猪圆环病毒2型基因组中干扰素刺激应答元件对体外干扰素介导的猪圆环病毒2型复制增强效应的影响

猪圆环病毒2型是猪的一种重要病原。有证据显示,使用γ-干扰素或α-干扰素对PCV-2感染细胞进行处理,可以增强体外PCV-2的复制,经鉴定干扰素刺激应答元件(ISRE)样序列存在PCV-2的基因组中。为了确定ISRE是否与病毒对IFNs的响应有关,构造一些经ISRE序列系列突变而来的ISRE突变体。用γ-干扰素或α-干扰素对ISRE突变体感染细胞进行处理,结果显示由ISRE序列引起的相关病毒复制增强现象逐渐消失。为了确定ISRE是否是IFN介导的PCV-2复制增强的充足和必要条件,在荧光报告基因检测系统中对包含有ISRE基因启动区重复基因的野生型PCV-2及ISRE突变的PCV-2的DNA片段进行检测,分别用γ-干扰素或α-干扰素处理被报告基因结构转染的3D4/31细胞。结果显示,与经IFN处理后的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2样品相比,没有处理的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2对照有更高水平的荧光活性,表明从整个病毒基因组中移除ISRE样序列后,其活性消失。另外,无论是何种突变,用IFNs处理后启动子活性逐渐消失,这表明在调节ISRE介导的基因转录过程中还需要病毒基因组中的其它顺式元件。结论:当PCV-2 ISRE样序列存在于完整病毒中而不是分离毒株中时,其能在体外影响干扰素介导的PCV-2复制增强。