Cloning and molecular characterization of△^(12)-fatty acid desaturase gene from Mortierella isabellina

瞄准：克隆三角洲(12 ) Mortierella isabellina 并且到的丰满的酸 desaturase 基因机能上地描绘这基因在试管内和在活体内。方法：反向的 transcriptional 聚合酶链反应(RT-PCR ) 被用来克隆三角洲(12 ) 的开的读物框架 Mortierella isabellina 的丰满的酸 desaturase 基因(D12D ) 。Plasmids pEMICL12 和 pYMICL12 与它被构造。pEMICL12 被转变成埃希氏杆菌属关口 i (E.coli ) 为在有 IPTG 的正式就职以后的表示的紧张 BL21 使用 CaCl (2 ) 方法。pTMICL12 在半乳糖的正式就职下面为表示用锂醋酸盐方法被转变成酿酒酵母紧张 INVSc1。北弄污方法被用来在 S.cerevisiae 紧张 INVSc1 在这基因的 transcriptional 水平上调查温度的效果。结果：Recombinant 原生质标志 pEMICL12 和 pTMICL12 成功地被构造并且与适当方法独立转变了成 E.coli 和 S.cerevisiae。在有 IPTG 和半乳糖的正式就职以后，它被发现三角洲(12 ) 的那表情在 E.coli 和 S 的丰满的酸 desaturase 基因。在导致的适当条件下面的啤酒活跃三角洲(12 ) 的生产丰满的酸 desaturase，它能由 GCMS 察觉在试管内和在活体内分别地把 17.876% 油酸和 17.604% 变换成亚油酸。结论：克隆并且在 E.coli 和 S.cerevisiae 的 M.isabellina D12D 基因的表示成功地被完成。