Survivin反义寡核苷酸对小鼠肺癌的生长抑制作用

目的 Survivin是一种凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisproteins ,IAP)家族成员,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。选择五组小鼠survivin反义寡核苷酸,并从中进步筛选效果显著的反义寡核苷酸,在小鼠体内进一步验证其抑制肿瘤生长的能力。方法 设计合成特异性靶向生存素的反义寡核苷酸五组。利用脂质体转染技术将其转入肺癌细胞D12 1,Westernblot检测survivin的表达抑制效应,从中筛选效果显著的反义寡核苷酸,确定最佳浓度,将此浓度下转染的D12 1细胞经小鼠尾静脉注入,观察生存曲线。结果 各组反义寡核苷酸在4 0 0nmol·L-1转染细胞,Westernblot结果显示NO .5组survivin表达程度减弱,选取NO .5反义寡核苷酸,在不同浓度下观测转染2 4h后,细胞凋亡情况及survivin表达状况。2 0 0nmol·L-1时,sur vivin表达出现减弱,但细胞生长尚未受到影响;4 0 0nmol·L-1时细胞开始出现凋亡,指数明显高于对照组(P <0 .0 5 ) ,以6 0 0nmol·L-1转染组最为明显。用NO .5反义寡核苷酸在2 0 0nmol·L-1浓度下转染D 12 1细胞,将此细胞致瘤小鼠,小鼠的生存期明显延长。结论 因为survivin基因在多数恶性肿瘤组织中丰富表达,选择合适的sur vivin反义寡核苷酸。