人-鼠嵌合抗人组织蛋白酶B抗体体外抑制组织蛋白酶B活性的试验

目的 体外试验人 鼠嵌合抗人组织蛋白酶B(抗CatB)抗体对CatB的抑制作用。方法 培养 1株分泌人 鼠嵌合抗人CatB抗体细胞 ,收集细胞培养上清 ,分离纯化人 鼠嵌合抗人CatB抗体 ,用于体外抑制CatB活性试验。结果 该抗体在体外能抑制CatB活性。结论 抗CatB抗体能特异结合CatB并抑制其酶活性 ,将可能用于CatB过度表达的癌症治疗。

抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体的表达及体外对癌细胞浸润的抑制效应

目的 制备抗人组织蛋白酶B人 鼠嵌合抗体。方法 从分泌抗人组织蛋白酶B单克隆抗体的杂交瘤细胞株提取总RNA ,通过RT PCR扩增单克隆抗体VH 和VL 的DNA片段 ,对其进行序列分析 ,证实具有小鼠可变区完整的结构 ,利用基因工程技术将它们分别和人Ig的Cγ1和Cκ恒定区基因连接组建人鼠嵌合轻链和重链Fab抗体 ,并克隆到pcDNA3真核细胞表达载体。将重组体转染到中国仓鼠卵巢细胞 (CHO) ,通过G4 18筛选、ELISA检测和Westernblot鉴定 ,分离纯化抗人组织蛋白酶B人 鼠嵌合抗体 ,用于体外抑制癌细胞浸润的试验。结果 得到分泌抗人组织蛋白酶B人 鼠嵌合抗体的中国仓鼠卵巢细胞克隆 (C6 2A2 ) ,分泌的抗人组织蛋白酶B人 鼠嵌合抗体在体外能抑制癌细胞浸润。结论 人 鼠嵌合抗体的成功表达 ,将有可能用于组织蛋白酶B过度表达的有关疾病的治疗。