MALDI-TOF MS对临床侵袭性丝状真菌的快速鉴定技术的研究

目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术在临床常见丝状真菌鉴定中的应用价值。方法收集2017年4月—2019年7月本院各种类型临床标本中分离培养的65株丝状真菌,以及某三甲医院惠赠的26株丝状真菌。这91株丝状真菌通过传统形态学鉴定、DNA测序及MALDI-TOF MS鉴定方法后,以DNA测序结果为标准,与另外2种方法的鉴定结果进行统计学比较,评价MALDI-TOF MS在临床丝状真菌鉴定上的应用。结果在28℃和35℃条件下培养的菌株经质谱仪鉴定后,χ^(2)检验显示P>0.05,提示培养温度差异对结果的影响无统计学意义;以DNA测序结果为金标准,传统形态学方法的正确鉴定率为81.3%(74/91),而基于MALDI-TOF MS技术的正确鉴定率可达97.8%(89/91);研究中,使用“甲酸乙腈提取法”提取蛋白后,丝状真菌质谱鉴定的正确率为90.1%(82/91),而“磁珠研磨法”提取蛋白后的质谱鉴定率则为97.8%(89/91)。结论临床常规工作中使用质谱仪鉴定常见丝状真菌时,培养温度不会影响质谱鉴定结果;改良“磁珠研磨法”提取蛋白后质谱仪鉴定的正确率优于质谱仪推荐“甲酸乙腈提取法”;MALDI-TOF MS技术在常见丝状真菌的鉴定上,相比于传统形态学鉴定,该技术更快速、客观、高效及准确。

呼吸道感染耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌分子流行病学及临床特征

目的分析呼吸道感染耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)主要耐药机制、分子流行病学特征及其临床特征。方法收集2018年湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院非重复呼吸道感染CRE 114株,所有菌株均用VITEK2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及体外药敏试验;改良碳青霉烯灭活试验进行表型试验;PCR检测碳青霉烯酶基因并进行多位点序列分型,并用χ^2检验和Logistic回归对临床数据进行统计学分析。结果114株非重复呼吸道感染CRE中肺炎克雷伯菌108株,大肠埃希菌2株,阴沟肠杆菌4株。114株CRE中85株检出产碳青霉烯酶,占74.56%;其中肺炎克雷伯菌以KPC-2型为主(73.15%);大肠埃希菌未检测出酶基因,1株阴沟肠杆菌检出NDM-1;肺炎克雷伯菌共分出6种ST型,以ST11为主要表型,其次为ST17;大肠埃希菌分出1种ST型,为ST167;4株阴沟肠杆菌为ST592。114株CRE分为产酶株与非产酶株,运用χ^2检验和Logistic回归分析显示,早期的碳青霉烯类抗菌药物使用者所占比例在产酶株与非产酶株中差异有统计学意义(P<0.05),且其是产酶株的危险因素(OR:3.722,95%CI:1.529~9.057)。结论产碳青霉烯酶为CRE耐药的主要原因,ST11为肺炎克雷伯菌的主要流行基因型,早期的碳青霉烯类抗菌药物暴露是产酶株的危险因素。

肝胆外科患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染及感染后死亡的危险因素分析

目的探讨肝胆外科患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染及感染后死亡的危险因素分析。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月在湖南省人民医院肝胆外科住院并发生肺炎克雷伯菌感染的患者的临床资料。对于每例CRKP感染患者, 选择2例非碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(non-CRKP)感染患者与之进行匹配。共纳入720例肺炎克雷伯菌感染的患者, 其中男性444例, 女性276例, 年龄(58.0±11.6)岁。依据感染情况分为两组:CRKP组(n=240)和non-CRKP组(n=480)。根据预后情况将240例CRKP组患者分为两个亚组:死亡组(n=34)和存活组(n=206)。记录患者的一般资料、实验室检查结果、抗菌药物使用情况和感染结局等, 以分析感染及感染后死亡的危险因素。结果患有急性胰腺炎(OR=3.473, 95%CI:1.844~6.541)、感染前存在慢性心血管系统疾病(OR=2.028, 95%CI:1.228~3.347)、慢性肾衰竭(OR=1.873, 95%CI:1.142~3.073)、低蛋白血症(OR=3.060, 95%CI:1.869~5.010)、碳青霉烯类抗菌药物使用(OR=3.882, 95%CI:2.518~5.985)、入住重症监护室(OR=1.783, 95%CI:1.034~3.075)和感染前30 d内手术(OR=13.463, 95%CI:7.482~24.223)是肝胆外科患者发生CRKP感染的独立危险因素(均P<0.05)。感染前患有慢性呼吸系统疾病(OR=3.784, 95%CI:1.420~10.089)、接受机械通气(OR=5.085, 95%CI:1.436~18.011)、意识障碍(OR=40.710, 95%CI:3.564~464.943)、接受激素治疗(OR=14.977, 95%CI:3.819~58.743)和接受喹诺酮类抗菌药物治疗(OR=4.102, 95%CI:1.226~13.726)是肝胆外科CRKP感染者死亡的独立危险因素(均P<0.05)。CRKP组阿米卡星、妥布霉素、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲恶唑和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性与non-CRKP组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。结论肝胆外科患者发生CRKP感染与基础疾病、抗菌药物使用和自身屏障被破坏等多种因素有关, 并且这些因素影响着患者感染的结局。

产单核细胞李斯特菌临床感染3例报道

李斯特菌广泛存在于自然环境中,是引起人畜共患的病原菌,种类较多,只有产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)才能引起人类疾病。LM是一种胞内寄生菌,宿主对它的清除主要是靠细胞免疫功能,免疫功能低下的患者是LM的易感人群,主要引起原发性脓毒血症、脑膜炎和脑炎。孕妇容易感染LM,怀孕期间感染LM可导致胎儿或新生儿的严重后果,包括流产、死胎、早产和新生儿感染。LM虽罕见但有较高的致病性,且临床表现常无明显的特异性,诊断困难。本文通过3例确诊的病例回顾分析,为类似的病例提供参考,以减少不利后果。

A case of pigmentibacter ruber related infection

We report a severe case of Pigmentibacter ruber pneumonia associated with neardrowning.A novel bacterium of the family Silvanigrellaceae was isolated from the blood and sputum samples of the patient.Our genomic investigation demonstrated that river water in a temperate region can be a source of Pigmentibacter ruber causing human infections.