素筛选获得16株抗性植株,进一步PCR扩增靶基因,获得6株DsRed2基因片段PCR检测为阳性的植株,初步判断该6株为茎尖转化法获得的转基因植株,但经紫外照射,6个转基因植株均未检测到红色荧光。对其进行靶基因RT-PCR,发现DsRed2基因在6个转基因植株中仅有极低量的表达或无表达。进一步对DsRed2载体的非T-DNA片段,即载体骨架部分进行PCR以及植株内生菌培养检测,结果表明,6个转基因植株均含有完整的DsRed2载体,植株可培养出含有完整载体的内生菌,且内生菌经农杆菌16S核糖体RNA(16S rRNA)片段PCR检测结果为阳性,推测由于茎尖侵染形成农杆菌与植株共生关系,造成假阳性株的现象,进而导致高代转基因植株基因丢失、遗传不稳定的现象。旨在建立一套完整的茎尖法转基因棉花植株真实性的鉴定方法,为进一步深入研究提供参考依据。 展开更多
关键词 棉花 茎尖转化 假阳性植株 鉴定方法
下载PDF
棉花线粒体基因cRT-PCR改良及其在寻找CMS相关基因中的应用 被引量:1
10
作者 王裴林 周利利 +3 位作者 梁成真 孟志刚 郭三堆 张锐 《生物技术进展》 2019年第3期303-308,共6页
植物线粒体是含有遗传物质的细胞器,为细胞生命活动提供必需的能量。农业生产中,线粒体基因的变异容易导致细胞质雄性不育,为作物杂交育种提供了高效的杂交母本。然而,植物线粒体基因组结构复杂,不同类型的细胞质雄性不育的发生往往由... 植物线粒体是含有遗传物质的细胞器,为细胞生命活动提供必需的能量。农业生产中,线粒体基因的变异容易导致细胞质雄性不育,为作物杂交育种提供了高效的杂交母本。然而,植物线粒体基因组结构复杂,不同类型的细胞质雄性不育的发生往往由特异的基因突变所导致,为雄性不育基因的克隆带来了较大的困难。针对棉花线粒体基因的特性,改进了cRT-PCR技术,RNA连接酶将线粒体mRNA的5′和3′末端连接环化后,应用随机引物进行反转录,在保证与特异引物获得相同的完整线粒体基因转录本的基础上,实现了同时对所有线粒体编码基因的cRT-PCR,方便对线粒体编码基因的结构进行全局分析,并且通过改良方法对棉花CMS基因进行探索,从而快速找到异常因素,为线粒体功能基因组分析提供了新的方法。 展开更多
关键词 棉花 线粒体 环式RT-PCR 细胞质雄性不育
下载PDF
Principles of the roof cut short-arm beam mining method (110 method) and its mining-induced stress distribution 被引量:11
11
作者 Tao zhigang Song zhigang +2 位作者 He Manchao meng zhigang Pang Shihui 《International Journal of Mining Science and Technology》 EI CSCD 2018年第3期391-396,共6页
Since the 1960 s, mining science and technology in China has experienced two technical innovations, i.e.the ‘‘Masonry Beam Theory(MBT)" and ‘‘Transfer Rock Beam Theory(TRBT)". Based on those theories, th... Since the 1960 s, mining science and technology in China has experienced two technical innovations, i.e.the ‘‘Masonry Beam Theory(MBT)" and ‘‘Transfer Rock Beam Theory(TRBT)". Based on those theories, the conventional mining method(being called the 121 mining method) was established, consisting of excavating two tunnels with a pillar left for mining a working panel. However, with increasing mining depth,engineering geological disasters in the underground caverns have been frequently encountered. In addition, the use of the coal-pillar mining results in a large amount of coal resources unexploited. In order to address the problems above, the ‘‘Roof Cut Short-Arm Beam Theory(RCSBT), being called the 110 mining method)" was proposed by He Manchao in 2008. The 110 mining method features the mining of one coal seam panel, excavating necessarily only one roadway tunnel and leaving no pillars. Realization of the 110 mining method includes the following steps:(1) directional pre-splitting roof cutting,(2) supporting the roof by using high Constant Resistance Large Deformation bolt/cable(CRLD), and(3) blocking gangue by hydraulic props. This paper presents an overview of the principles, techniques and application of the 110 mining method. Special emphasis is placed on the numerical simulation of the geostress distribution found in the mining panel using the 110 method compared to that of the 121 method. In addition, the stress distribution on the ‘‘short beam" left by the roof cutting when performing the 110 method was also investigated using both numerical simulation and theoretical formulation. 展开更多
关键词 采矿方法 房顶 分发 横梁 手臂 压力 技术革新 数字模拟
下载PDF
基于深度学习的财务机器人自动撰文场景研究 被引量:2
12
作者 孟志刚 吴云伟 姜宇杰 《长沙大学学报》 2021年第2期9-14,共6页
文本自动生成旨在使机器人如同人一样思考并自动撰文,减少工作人员的工作量、提高工作效率。文章将自动撰文场景建模成财务机器人自动撰写报告的问题模型,提出了基于深度学习的LSTM和GRU正反序列两种算法来实现文本自动生成。实验表明,... 文本自动生成旨在使机器人如同人一样思考并自动撰文,减少工作人员的工作量、提高工作效率。文章将自动撰文场景建模成财务机器人自动撰写报告的问题模型,提出了基于深度学习的LSTM和GRU正反序列两种算法来实现文本自动生成。实验表明,在大规模语料库基础上该模型可取得较好的效果,该模型生成的文本所涵盖的信息更加全面,机器生成的文本与人工生成的文本意思更相近。 展开更多
关键词 LSTM GRU RNN 深度学习
下载PDF
机车车辆自动防溜装置的研究与设计 被引量:2
13
作者 孟志刚 郭晓亮 +2 位作者 张永钊 王鹏 任朋朋 《铁道车辆》 2022年第2期74-76,101,共4页
介绍了机车车辆自动防溜装置的设计原理、设计思路、总体设计方案、主要结构及其功能,采用力学原理对其制动距离进行计算,并进行了适用性分析。机车车辆自动防溜装置的研制可解决机务段、货场、专用线等停留机车车辆自行溜车的问题。
关键词 机车车辆 自动防溜装置 桅杆机构 铁鞋机构 计算
下载PDF
铁路货车车钩钩尾框螺母拆卸装置的设计与实现
14
作者 孟志刚 郭晓亮 +3 位作者 刘路 张永钊 任朋朋 陈冉 《铁道车辆》 2022年第4期104-106,共3页
介绍了铁路货车车钩钩尾框螺母拆卸装置的设计思路、总体设计方案和结构,该装置的使用可提高钩尾框螺母拆卸的作业效率。
关键词 货车 钩尾框 螺母拆卸 定位平台 位移机构
下载PDF
基于GR79 EPSPS筛选标记的抗虫抗除草剂表达载体构建及抗性鉴定
15
作者 杨羊 梁成真 +4 位作者 孟志刚 陈全家 罗淑萍 张锐 郭三堆 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期22-28,共7页
虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringie... 虫害和草害是农业生产中两大主要危害。目前,尽管转基因抗虫和抗除草剂作物相继报道和应用,然而我国抗虫抗除草剂复合性状作物培育仍然明显滞后,而且多依靠传统杂交选育的手段,费事费力、周期长。根据苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) Cry1Ac蛋白结合结构域和毒性结构域特征,人工合成杀虫基因cry1Ac-2.5。同时,利用抗除草剂基因GR79 EPSPS替换卡那霉素筛选标记,构建基于草甘膦除草剂筛选标记的复合抗虫抗除草剂植物表达载体,并转化烟草。qRT-PCR结果表明转基因烟草cry1Ac-2.5和GR79EPSPS基因转录水平均成功表达,经Bt和GR79试纸条检测表明上述基因在蛋白水平正确翻译。抗性实验表明,转基因烟草愈伤经草甘膦筛选,阳性率达到80%,且转基因烟草耐受100 mg/L草甘膦处理。抗虫实验表明,饲喂cry1Ac-2.5转基因烟草4 d后,棉铃虫幼虫死亡率为90%左右,表明人工基因cry1Ac-2.5具有显著的的抗虫效果。以上结果表明,构建的抗虫抗除草剂植物表达载体(Cry1Ac-2.5+GR79 EPSPS)将抗虫基因和抗除草剂基因有效合并,对于快速培育抗虫抗除草剂作物具有指导意义。 展开更多
关键词 Bt CRY1AC GR79 EPSPS 烟草 抗虫 抗草甘膦
原文传递
BS2基因在烟草中的功能解析
16
作者 李霞 范鑫 +5 位作者 梁成真 王远 张锐 孟志刚 刘晓东 孙国清 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期43-50,共8页
BS2蛋白来源于枯草芽孢杆菌B111,具有较强的黄萎病抗性,能抑制黄萎病菌孢子萌发并破坏其菌丝生长。BS2基因全长1 566 bp,共522个密码子,由于物种间偏爱密码子的差异,若不对其进行密码子优化而直接导入植物,会造成基因表达量低甚至不表... BS2蛋白来源于枯草芽孢杆菌B111,具有较强的黄萎病抗性,能抑制黄萎病菌孢子萌发并破坏其菌丝生长。BS2基因全长1 566 bp,共522个密码子,由于物种间偏爱密码子的差异,若不对其进行密码子优化而直接导入植物,会造成基因表达量低甚至不表达。按植物密码子对BS2基因进行优化合成,共优化了332个密码子;生物信息学分析得出:1~28位氨基酸为N端信号肽,成熟的BS2蛋白由224~521位氨基酸构成,是一种中性锌金属肽酶;亚细胞定位将BS2蛋白定位于细胞膜;牛津杯法检测得出转基因烟草株系的蛋白粗提液有很强的抑菌活性;未侵染黄萎病菌的对照组,T1代转基因植株与野生型长势基本一致、表型无明显差异;黄萎病菌V991侵染组,转基因烟草的表型性状明显优于野生型,且两组中转基因烟草的SOD、CAT活性和SA、ABA含量均显著高于野生型,说明BS2基因可以显著提高转基因烟草的黄萎病抗性。 展开更多
关键词 BS2 生物信息学分析 转基因烟草 黄萎病抗性
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部