SARS冠状病毒S基因重组DNA诱导的体液免疫反应

目的以严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)密码子优化的S、S1和S2基因分别构建其真核表达质粒,免疫BALBPc小鼠,以初步评价其诱导特异性体液免疫的效果。方法将人工合成密码子优化的S、S1和S2基因克隆入pcDNA4/HisMax-TOPO表达载体,重组质粒转染293T细胞,Westernblot和免疫组化检测其真核表达,重组质粒免疫BALBPc小鼠,酶联免疫(ELISA)检测抗S蛋白抗体,伪病毒中和试验、细胞融合抑制试验检测中和抗体。结果3种重组质粒均可在真核细胞中获得表达,免疫小鼠后可诱导针对S蛋白的特异性抗体,抗体在12周观察期内呈持续上升趋势;其中,仅S和S1蛋白重组质粒能够诱导中和抗体的产生,以S蛋白的效价为高。结论密码子优化S和S1蛋白重组质粒可以有效诱导BALBPc小鼠产生中和抗体,其抗体可能具有阻断SARS-CoV侵袭易感细胞的能力。该结果为进一步研究SARS0Co V DNA疫苗提供了参考依据。