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超量表达CsGH3.6通过抑制生长素信号转导增强柑橘溃疡病抗性 被引量:9
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作者 邹修平 龙俊宏 +3 位作者 彭爱红 陈敏 龙琴 陈善春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期3806-3818,共13页
【背景】由柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)引起的柑橘溃疡病是柑橘生产上最具毁灭性的一种病害。植物生长素在调控柑橘溃疡病菌引起的寄主侵染部位脓疱形成中起重要作用。生长素早期响应基因GH3通过酰基化... 【背景】由柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)引起的柑橘溃疡病是柑橘生产上最具毁灭性的一种病害。植物生长素在调控柑橘溃疡病菌引起的寄主侵染部位脓疱形成中起重要作用。生长素早期响应基因GH3通过酰基化吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)调控植物激素动态平衡。前期研究发现柑橘CsGH3.6在调控生长素响应溃疡病侵染中起着重要作用。【目的】通过对超量表达CsGH3.6转基因晚锦橙的抗病性、植株表型、细胞和激素变化进行分析,利用RNA-Seq解析CsGH3.6调控的信号通路,探明CsGH3.6调控激素动态平衡影响柑橘溃疡病抗性的内在机制。【方法】利用针刺法对离体转基因叶片接种溃疡病菌Xcc,统计接种第10天时病斑面积和病情指数,以野生型为对照,评价转基因植株的抗性水平;提取感病前后叶片内源激素,利用高效液相色谱技术(high performance liquid chromatography,HPLC)检测转基因植株中激素含量变化;温室中观察转基因植株表型变化;通过测量叶片纵径、横径和厚度分析转基因植株叶型变化特征;制备叶片表皮切片,显微观察表皮细胞和气孔,并统计转基因植株表皮细胞长度和气孔密度;采用RNA-Seq测序技术研究转基因植株转录组变化情况,并利用Nr、Nt、Pfam、COG、SwissProt和gene ontology(GO)数据库注释基因功能,进一步利用KEEG数据库和MapMan软件解析超量表达CsGH3.6影响的重要基因、功能和途径,阐明CsGH3.6调控柑橘溃疡病抗性的分子机制。【结果】超量表达CsGH3.6显著增强转基因植株的溃疡病抗性;转基因植株分枝增多且下垂,叶片向上卷曲,变小,颜色浅;转基因植株气孔密度增加,表皮细胞变短;激素含量分析显示,转基因植株自由生长素(IAA)和茉莉酸(jasmonic acid,JA)含量显著降低,而水杨酸(salicylic acid,SA)含量显著增加;转录组测序分析表明,超量表达CsGH3.6显著抑制生长素信号转导相关基因表达,特别是所有注释的Aux/IAA家族基因均下调表达,相反,与生物胁迫相关基因的表达为上调,其中绝大部分基因为病程相关蛋白基因。【结论】超量表达CsGH3.6通过酰基化自由IAA抑制生长素信号转导,调控JA和SA的动态平衡,改变细胞和植株的形态建成,从而增强柑橘对溃疡病的抗性。研究结果暗示调控激素动态平衡在柑橘抗病育种中具有潜在价值。 展开更多
关键词 柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种 柑橘溃疡病 生长素 CsGH3.6 抗病性
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柑橘溃疡病抗性相关转录因子CitMYB20的功能 被引量:3
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作者 姚利晓 范海芳 +7 位作者 张庆雯 何永睿 许兰珍 雷天刚 彭爱红 李强 邹修平 陈善春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1997-2008,共12页
[目的]了解柑橘不同品种CitMYB20对柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)和外源植物激素的应答情况,评价转基因植株对柑橘溃疡病的抗性,验证CitMYB20的生物学功能.[方法]根据柑橘基因组序列设计引物,PCR法同源克隆柑橘溃疡... [目的]了解柑橘不同品种CitMYB20对柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)和外源植物激素的应答情况,评价转基因植株对柑橘溃疡病的抗性,验证CitMYB20的生物学功能.[方法]根据柑橘基因组序列设计引物,PCR法同源克隆柑橘溃疡病抗性品种金弹金柑(Fortunella japonica)和敏感品种枣阳小叶枳(Poncirus trifoliata)的CitMYB20基因序列和启动子序列,利用在线软件PlantCARE对启动子序列进行顺式作用元件预测.以针刺法对金弹金柑和枣阳小叶枳离体叶片接种柑橘溃疡病菌,用外源激素水杨酸、茉莉酸甲酯和乙烯利处理金弹金柑和枣阳小叶枳的叶片,在处理的不同时期收集材料,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CitMYB20的表达水平.分别构建CitMYB20的过表达载体和抑制表达载体,根癌农杆菌法转化枳上胚轴,随机摘取转基因株系成熟叶片进行柑橘溃疡病离体抗性评价.[结果]金弹金柑和枣阳小叶枳中CitMYB20(GenBank登录号分别为MN689609和MN689608)序列高度保守,相似度达到99%;两者的启动子序列(GenBank登录号分别为MN689611和MN689610)虽然都具有脱落酸和茉莉酸甲酯的响应元件,但金弹金柑中还具有水杨酸响应的顺式作用元件,而枣阳小叶枳中缺少该元件.在体外接种柑橘溃疡病菌5 d时,金弹金柑成熟叶片中CitMYB20表达量显著上升,达到对照的2.5倍;而枣阳小叶枳叶片CitMYB20在整个接菌周期内表达量未发生显著变化.外源激素处理时,CitMYB20对水杨酸和茉莉酸甲酯的响应相似,即在金弹金柑中呈现出先升高后降低的趋势,而在枣阳小叶枳中表达量降低,随后又恢复正常.乙烯利处理时,CitMYB20在金弹金柑中表达量略有下降,在枣阳小叶枳中表达量先升后降.遗传转化共获得7株过表达植株和5株抑制表达植株,转基因植株与对照植株相比在形态发育上未见明显差异.CitMYB20过表达植株能够在一定程度上减弱柑橘溃疡病的症状,而抑制CitMYB20表达植株对柑橘溃疡病菌的敏感性增强.[结论]CitMYB20在柑橘溃疡病抗性品种中受柑橘溃疡病菌的诱导表达;CitMYB20是防御柑橘溃疡病菌入侵的一种正向调控转录因子,其抗柑橘溃疡病功能可能需要水杨酸和茉莉酸信号途径的作用;CitMYB20可作为柑橘抗溃疡病分子育种的候选基因. 展开更多
关键词 柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种 柑橘溃疡病 R2R3-MYB转录因子 过表达 RNA干扰 抗病性
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可再生电化学传感器同步检测贝类中痕量铅和镉 被引量:5
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作者 彭爱红 彭家伟 陈晓梅 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第11期252-260,共9页
目的:针对贝类中高毒重金属铅(Pb)和镉(Cd),开发一种可再生、廉价、快速、灵敏的电化学传感器。方法:以自制离子液体/石墨烯电极(IL/GNs HME)为工作电极,采用微分脉冲阳极溶出伏安法(DPASV)原位镀铋,根据得到的溶出峰电流,实现对Pb^(2+)... 目的:针对贝类中高毒重金属铅(Pb)和镉(Cd),开发一种可再生、廉价、快速、灵敏的电化学传感器。方法:以自制离子液体/石墨烯电极(IL/GNs HME)为工作电极,采用微分脉冲阳极溶出伏安法(DPASV)原位镀铋,根据得到的溶出峰电流,实现对Pb^(2+)和Cd^(2+)的同步测定。结果:在铋离子质量浓度500μg/L,富集时间420 s,搅拌速度600 r/min,富集电压-1.1 V,缓冲体系HAc-Na Ac p H 4.2的条件下,利用电化学传感器测得的Pb^(2+)和Cd^(2+)的线性范围均为1.0~45.0μg/L,检测限分别达0.5μg/L和0.8μg/L。采用IL/GNs HME电化学传感器同时检测扇贝、褶牡蛎、长竹蛏、菲律宾蛤子中Pb^(2+)、Cd^(2+)含量时,所得结果均与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测结果相符。结论:基于IL/GNs HME构建的电化学传感器操作简便、灵敏度高,可实现对贝类中Pb^(2+)、Cd^(2+)含量的快速、同步测定。 展开更多
关键词 石墨烯 微分脉冲溶出伏安法 贝类
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既有结构时变可靠度预测模型及计算方法研究 被引量:2
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作者 陈梦成 张明阳 +6 位作者 方苇 杨超 李骐 温清清 谈勇 彭爱红 游勇利 《华东交通大学学报》 2022年第4期16-23,共8页
在复杂环境与荷载作用下,桥梁的抗力会随着时间的推移而退化,可靠性降低,导致桥梁提前破坏,这关系到桥梁耐久性、适用性和安全性问题。准确评估桥梁的安全状况,为桥梁管养部门在维护、维修和修复等方面及时提出合理建议措施,意义重大。... 在复杂环境与荷载作用下,桥梁的抗力会随着时间的推移而退化,可靠性降低,导致桥梁提前破坏,这关系到桥梁耐久性、适用性和安全性问题。准确评估桥梁的安全状况,为桥梁管养部门在维护、维修和修复等方面及时提出合理建议措施,意义重大。文章首先建立了Gamma随机过程抗力退化模型与泊松(Poisson)随机过程荷载模型。在此基础上,基于抗力和荷载效应相互独立的基本假定,使用条件概率公式,严格得到了结构失效概率计算表达式,并提出了一种改进的时变可靠度Monte Carlo计算方法,最后用Matlab语言编制了相应计算程序。作为一个应用算例,利用文章所建立的双随机过程模型和可靠度计算方法,分析了某现钢筋混凝土T型梁桥服役20 a的抗力可靠度衰减规律。与传统的时变可靠度计算方法相比,本文方法不但可行、有效,而且效率高。另外,以腐蚀机制下的桥梁抗力退化模型为例,预测得到桥梁在后30 a时的失效概率以及可靠指标。 展开更多
关键词 桥梁工程 退化模型 荷载模型 随机过程 时变可靠度
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模拟酸雨腐蚀钢绞线蚀坑几何尺寸分布规律 被引量:1
5
作者 许开成 陈锐 +2 位作者 彭爱红 黄文意 曹艳明 《华东交通大学学报》 2021年第2期22-28,共7页
为了探讨预应力混凝土钢绞线在模拟酸雨腐蚀下蚀坑的几何尺寸分布规律,从模拟酸雨溶液浸泡腐蚀的梁中取得腐蚀钢绞线试样,计算腐蚀率并对蚀坑形状进行观察和分类,然后在蚀坑分布集中处截取4段长80 cm的钢绞线,计算蚀坑密度并统计蚀坑长... 为了探讨预应力混凝土钢绞线在模拟酸雨腐蚀下蚀坑的几何尺寸分布规律,从模拟酸雨溶液浸泡腐蚀的梁中取得腐蚀钢绞线试样,计算腐蚀率并对蚀坑形状进行观察和分类,然后在蚀坑分布集中处截取4段长80 cm的钢绞线,计算蚀坑密度并统计蚀坑长度、宽度与深度。结果表明:蚀坑形状可分为椭球形、马鞍形和棱锥形;蚀坑密度随腐蚀率增大而增大,而其相对增长率减小;蚀坑长度不服从正态分布,深度服从对数正态分布,宽度只是近似服从对数正态分布;蚀坑几何尺寸的整体分布特征是相对短、窄、中深的蚀坑分布较多,而长、宽、深或者长、宽、浅的蚀坑分布相对较少;蚀坑长度和深度有明显的分形特征,而蚀坑宽度无明显的分形特征;随着腐蚀率的增大,各蚀坑的几何尺寸逐渐趋于一致,蚀坑坑长多分布在较小值附近,坑深多分布在中值附近,坑宽多分布在较小值和中值。 展开更多
关键词 模拟酸雨 钢绞线 蚀坑 几何尺寸 分形特征
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基于1:2s规则的重复抽样质控策略性能评价
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作者 张裕 彭爱红 +1 位作者 杨丽华 余启华 《检验医学》 CAS 2020年第5期497-500,共4页
探讨基于1:2s规则的重复抽样质控策略的应用并评价其性能。利用办公软件帮助临床实验室进行实际操作,以帮助临床实验室寻找简单、高效,可手工操作的室内质量控制策略设计方法。
关键词 室内质量控制 质控规则 重复检测 Westgard西格玛规则
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GST pull-down联合LC-MS/MS筛选柑橘抗溃疡病转录因子CsBZIP40的互作蛋白 被引量:4
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作者 窦万福 祁静静 +7 位作者 胡安华 陈善春 彭爱红 许兰珍 雷天刚 姚利晓 何永睿 李强 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期2243-2255,共13页
【目的】CsBZIP40是一个与溃疡病抗性相关的转录因子,本研究旨在筛选转录因子CsBZIP40在响应柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)侵染过程中的互作蛋白,对CsBZIP40的互作网络进行分析,为柑橘抗溃疡病的分子育种提供理论... 【目的】CsBZIP40是一个与溃疡病抗性相关的转录因子,本研究旨在筛选转录因子CsBZIP40在响应柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)侵染过程中的互作蛋白,对CsBZIP40的互作网络进行分析,为柑橘抗溃疡病的分子育种提供理论依据。【方法】采用GST pull-down技术筛选柑橘在溃疡病菌侵染过程中CsBZIP40的互作蛋白。首先,构建带有GST标签的CsBZIP40蛋白融合表达载体,经IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)诱导表达、纯化后获得GST-CsBZIP40融合蛋白作为诱饵蛋白;然后,将GST-CsBZIP40融合蛋白固定在谷胱甘肽亲和磁珠上,用固定在亲和磁珠的GST-CsBZIP40诱饵蛋白与接种溃疡病菌或LB培养基后柑橘叶片总蛋白进行孵育,与GST-CsBZIP40诱饵蛋白结合的蛋白复合物洗脱收集后进行SDS-PAGE凝胶电泳验证。将验证成功的样品洗脱液进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测,鉴定出未侵染和侵染状态下CsBZIP40的互作蛋白,将检测到的蛋白利用甜橙基因组数据库进行注释,筛选出在溃疡病菌侵染过程中与CsBZIP40特异结合的蛋白,并进行GO、KEGG和互作网络分析。【结果】过表达CsBZIP40的转基因植株表型正常,与对照植株无明显差异。过表达CsBZIP40的转基因植株溃疡病抗性评价中病斑面积、病情指数均显著小于野生型植株,分别为野生型的45%和54%。以该转基因植株为材料成功提取出侵染溃疡病菌后和未接种溃疡病菌状态下的柑橘叶片总蛋白。成功构建出GST-CsBZIP40诱饵蛋白表达载体,诱导表达纯化出GST-BZIP40诱饵蛋白。利用GST-CsBZIP40诱饵蛋白从侵染溃疡病菌后柑橘总蛋白和未接菌柑橘总蛋白中成功钓取蛋白,并用LC-MS/MS检测。经过比对、注释和筛选,在柑橘溃疡病菌侵染过程中与GST-BZIP40特异结合的蛋白有53个,这些蛋白参与多个分子功能和通路。在这53个蛋白中,有6个蛋白(Cs1g02310、Cs3g05280、Cs3g23950、Cs6g13880、Cs7g12130、orange1.1t04973)可能与植物抗病性密切相关。数据库中已经证明53个蛋白中44个与CsBZIP40有直接或间接的互作关系。【结论】溃疡病菌侵染过程中有53个蛋白与CsBZIP40互作,根据注释6个蛋白与植物抗病性密切相关,这些蛋白可能在提高柑橘生物胁迫抗逆性方面发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 柑橘 柑橘溃疡病 柑橘溃疡病菌 BZIP GST pull-down 互作蛋白
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柑橘溃疡病相关基因CsPGIP的克隆与表达 被引量:4
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作者 胡安华 祁静静 +9 位作者 张庆雯 陈善春 邹修平 许兰珍 彭爱红 雷天刚 姚利晓 龙琴 何永睿 李强 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期639-650,共12页
【目的】克隆CsPGIP并分析其表达特性,转化柑橘得到超表达转基因株系,并进行柑橘溃疡病抗性评价,为柑橘溃疡病分子育种提供理论依据。【方法】从晚锦橙和四季橘中克隆柑橘CsPGIP,使用MEGA6进行多序列比对并构建系统发育树;采用在线软件B... 【目的】克隆CsPGIP并分析其表达特性,转化柑橘得到超表达转基因株系,并进行柑橘溃疡病抗性评价,为柑橘溃疡病分子育种提供理论依据。【方法】从晚锦橙和四季橘中克隆柑橘CsPGIP,使用MEGA6进行多序列比对并构建系统发育树;采用在线软件BaCelLo和SignalP 4.0进行亚细胞定位和信号肽预测并用GFP瞬时表达确定CsPGIP在细胞内的定位;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)比较接种溃疡病菌前后高感品种和高抗品种中柑橘CsPGIP的表达特性,分析溃疡病菌侵染与CsPGIP表达的相关性;农杆菌介导遗传转化晚锦橙,采用GUS染色初筛、PCR鉴定和qRT-PCR相结合的方法鉴定超表达转基因株系;观察转基因和野生型株系表型变化,分析其株高、叶片表型;离体针刺法对超表达转基因株系和野生型株系进行柑橘溃疡病抗性评价,统计病斑面积和病情指数,分析CsPGIP表达对柑橘抗、感溃疡病的影响。【结果】晚锦橙和四季橘CsPGIP均编码328个氨基酸,与已报道的柑橘中的PGIP同源性高达99.39%,都包含2个PGIP基因典型的LRR结构域(LRR_1和LRR_2);构建系统进化树发现甜橙中的CsPGIP与葡萄中的PGIP(GSVIVT01033370001)遗传距离最近,相似度达到62.97%,推测CsPGIP与葡萄中的PGIP具有类似的抗病效果。亚细胞定位和信号肽预测结果表明CsPGIP属于分泌蛋白,GFP洋葱瞬时表达证明柑橘CsPGIP定位在细胞膜和细胞壁,与预测结果一致。高感品种晚锦橙和高抗品种四季橘接种溃疡病菌后CsPGIP的表达特性不同,在高感品种中表达显著下调,而高抗品种中表达显著上调且维持在较高水平,推测CsPGIP与柑橘溃疡病的抗性相关。构建CsPGIP超表达载体并转化晚锦橙,通过PCR鉴定和qRT-PCR确定其中9个(OE1、OE3、OE4、OE5、OE6、OE9、OE10、OE12和OE14)为CsPGIP超表达阳性株系。通过对转基因株系的表型观察发现OE3、OE14株系表型与野生型株系相比差异明显,植株表现为较矮小,其中OE14出现叶片卷曲、增厚的表型变化。对CsPGIP超表达转基因株系(8个株系)进行离体抗溃疡病评价,结果显示超表达转基因株系可以使柑橘溃疡病病斑面积降至野生型的24.11%—83.88%,其中OE1株系的病斑面积最小;从病情指数来看,除OE3株系外,其余株系的病情指数均比野生型显著下降(为野生型的23.12%—75.49%),其中OE1下降最显著,综上结果可知超表达CsPGIP可以有效抑制柑橘溃疡病菌的生长。【结论】CsPGIP是柑橘响应溃疡病菌侵染的重要基因,可抑制或减轻柑橘溃疡病的发病程度,在柑橘抗溃疡病机理研究方面具有较大的应用价值,也可作为柑橘抗溃疡病分子育种的一个候选基因。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 CsPGIP 超表达 溃疡病抗性
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转CiNPR4基因柑橘抗溃疡病的机制解析 被引量:2
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作者 张婧芸 刘语诺 +3 位作者 王兆昊 彭爱红 陈善春 何永睿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期3871-3880,共10页
【目的】病程相关基因非表达子1(non-expressor of pathogenesis-related gene 1,NPR1)是水杨酸(salicylic acid,SA)介导的系统获得性抗性信号转导途径中一个重要的转录因子,在调节植物的抗病方面发挥着关键性的作用。研究耐黄龙病的‘J... 【目的】病程相关基因非表达子1(non-expressor of pathogenesis-related gene 1,NPR1)是水杨酸(salicylic acid,SA)介导的系统获得性抗性信号转导途径中一个重要的转录因子,在调节植物的抗病方面发挥着关键性的作用。研究耐黄龙病的‘Jackson’葡萄柚(Citrus paradisi)中的NPR1-like基因CiNPR4对柑橘溃疡病的抗性,解析过表达CiNPR4的转基因晚锦橙(C.sinensis)抗柑橘溃疡病的机理。【方法】选取黄龙病抗性增强的CiNPR4转基因柑橘,采取完全成熟的叶片利用针刺法进行柑橘溃疡病的离体抗性评价分析;在此基础上,对溃疡病抗性增强的CiNPR4转基因植株利用针刺法离体接种溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc),统计接种Xcc后0、1、3、5、7和9 d的细菌数量;利用注射法对溃疡病抗性增强的CiNPR4转基因植株叶片接种Xcc,接种后0、3和5 d收集接种部位的叶片,测定叶片中SA和茉莉酸(jasmonic acid,JA)含量;同时,收集接种Xcc后0、3和5 d接种部位的叶片,利用实时荧光定量PCR分析SA和JA分别介导的防御反应相关基因CsPR1和CsPDF1.2在Xcc诱导下表达水平的变化;根据CiNPR4蛋白与TGA转录因子相互作用网络预测CiNPR4互作蛋白为Ciclev10005080m和Ciclev10001081m,以甜橙为参考基因组,将这两个基因在https://www.citrusgenomedb.org/网站上进行blastx分析,预测CiNPR4在甜橙基因组中互作的候选蛋白,克隆CiNPR4和候选蛋白基因的cDNA,利用同源重组法分别构建诱饵载体和猎物载体,并将诱饵质粒和猎物质粒共转入酵母菌株Y2HGold中,进行点对点酵母双杂交分析。【结果】CiNPR4的超量表达减轻了转基因柑橘叶片上溃疡病的症状,柑橘溃疡病抗性增强的CiNPR4转基因植株叶片上Xcc的生长比较缓慢,在接种Xcc后9 d,转基因植株Xcc数量显著低于野生型(wild type,WT)晚锦橙;Xcc诱导0 d,溃疡病抗性增强的CiNPR4转基因植株含有与WT植株无差异的SA含量,随着Xcc诱导时间的延长,CiNPR4转基因植株中SA的含量显著增加;而Xcc处理0 d时,WT植株含有显著高于CiNPR4转基因植株的JA含量,随后,JA含量在CiNPR4转基因植株中逐步上升,Xcc处理5 d时,达到显著高于WT植株的水平;而WT植株在整个处理期间SA和JA的含量基本保持不变;溃疡病抗性增强的转基因植株受Xcc诱导3 d时CsPR1的表达水平迅速上升,达到与WT植株差异显著的水平,而CsPDF1.2的表达水平在Xcc诱导5 d时上升;WT植株受Xcc诱导后CsPR1的表达水平没有发生显著变化,而CsPDF1.2的表达水平在Xcc诱导5 d时上升,且显著高于CiNPR4转基因植株中CsPDF1.2的表达水平;酵母双杂交分析证实,CiNPR4与甜橙基因组中的CsTGA2转录因子互作。【结论】CiNPR4与CsTGA2转录因子互作,通过促进SA而抑制JA介导的防御反应,调控转基因柑橘对溃疡病的抗性。 展开更多
关键词 CiNPR4 柑橘溃疡病 水杨酸 茉莉酸 TGA转录因子
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含裂纹砂浆试件的非共线混频超声试验研究 被引量:3
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作者 刘剑锋 汪魁 +1 位作者 彭爱红 赵明阶 《建筑材料学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第3期221-227,共7页
为研究非线性超声非共线混频检测方法,证实2列入射基频波散射出混频波的可行性,基于混频测试理论,组建了测试系统,并讨论了最适合测试系统的激励幅值;在此基础上,针对含不同长度和不同角度预制裂纹的砂浆试件,进行了非共线混频法的检测... 为研究非线性超声非共线混频检测方法,证实2列入射基频波散射出混频波的可行性,基于混频测试理论,组建了测试系统,并讨论了最适合测试系统的激励幅值;在此基础上,针对含不同长度和不同角度预制裂纹的砂浆试件,进行了非共线混频法的检测试验,分析了超声非线性系数与裂纹长度和角度的关系.研究表明:非共线混频检测中的最佳激励幅值为100 V;随着裂纹长度和角度的增大,混频法非线性系数逐渐增大,且混频振幅也有类似趋势;为了验证非共线混频法的可靠性,将非共线混频法与高次谐波法的试验结果进行对比,得到了非共线混频法非线性系数对裂纹长度和角度的变化更敏感、相关趋势更显著的规律,证实了非共线混频法可用于混凝土等非均质材料的损伤检测. 展开更多
关键词 裂纹 非线性超声 非共线混频 非线性系数
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钢渣残留含水率对其沥青混合料水稳定性影响研究 被引量:7
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作者 尹亚东 尚宇 +3 位作者 彭爱红 杨俊霖 侯强 罗蓉 《武汉理工大学学报(交通科学与工程版)》 2018年第3期511-514,共4页
针对钢渣孔隙分布丰富、吸水率与常规石料相比较大的问题,通过设计试验测量钢渣在160℃下的残留含水率大小,分析残留含水率随时间的变化规律.并采用不同含水率的钢渣作为粗细集料成型钢渣沥青混合料试件.通过浸水马歇尔试验以及冻融劈... 针对钢渣孔隙分布丰富、吸水率与常规石料相比较大的问题,通过设计试验测量钢渣在160℃下的残留含水率大小,分析残留含水率随时间的变化规律.并采用不同含水率的钢渣作为粗细集料成型钢渣沥青混合料试件.通过浸水马歇尔试验以及冻融劈裂试验评价其水稳定性,建立钢渣残留含水率与其混合料水稳定性的关系,结果表明,随着钢渣的残留含水率的增大,沥青混合料的水稳定性呈现降低的趋势. 展开更多
关键词 钢渣 残留含水率 沥青混合料 浸水马歇尔 冻融劈裂 水稳定性
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鱼腐乳发酵过程中游离氨基酸含量及抗氧化活性的变化 被引量:12
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作者 周常义 沈会玲 +5 位作者 江锋 江晓颖 林伟言 彭爱红 刘玉 苏国成 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第12期42-45,共4页
利用总状毛霉(Mucor racemosus)和红曲霉(Monascus)F1对鱼豆腐进行发酵研制鱼腐乳,对鱼腐乳发酵过程中的游离氨基酸及抗氧化活性的变化规律进行分析。结果表明:在发酵过程中,鲜味氨基酸、必需氨基酸、疏水氨基酸、总氨基酸的含量都呈逐... 利用总状毛霉(Mucor racemosus)和红曲霉(Monascus)F1对鱼豆腐进行发酵研制鱼腐乳,对鱼腐乳发酵过程中的游离氨基酸及抗氧化活性的变化规律进行分析。结果表明:在发酵过程中,鲜味氨基酸、必需氨基酸、疏水氨基酸、总氨基酸的含量都呈逐渐升高的趋势,在后熟第28天时分别达到了138.57 mg/100 g、491.68 mg/100 g、340.06 mg/100 g、915.77 mg/100 g。在发酵过程中DPPH自由基清除率和羟自由基清除率也呈逐渐升高的趋势,在后熟第28天时分别达到70.30%和63.11%,分别比发酵开始时提高了53.09%和24.14%。 展开更多
关键词 鱼腐乳 发酵 游离氨基酸 抗氧化活性
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鱼肉中LMG的分子印迹仿生ELISA检测方法 被引量:1
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作者 彭爱红 王茜雅 +2 位作者 林郑忠 陈晓梅 黄志勇 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第1期14-19,共6页
针对水产品中隐性孔雀石绿(leuco malachite green,LMG)残留的问题,建立了鱼肉中LMG的分子印迹仿生酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以LMG为模板分子,在p H=8. 5的Tris-HCl介质中,多巴胺(dopamine,DA... 针对水产品中隐性孔雀石绿(leuco malachite green,LMG)残留的问题,建立了鱼肉中LMG的分子印迹仿生酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以LMG为模板分子,在p H=8. 5的Tris-HCl介质中,多巴胺(dopamine,DA)经氧化自聚合4 h即可在微孔板表面形成聚合物膜,经V(甲醇)∶V(乙酸)=9∶1混合溶液洗脱模板分子后,形成LMG分子印迹聚合物膜(membrane of molecularly imprinted polymer,MIP)。以LMG-MIP膜为仿生抗体,建立了鱼肉中LMG残留的仿生ELISA检测方法。该方法灵敏度为5. 18μg/L,检出限达0. 03μg/L。利用隐性结晶紫和孔雀石绿这2种LMG的结构类似物进行方法的特异性试验,交叉反应率为21. 3%。实际样品加标回收实验表明,方法的回收率为71. 8%~73. 5%,RSD≤4. 2%。结果表明,该检测方法可用于鱼肉中LMG残留的快速筛查。 展开更多
关键词 隐性孔雀石绿 酶联免疫吸附法 分子印迹仿生抗体 鱼肉
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CsEXPA8过表达对‘晚锦橙’生长及溃疡病抗性的影响
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作者 彭爱红 张婧芸 +3 位作者 陈志毅 苏娟 何永睿 姚利晓 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期971-981,共11页
为了明确扩展蛋白基因CsEXPA8的生物学功能,通过构建超量表达和干扰表达CsEXPA8的载体转化易感溃疡病的柑橘品种‘晚锦橙’,对获得的转基因植株进行表型分析和对溃疡病抗性评价。结果表明,CsEXPA8在‘晚锦橙’中具有组织表达特异性,并... 为了明确扩展蛋白基因CsEXPA8的生物学功能,通过构建超量表达和干扰表达CsEXPA8的载体转化易感溃疡病的柑橘品种‘晚锦橙’,对获得的转基因植株进行表型分析和对溃疡病抗性评价。结果表明,CsEXPA8在‘晚锦橙’中具有组织表达特异性,并受溃疡病菌诱导表达;CsEXPA8的过表达促进了叶片的长度和宽度的增加以及春梢直径的增粗,提高了对溃疡病的敏感性;而干扰CsEXPA8的表达后,转基因植株的叶片长度、宽度和春梢直径变小,但对溃疡病的抗性增强。上述结果表明,CsEXPA8正向调节了‘晚锦橙’的生长,负向调控了‘晚锦橙’对溃疡病的抗性。 展开更多
关键词 柑橘 扩展蛋白 CsEXPA8 植物生长 柑橘溃疡病 抗性
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环境臭氧暴露与冠心病的严重程度:天冬氨酸氨基转移酶的预测作用
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作者 刘翠怡 李昭源 +6 位作者 赵柏铭 戴钟离 王若男 冯雨嘉 彭爱红 向浩 万静 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2024年第5期557-563,共7页
目的:探讨臭氧暴露与冠心病严重程度的关系以及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的中介作用。方法:回顾性分析武汉大学中南医院2016—2021年行冠状动脉造影的2537例冠心病患者。根据SYNTAX评分将其分为低分组(0~22)和高分组(≥23)。采用Logisti... 目的:探讨臭氧暴露与冠心病严重程度的关系以及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的中介作用。方法:回顾性分析武汉大学中南医院2016—2021年行冠状动脉造影的2537例冠心病患者。根据SYNTAX评分将其分为低分组(0~22)和高分组(≥23)。采用Logistic回归用于评估臭氧暴露与冠心病严重程度的关系,线性回归探讨臭氧暴露与AST的关系,中介效应分析评估血清AST在臭氧暴露与冠心病严重程度之间的预测作用。结果:臭氧浓度增加,罹患更严重的冠心病的风险增加(OR=1.072,P<0.05)。老年患者中AST(β=3.622,P<0.05)与臭氧暴露呈正相关。同时AST在臭氧暴露和冠心病严重程度中起中介作用,中介效应量为13.1%。结论:长期臭氧暴露与冠心病的严重程度有关,并且AST可作为臭氧暴露下冠心病严重程度的预测指标。 展开更多
关键词 臭氧 冠心病 AST 中介效应分析
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CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑 被引量:13
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作者 邹修平 范迪 +7 位作者 彭爱红 何永睿 许兰珍 雷天刚 姚利晓 李强 罗克明 陈善春 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期337-344,共8页
为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别... 为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。 展开更多
关键词 柑橘 CRISPR/Cas9系统 CsLOB1 多位点 基因编辑
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CsWRKY22启动子的克隆及响应柑橘溃疡病菌侵染的表达特征 被引量:4
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作者 王丽娟 龙俊宏 +6 位作者 谢竹 吴柳 彭爱红 何永睿 龙琴 陈善春 邹修平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期677-690,共14页
由柑橘黄单胞杆菌致病变种(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)引起的柑橘溃疡病严重危害着柑橘产业的健康可持续发展。前期研究表明,CsWRKY22可能是溃疡病感病基因。从‘晚锦橙’(Citrus sinensis Osbeck)中克隆了CsWRKY22的两个等... 由柑橘黄单胞杆菌致病变种(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)引起的柑橘溃疡病严重危害着柑橘产业的健康可持续发展。前期研究表明,CsWRKY22可能是溃疡病感病基因。从‘晚锦橙’(Citrus sinensis Osbeck)中克隆了CsWRKY22的两个等位启动子pCsWRKY22-1和pCsWRKY22-2,长度分别为1 428和1406bp。序列分析表明两个等位启动子序列一致性为91.76%。两个等位启动子含有多种参与植物防御反应和生长发育的顺式作用元件,相同元件的数量和位置基本一致,不同的是,在TATA-box下游,pCsWRKY22-1含有2个22 bp长的TA-rich转录增强序列,而pCsWRKY22-2只含有1个。构建CsWRKY22启动子控制GUS报告基因的植物表达载体pC sW RKY22::GUS,并用农杆菌介导法转化‘晚锦橙’,经GFP活性检测和PCR鉴定获得pCsWRKY22-1::GUS和pCsWRKY22-2::GUS转基因植株各8株和4株。GUS组织化学染色、GUS酶活性及定量PCR分析表明,CsWRKY22启动子具有较强的机械伤诱导活性和柑橘溃疡病病原菌诱导活性,同时具有一定水平的基础表达特性。pCsWRKY22-1机械伤诱导活性高于pCsWRKY22-2,而pCsWRKY22-2溃疡病菌诱导活性高于pCsWRKY22-1。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病 CsWRKY22 启动子 诱导 GUS
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早熟脐橙新品种‘青秋’ 被引量:4
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作者 陈善春 雷天刚 +3 位作者 何永睿 彭爱红 许兰珍 邹修平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2457-2458,共2页
脐橙新品种‘青秋’系由‘眉红’脐橙早熟变异株选育而成。果实卵圆形或长椭圆形,果形指数1.18,单果质量270 g,果皮橙红色,果肉脆甜化渣,风味浓郁,可溶性固形物含量12.9%,可滴定酸0.67%,维生素C 0.59 mg·mL^-1,可食率70.8%。自然... 脐橙新品种‘青秋’系由‘眉红’脐橙早熟变异株选育而成。果实卵圆形或长椭圆形,果形指数1.18,单果质量270 g,果皮橙红色,果肉脆甜化渣,风味浓郁,可溶性固形物含量12.9%,可滴定酸0.67%,维生素C 0.59 mg·mL^-1,可食率70.8%。自然坐果率高,丰产性强,嫁接苗定植第3年平均株产9.9 kg,高换树第3年平均株产23.4 kg。在重庆地区果实10月中下旬成熟。 展开更多
关键词 脐橙 芽变 品种
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柑橘响应黄龙病菌侵染的NAC基因的克隆及表达分析 被引量:7
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作者 郑林 王帅 +5 位作者 刘语诺 杜美霞 彭爱红 何永睿 陈善春 邹修平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1441-1457,共17页
挖掘柑橘抗黄龙病(Huanglongbing,HLB)基因是抗病育种的基础和关键。以感染黄龙病菌亚洲种Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)早期(2个月)锦橙根和叶片中脉比较转录组数据为基础,筛选到9个响应柑橘黄龙病侵染诱导的NAC基因,从中选... 挖掘柑橘抗黄龙病(Huanglongbing,HLB)基因是抗病育种的基础和关键。以感染黄龙病菌亚洲种Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)早期(2个月)锦橙根和叶片中脉比较转录组数据为基础,筛选到9个响应柑橘黄龙病侵染诱导的NAC基因,从中选3个差异表达水平较高的基因克隆,分别命名为Cs NAC21/22、Cs NAC68和Cs NAC78。生物信息分析表明3个基因均符合NAC基因家族的特征;烟草亚细胞定位结果表明,Cs NAC68定位在细胞核,Cs NAC21/22和Cs NAC78定位在细胞核和细胞质。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,3个候选基因在易感HLB的锦橙、耐病的马蜂柑和高耐病的九里香的组织和病原菌诱导表达特征呈现明显差异。以健康植株为对照,Cs NAC68和Cs NAC78主要在锦橙的根中响应CLas感染,显著上调表达,Cs NAC68在九里香叶肉和马蜂柑根中响应CLas感染,显著上调表达;Cs NAC21/22主要在锦橙根和马蜂柑叶肉中显著下调表达。以‘锦橙’叶片为试材通过q RT-PCR分析候选基因响应SA、JA、ABA、ETH诱导的表达特征,结果表明,3个基因可能参与ABA的信号转导途径,Cs NAC68可能参与SA和JA的信号转导途径,而Cs NAC78可能参与ETH的信号转导途径。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 NAC转录因子 基因克隆 表达分析
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柑橘抗溃疡病转录因子CsAP2-09互作蛋白筛选与分析 被引量:5
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作者 祁静静 窦万福 +8 位作者 张庆雯 胡安华 陈善春 雷天刚 彭爱红 许兰珍 姚利晓 何永睿 李强 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期432-444,共13页
以前期获得的柑橘抗溃疡病的正调控转录因子基因CsAP2-09超表达植株为材料,利用GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)联合液相色谱串联质谱(LC–MS/MS)方法筛选并鉴定CsAP2-09的互作蛋白。首先原核表达并纯化GST-CsAP2-09作为诱饵蛋白,... 以前期获得的柑橘抗溃疡病的正调控转录因子基因CsAP2-09超表达植株为材料,利用GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)联合液相色谱串联质谱(LC–MS/MS)方法筛选并鉴定CsAP2-09的互作蛋白。首先原核表达并纯化GST-CsAP2-09作为诱饵蛋白,然后与CsAP2-09超表达植株叶片总蛋白孵育、洗脱后进行SDS-PAGE验证,最后进行LC–MS/MS鉴定。得到17个互作蛋白,将蛋白进行注释、GO分析、KEGG分析,发现其中5个可能与植物抗病相关(如过氧化氢酶Cs3g27280)。构建这17个蛋白的互作网络,其中14个蛋白的互作关系得到已有数据的支持。对CsAP2-09与互作蛋白的共表达分析发现CsAP2-09超表达引起了16个蛋白表达上调和1个蛋白表达下调。 展开更多
关键词 柑橘 柑橘溃疡病 GST pull-down CsAP2-09 AP2/ERF 互作蛋白
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