大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。

“金花”菌的分离鉴定及其对紫娟红茶发酵品质的影响

为探究泾阳散装茯砖茶中“金花”菌的种类及其对紫娟红茶品质的影响,从泾阳散装茯砖茶中分离得到谢瓦曲霉(Aspergillus chevalieri),并用其对紫娟红茶进行固态发酵。结果表明,紫娟红茶经发酵后,“金花”菌数量极显著增加,茶汤色泽由亮黄色变为橙红色;同时茶多酚、儿茶素、水浸出物、游离氨基酸、茶黄素和茶红素均整体出现不同程度的下降,而花青素、总黄酮含量整体呈升高的变化趋势。经谢瓦曲霉发酵后的紫娟红茶不仅能有效改善其茶汤色泽滋味,还可以促进紫娟红茶发酵过程中抗氧化物质的释放。

增材制造金属晶格夹层结构研究现状与应用

金属晶格夹层结构具有优异的力、声、电、热综合性能。增材制造基于“离散+堆积”思想,层层堆叠制造,能够解放复杂金属晶格结构设计思路,为仿生设计和拓扑优化提供了更高的自由度,为后续开发出超轻、超强多功能晶格夹层结构提供了更多的可能。本文综述了增材制造金属晶格夹层结构的工艺,深入分析讨论了其结构设计、工艺优化、缺陷控制、性能调控和应用背景,总结了研究现状并展望了未来的发展前景。

冠突散囊菌对茶叶品质的影响及其发酵茶的功能活性研究进展

冠突散囊菌(Eurotium Cristatum)是茯砖茶“发花”过程中形成的优势菌种,是目前研究较深入的发酵类真菌。冠突散囊菌发酵茶叶后可改善茶汤滋味与香气,赋予茶叶多种活性生理功能。综述了冠突散囊菌的分离与鉴定、对茶叶品质的影响以及冠突散囊菌发酵茶的功能活性等方面的研究结果,旨在为冠突散囊菌发酵茶新产品的开发与应用提供参考。

人工光源对茶树生长及茶叶品质的影响研究进展

光是影响茶树生长及茶叶品质的重要因子。不同光质对于茶树生长和茶叶品质有着不同影响,不同品种茶树生长和茶类加工工艺对于光的响应也有所不同。综述了近年来人工光源补光对茶树生理特征、理化成分、色素类物质及香气类物质积累的影响,以期为人工光源在我国茶树设施栽培、茶叶全天候加工以及茶叶品质的提升等方面提供理论依据。

白芥子诱导的鸡内源性芥子碱降解菌的筛选、鉴定及酶活测定

本试验旨在通过分离鉴定白芥子诱导的芥子碱降解菌,并对其核心功能酶漆酶进行酶活测定,建立芥子碱的生物降解方法,为探寻白芥子等十字花科类非粮饲料资源的高效利用提供技术支撑。本试验以藏香鸡为模型,在基础日粮中添加20%白芥子饲喂28 d进行芥子碱降解菌体内诱导。分别采集鸡空肠、回肠、盲肠内容物在不同培养基中分离筛选芥子碱降解菌,对筛选出的优势菌进行形态学和分子生物学鉴定,测定该菌株的芥子碱降解效果和漆酶活性。结果表明:(1)在鸡盲肠中筛选出9株目标菌,筛出率明显高于空肠和回肠,并进一步选出1株芥子碱降解优势菌SDB2(Sinapine-degrading bacteria 2)。(2)经鉴定,SDB2菌株属于变形菌门;γ-变形菌纲;肠杆菌目;肠杆菌科;大肠埃希菌。(3)芥子碱浓度与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P <0.01),芥子碱浓度随培养时间增加而降低,培养72 h的芥子碱降解率可达50%。(4)漆酶活力与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P <0.01),漆酶活力随培养时间增加而降低。(5)漆酶活力与芥子碱浓度存在极显著的线性回归关系(P <0.01),漆酶活力与芥子碱浓度呈正相关。综上,本试验条件下,筛选出的SDB2能利用自身分泌的漆酶有效降解芥子碱,为高效利用十字花科类非粮饲料资源奠定了基础。

儿科急诊患儿B型钠尿肽升高的疾病谱分析及其严重性评估

目的:对儿科急诊患儿BNP检测升高的疾病谱进行分析并对其严重性进行评估。方法:于2020年1月1日至2020年12月31日期间,对在首都儿科研究所附属儿童医院急诊科就诊的可疑有心脏疾病或入抢救室病情危重的患儿,采用床旁Alere Triage心肺功能五联检测试板进行BNP检测;同期进行超声心动图检查,并对其中BNP>100 ng/L患儿的资料进行回顾性研究。结果:2020年期间,在急诊就诊者共141836人次,其中3945例(2.8%)进行了BNP检测,>100 ng/L共115例。115例患儿中男60例,女55例,年龄1天~15岁,中位数1岁。其中住院者94例(81.7%),多数入住于ICU(39例,41.5%)及心血管内科(26例,27.7%)。疾病谱包括先天性心脏病、川崎病、肺动脉高压、急性心肌炎、心肌病、严重心律失常等,其他疾病以脓毒症多见。心力衰竭者47例,心力衰竭组与无心力衰竭组BNP中位数分别为1165 ng/L和168 ng/L,差异有统计学意义(Z=-6.466,P<0.001)。超声心动图显示心脏结构和/或功能异常组的BNP值显著高于正常组,但心力衰竭患者中22例LVEF减低组与25例LVEF正常组的BNP比较无明显差异。死亡11例(9.6%),死亡组患者BNP中位数为1649 ng/L,存活组为758.5 ng/L,差异无统计学意义(Z=-1.75,P=0.08)。结论:儿科急诊患者BNP升高最常见的原因为多种疾病引起的心力衰竭、川崎病、肺动脉高压及脓毒症。床旁快速BNP检测有助于及时发现危重病例,与超声心动图检查具有协同互补作用。

无花果主要功能成分及其生物活性研究进展

无花果资源药食两用,营养丰富,含有多种功能活性成分,果肉、枝叶、根皮皆有利用价值。在查阅国内外近年来无花果功能成分提取、分离纯化鉴定、生物活性与药理研究、功能保健食品开发等方面文献的基础上,综述无花果多糖、黄酮、多酚类化合物、香豆素类化合物成分等生物活性的研究进展,重点对无花果的抗氧化、抗癌、抑菌、降血糖活性进行总结和比对分析,旨在为无花果资源的综合利用和功能性食品的开发提供参考。

医养结合新探索:互联网医院+养老院服务模式

利用互联网医院远程就诊、送药到家、线上开单、线下检查等优点,结合住养老人使用流程,创新性打造十大专属适老化服务,同时,互联网医院与养老院联袂提供全方位服务助力医养结合更紧密,构建“互联网医院+养老院”服务新模式,探索互联网医院在养老院的可持续应用,促进医养融合深度发展。经过2年多的实践,该模式已覆盖上海市全部16个区、70余家养老院,包括公建公营、公建民营、民建民营等多类型养老院。此模式有利于推动优质医疗资源下沉,化住养老人“数字鸿沟”为“数字红利”。

基于非靶向代谢组学分析杜仲金花茶发酵过程中代谢物的特征

为探究杜仲金花茶发酵过程中代谢物特征变化,以杜仲绿毛茶为原料,制成杜仲金花茶,利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱对分别发酵0、2、4、6、8、10 d杜仲金花茶中的小分子代谢物进行定量、定性和差异性分析。结果表明:杜仲金花茶在发酵过程中产生13类172种显著差异代谢产物,主要包括46种黄酮类、44种脂肪酸类、16种氨基酸和11种有机酸类等。进一步筛选杜仲金花茶发酵各时期中的显著差异代谢物,发现发酵后含量显著提高的生物活性物质包括黄酮类、脂肪酸和有机酸等,这些代谢物为提升杜仲茶的滋味和香气起到重要作用。发酵后,差异代谢物L-谷氨酰胺、20-羟二十碳四烯酸、葡萄糖醛酸、反式阿魏酸、诺缬氨酸和金丝桃苷含量提高,这与发酵前的杜仲茶相比,增加了抗氧化、降血压、解毒、抗炎、提高免疫力等保健功效。由此,发酵显著改变了杜仲茶中的代谢物,对杜仲金花茶滋味、香气品质和抗氧化等保健功能性成分的形成具有重要作用。

茶树施肥研究进展

施肥是保证茶树健康生长、提高产量和品质的重要保证。单施无机肥或有机肥均能够对茶叶产量、茶产品品质及土壤肥力等方面起到促进作用,但是存在明显的缺陷和隐患,如土壤酸化、氮素损失严重和茶鲜叶产量降低等。因此,在无机肥和有机肥配施基础上结合新型肥料和新型施肥技术体系,如硒肥、炭基水溶肥和智能水肥一体化等是茶园可持续发展的重要途径。综述了无机肥、有机肥、无机肥和有机肥配施3种施肥模式对茶树生长发育、茶叶产量、茶叶品质、土壤肥力等方面的影响,并结合茶园新型肥料和施肥技术,从多方位提出相关的发展建议,为实现茶园合理施肥、生产高产优质茶叶和提升茶园土壤质量提供参考。

大型综合性医院构建患者体验工作体系的实践与反思

上海市某医院聚焦患者体验,打造“一把手”工程,完善组织架构,组建患者体验处,专职化、专业化统筹协调患者体验工作。围绕就医看病流程体验、全健康管理体验、后勤服务保障体验、社会评估机制体验等患者体验“四个一件事”系统工程,形成医院患者体验工作体系雏形。在医院社会美誉度、患者体验度测评结果、患者表扬信数量等方面明显提升。

HVAF喷涂铁基非晶涂层工艺优化

铁基非晶材料具有优异的耐蚀性和耐磨性,空气/丙烷超音速火焰喷涂(HVAF)技术制备铁基非晶涂层近年来引起了广泛关注。由于铁基非晶粉在高温下粘度较大,很容易造成喷枪堵塞,制约了该技术的工程应用。通过在铁基非晶粉末中掺入10 wt.%~20 wt.%的180目白刚玉砂,缓解喷枪堵塞、改善涂层的喷涂稳定性。研究了白刚玉含量、喷涂气体压力、送粉速率、喷涂距离等对涂层沉积效率、抗拉结合强度、孔隙率及粘枪情况的影响规律。结果表明,Fe基粉/白刚玉复合粉喷涂可以实现20 min以上的稳定喷涂,且制备的涂层结合强度达到40 MPa以上,涂层孔隙率<1%,涂层粘枪情况得到显著改善。优化出了适用于铁基非晶粉HVAF喷涂的工艺方法,能够指导该技术的推广应用。

横风作用下列车动力车运行安全性与动态特性试验研究

强风作用会对列车运行安全性与稳定性产生重要影响作用,文中通过深入分析某动力集中动车组在大风环境下的动力学试验数据,明确了横风作用下列车动力车的主要运动形态,研究了横风风压、线路线况、列车速度等对列车运行安全性与动态特性的影响规律。结果表明:横风作用主要引起列车动力车车体侧滚和横摆运动,同时伴有一定摇头运动,使其脱轨系数、轮重减载率、轮轴横向力等安全性指标和车体横向振动加速度、横向平稳性指标数值明显增大;不同线路工况时横风对轮轨动力响应的影响存在差异,迎风曲线上车体向外轨的贴靠使轮轨横向力增大,背风曲线上横风阻止车体向内轨侧贴靠,使轮轨横向力有所减小;横风作用下脱轨系数、轮轴横向力、车体横向振动加速度会随着列车速度提高而增大,而轮重减载率和车体侧滚角基本不受车速影响。

膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能、血清生化及抗氧化指标的影响

试验旨在研究膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能、血清生化及抗氧化指标的影响。选择60日龄、平均体重700 g左右的崇仁麻公雏鸡600只,随机分为5组,每组5个重复,每个重复24只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在日粮中添加2.5%、5.0%、7.5%、10.0%膨化发酵菜籽粕。试验期56 d。结果表明:2.5%、5.0%、7.5%、10.0%膨化发酵菜籽粕组平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和耗料增重比(F/G)与对照组均无显著差异;膨化发酵菜籽粕添加水平与F/G存在二次回归关系(P<0.05),F/G随添加水平升高呈先降低后上升的趋势,以5.0%添加量最低;各组血清碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)和尿素氮(BUN)含量均无显著差异;各组血清过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均无显著差异,5.0%膨化发酵菜籽粕组总抗氧化能力(T-AOC)含量与0.0%组无显著差异,2.5%和5.0%膨化发酵菜籽粕组丙二醛(MDA)含量与对照组无显著差异。本试验条件下,肉鸡日粮中添加5.0%膨化发酵菜籽粕效果最佳。

铁路轨道检查仪在普速铁路轨道精测精捣作业中的应用

为提升轨道测量和捣固作业效率,应用轨检仪指导大型养路机械实施数字化精捣作业。针对铁路轨道检查仪在大型养路机械实施数字化精捣作业时,存在的推行起点与曲线四大桩点里程不一致、通过道岔有害空间影响测量数据准确性等问题,提出规范铁路轨道检查仪作业流程和制作专用工装消除有害空间等措施。经现场运用统计,利用轨检仪形成机捣方案进行机捣作业,作业效率明显提升,TQI降比比较明显。

芥子碱降解菌对肉种鸡产蛋性能和免疫功能的影响

【目的】本试验研究一次性腹腔注射芥子碱降解菌1(sinapine-degrading bacteria 1,SDB1)对肉种鸡产蛋性能和免疫功能的影响。【方法】将324只50周龄肉种鸡,平均分成6组,每组6个重复,每个重复9只鸡。试验第1天,组1一次性腹腔注射1 m L生理盐水,组2~6分别一次性腹腔注射1 m L浓度为106、107、108、109、1010CFU/m L的SDB1菌液。试验期14 d,各组饲喂同一基础饲粮。试验结束后,测定产蛋性能、血清Ig M、Ig G、s Ig A、IL-1、IL-2、IFN-γ、C3、C4及外周血T淋巴细胞亚群。【结果】(1)低剂量组产蛋率显著(P<0.05)高于高剂量组。(2)高剂量组血清Ig M、IL-1和IL-2水平显著(P<0.05)高于低剂量组。(3)各组血清Ig G、s Ig A、C3、C4、IFN-γ和外周血CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+淋巴细胞比例差异不显著(P>0.05)。【结论】低剂量SDB1(≤107CFU/m L)对肉种鸡产蛋性能和免疫功能没有不良影响,高剂量SDB1(≥108CFU/m L)能显著提高肉种鸡部分体液免疫和细胞因子水平,但会降低其产蛋性能。

邮储银行落实邮银协同战略的实践与思考

回顾了2018年以来邮储银行邮银协同工作的发展情况,选取分行典型案例,对基层邮银协同工作优秀经验进行了总结,对邮银协同发展存在的问题及其成因进行了分析,对做好下一步邮银协同工作提出了建议。

新生儿百日咳的临床特征分析

目的探讨新生儿百日咳的临床特征。方法回顾性分析2015年1月至2018年12月首都儿科研究所附属儿童医院收治的经聚合酶链反应(PCR)方法确诊的14例百日咳患儿的临床资料,包括一般信息、病程、住院时间、主要临床症状、肺部体征、并发症、实验室及影像学检查等情况。结果14例患儿中,男性10例(71.4%),女性4例(28.6%);发病年龄为10~28 d,平均(16.29±5.84)d。12例(85.7%)有咳嗽患者接触史,其中9例(75%)为母亲。入院时咳嗽持续时间为2~30 d,平均(11.93±8.00)d,临床症状有痉挛性咳嗽14例(100%),发绀9例(64.3%),流清涕5例(35.7%),鸡鸣样回勾4例(28.6%),呼吸暂停4例(28.6%),呼吸困难3例(21.4%),发热3例(21.4%),喘息2例(14.3%)。肺部中小水泡音8例(57.1%),痰鸣音7例(50.0%),喘鸣音2例(14.3%)。并发肺炎者13例(92.9%),重症患者5例(35.7%)。14例患儿血常规白细胞均增高,中位数为20.42×10~9/L,淋巴细胞比率平均为(64.80±7.43)%。C反应蛋白(CRP)正常13例(92.9%),升高1例(7.1%)。行降钙素原(PCT)检查10例,均正常。X线胸片显示双肺点片影或斑片影7例(50%),肺不张1例(7.1%),透亮度增高1例(7.1%)。经隔离及综合治疗好转出院13例(92.9%),死亡1例(7.1%)。住院时间为1~14 d,平均(6.50±4.15)d。结论新生儿百日咳多有接触史,男性更易发生,并发肺炎者常见;痉挛性咳嗽和以淋巴细胞为主的白细胞增高是本病的特异性表现;反复呼吸暂停和白细胞显著增高是重症病例的特征。

膨化发酵菜籽粕对肉鸡肉质风味及肝脏病理的影响

为研究膨化发酵菜籽粕对肉鸡肉质风味及肝脏病理的影响,试验选择60日龄、平均体重700 g左右的崇仁麻公鸡600只,随机分为5个处理组,每个处理组5个重复,每个重复24只鸡。对照组(0.0%组)饲喂基础日粮,试验1、2、3、4组分别在基础日粮中添加2.5%、5.0%、7.5%、10.0%膨化发酵菜籽粕等氮替代豆粕。试验期56 d。结果表明:(1)与对照组相比,除胸肌肉黄度b*值存在显著差异的趋势(P=0.09,0.05≤P<0.10)外,其余肉质指标pH45 min、pH24 h、24 h滴水损失、胸肌肉亮度L*值和红度a*值均无显著差异(P>0.05)。(2)与对照组相比,各试验组的肌肉肌苷酸、天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸等风味氨基酸含量、必需氨基酸及16种氨基酸总量均无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,各试验组肝细胞病理损伤评分均无显著差异(P>0.05);对膨化发酵菜籽粕添加水平和肉鸡肝细胞病理损伤评分进行回归分析,未发现两者之间存在线性或二次回归关系。本试验条件下,膨化发酵菜籽粕等氮替代豆粕对崇仁麻鸡肉品质、风味均无明显影响,且未引起肝细胞发生明显的病理损伤,说明膨化发酵菜籽粕替代豆粕是可行的。