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禽流感病毒H5N1基因突变对神经氨酸酶抑制剂敏感性和神经氨酸酶活性的影响 被引量:1
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作者 谌资 郑煜煌 +2 位作者 Yipu Lin patrick j collins Alan j Hay 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第27期1924-1928,共5页
目的 研究感染人的禽流感病毒H5N1神经氨酸酶突变I117V,I314V,I117V+I314V对神经氨酸酶抑制剂(NAIs)敏感性和神经氨酸酶(NA)活性的影响.方法 定点突变技术将变异位点引入禽流感病毒株A/Vietnam/1203/04(H5N1)(VN1203)的NA基因... 目的 研究感染人的禽流感病毒H5N1神经氨酸酶突变I117V,I314V,I117V+I314V对神经氨酸酶抑制剂(NAIs)敏感性和神经氨酸酶(NA)活性的影响.方法 定点突变技术将变异位点引入禽流感病毒株A/Vietnam/1203/04(H5N1)(VN1203)的NA基因中,以A/WSN/33(H1N1)为背景,通过反向遗传学方法构建重组流感病毒,鸡胚传代增殖病毒,荧光定量评估病毒对NAIs的敏感性和NA活性(IC50值和Km,Ki值).结果 与野生株VN1203相比,I117V使NA对奥司他韦敏感性降低(IC50值升高了17倍,Ki值升高了20倍),对扎那米韦敏感性无明显影响(IC50值升高了2倍,Ki值升高了3倍),NA活性降低(Km值升高了23倍).I314V对NAIs敏感性和NA活性均无明显影响.结论 初步结果认为NA突变I117V和I314V对感染人的禽流感病毒H5N1并不产生NAIs耐药,临床上仍然可以用奥司他韦或扎那米韦抗病毒治疗. 展开更多
关键词 正粘病毒科 神经氨酸酶 突变 酶抑制剂 禽流感病毒H5N1
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禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的细胞膜上提纯和结晶
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作者 谌资 郑煜煌 +5 位作者 Yipu Lin David j Stevens Steve A Wharton patrick j collins junfeng Liu Alan j Hay 《中国医师杂志》 CAS 2009年第5期584-586,590,共4页
目的从细胞膜上提纯禽流感病毒H5N1的血凝素蛋白H51151F和H51151F+A134V+E186D,并使蛋白结晶。方法细胞内大量增殖重组牛痘病毒,去垢剂提取细胞膜中的HA蛋白,连续蔗糖密度梯度超速离心,Western印迹检测,菠萝蛋白酶等裂解HA,离... 目的从细胞膜上提纯禽流感病毒H5N1的血凝素蛋白H51151F和H51151F+A134V+E186D,并使蛋白结晶。方法细胞内大量增殖重组牛痘病毒,去垢剂提取细胞膜中的HA蛋白,连续蔗糖密度梯度超速离心,Western印迹检测,菠萝蛋白酶等裂解HA,离子交换层析,SDS—PAGE电泳并染色检测蛋白纯度,坐滴气象扩散法结晶。结果从细胞膜中提取了高纯度的血凝素蛋白H51151F和H51151F+A134V+E186D,并得到了H51151F蛋白晶体。结论首次获得了禽流感病毒H5N1的I-IS1151F蛋白晶体,为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性打下基础。 展开更多
关键词 流感 流感病毒A型 鸟/分离和提纯 血凝素糖蛋白类 流感病毒/分离和提纯
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