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灰树花液体培养菌丝疏水蛋白基因的发现及鉴定
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作者 杨玖霞 杨啸天 +4 位作者 葛路 王波 马忠强 乔明强 徐海津 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期37-44,共8页
灰树花是一种具有极高营养价值的可食用菇,疏水蛋白是一类小分子蛋白质,由于其独特的表面活性可使真菌菌丝壁表面十分憎水.采取文库构建方法,构建了灰树花液体培养菌丝cDNA文库,筛选得到两个新疏水蛋白基因,hgfⅢ和hgfⅣ.cDNA序列比对发... 灰树花是一种具有极高营养价值的可食用菇,疏水蛋白是一类小分子蛋白质,由于其独特的表面活性可使真菌菌丝壁表面十分憎水.采取文库构建方法,构建了灰树花液体培养菌丝cDNA文库,筛选得到两个新疏水蛋白基因,hgfⅢ和hgfⅣ.cDNA序列比对发现,hgfⅢ和hgfⅣ同灰树花Ⅰ型疏水蛋白基因hgfⅠ有相对较高同源性;且hgfⅢ和hgfⅣ编码的蛋白与HGFI水缘性图谱相似;系统发育树比对发现hgfⅢ和hgfⅣ所编码蛋白与HGFI分别位于不同的分支;基因转录模式分析表明,hgfⅢ在菌丝中高水平表达,而hgfⅣ则在灰树花子实体中特异性转录. 展开更多
关键词 灰树花 疏水性 真菌 菌丝 表达模式
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过表达Pseudomonas mendocina复制起始相关蛋白提高菌体繁殖速度
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作者 范旭 赵风杰 +1 位作者 乔明强 杨超 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期19-25,共7页
复制起始蛋白DnaA通过识别复制起始位点oriC上的特殊序列,并招募复制复合体起始复制,它通过绑定ATP或ADP来对复制起始的开始进行调节.DNA聚合酶Ⅲ的β亚基DnaN蛋白,负责将DNA聚合酶III连接到已经解旋的DNA上,以开始复制过程.通过过表达... 复制起始蛋白DnaA通过识别复制起始位点oriC上的特殊序列,并招募复制复合体起始复制,它通过绑定ATP或ADP来对复制起始的开始进行调节.DNA聚合酶Ⅲ的β亚基DnaN蛋白,负责将DNA聚合酶III连接到已经解旋的DNA上,以开始复制过程.通过过表达复制起始相关蛋白DnaA和DnaN,促进了菌体的繁殖能力,优化了菌体的生长状态,缩短了菌体倍增时间,为构建Pseudomonas mendocina工程菌株提供了参考. 展开更多
关键词 Pseudomonas mendocina 复制起始蛋白 生长速度 扫描电镜 菌体倍增时间
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黄瓜叶绿体表达载体构建与稳定性研究 被引量:1
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作者 王宏刚 白艳玲 +6 位作者 徐海津 刘盛海 张文娟 刘青 张秀明 乔明强 王勇 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期61-66,共6页
以黄瓜类质粒pC3为重要元件,构建了黄瓜叶绿体表达载体,并采用电穿孔方法对黄瓜离体叶绿体进行转化.以叶绿体总DNA为模板扩增出预期长度的外源基因,结果表明,类质粒pC3的整合没有影响表达载体结构的稳定.这种特异性黄瓜叶绿体表达载体... 以黄瓜类质粒pC3为重要元件,构建了黄瓜叶绿体表达载体,并采用电穿孔方法对黄瓜离体叶绿体进行转化.以叶绿体总DNA为模板扩增出预期长度的外源基因,结果表明,类质粒pC3的整合没有影响表达载体结构的稳定.这种特异性黄瓜叶绿体表达载体的构建,为研究高等植物类质粒的起源、细胞器基因组间遗传物质传递等基础理论,以及推进叶绿体转化的应用提供了重要的工具. 展开更多
关键词 黄瓜 类质粒 叶绿体 表达载体 构建
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疏水蛋白HGFI用于载基因组织工程支架的研究 被引量:1
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作者 张沛欣 马绍扬 +1 位作者 乔明强 张钧 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1-7,共7页
以具有两亲性的疏水蛋白HGFI为基础,通过正负电荷的相互作用将质粒与PEI的复合体固定在了修饰有疏水蛋白HGFI的PCL支架材料上.对不同时间段释放的质粒进行了定量测量并绘制曲线,结果表明载基因支架上的基因有四分之三左右在固定的12 h... 以具有两亲性的疏水蛋白HGFI为基础,通过正负电荷的相互作用将质粒与PEI的复合体固定在了修饰有疏水蛋白HGFI的PCL支架材料上.对不同时间段释放的质粒进行了定量测量并绘制曲线,结果表明载基因支架上的基因有四分之三左右在固定的12 h内释放.用载基因支架进行体外293T的转染实验,载基因支架的转染效率为21.76%.该转染效率与直接用转基因试剂对贴壁细胞转染的效率低很多,但对于组织工程支架来说,已具有一定的基因递送功能.大鼠皮下埋植实验表明,在体内埋植3 d后,载基因支架有着良好的体内转染效果,对体内的转基因阳性细胞进行初步检测发现,支架埋植初期有大部分被转染细胞为巨噬细胞,而对巨噬细胞进行转染是否对组织修复有益还需进一步的研究.大鼠皮下埋植2 w后,对埋植的材料进行血管化的检测,组织切片进行vWF免疫荧光染色和成像,成像结果说明载基因支架显著地促进了支架材料在体内的血管新生,推测支架上固定的质粒在体内转染后表达出了目的蛋白e NOS,从而促进了支架材料周围组织的血管化.本实验中,载基因支架的转染效率还需进一步提高,体内转基因阳性细胞的种类还需进行进一步鉴定,功能蛋白eNOS的表达和检测还需要进一步的研究. 展开更多
关键词 疏水蛋白 转基因 组织工程 电纺丝 ENOS
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A label-free lateral offset spliced coreless fiber MZI biosensor based on hydrophobin HGFI for TNF-α detection
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作者 WANG Bo DUAN Shaoxiang +3 位作者 ZHANG Hao XU Haijin LIU Bo qiao mingqiang 《Optoelectronics Letters》 EI 2022年第5期263-268,共6页
A real-time label-free lateral offset spliced coreless fiber(CF)Mach-Zehnder interferometer(MZI)biosensor functionalized with hydrophobin Grifola frondosa I(HGFI)was proposed for the detection of cytokine tumour necro... A real-time label-free lateral offset spliced coreless fiber(CF)Mach-Zehnder interferometer(MZI)biosensor functionalized with hydrophobin Grifola frondosa I(HGFI)was proposed for the detection of cytokine tumour necrosis factor alpha(TNF-α).The nanolayer self-assembled on the optical fiber surfaces by HGFI rendered the immobilization of probe TNF-αantibody and recognition of antigen TNF-α.Trifluoroacetic acid was utilized to remove the HGFI layer from the glass surface,which was validated by field emission scanning electron microscopy(FESEM)and water contact angle(WCA).Results demonstrated that the processes of HGFI modification,antibody immobilization and specific antibody detection can be monitored in real time.The proposed biosensor exhibited good specificity,repeatability and low detection limit for TNF-α,extending its application in inflammation and disease monitoring. 展开更多
关键词 FIBER interferometer OFFSET
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