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不同血清型猪链球菌对新西兰兔的致病性研究
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作者 张树志 刘飞 +9 位作者 王振勇 陈智 张琳 孙文博 张玉玉 丁罗刚 李建达 任素芳 于江 吴家强 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2566-2575,共10页
【目的】探究不同血清型猪链球菌(Streptococcus suis,SS)在新西兰兔体内的分布规律及致病性差异,为猪链球菌病的防治提供参考。【方法】分别采用SS1 ZY194株、SS2 QH株、SS7 ZY188株感染新西兰兔,通过临床症状观察,HE染色分析病理组织... 【目的】探究不同血清型猪链球菌(Streptococcus suis,SS)在新西兰兔体内的分布规律及致病性差异,为猪链球菌病的防治提供参考。【方法】分别采用SS1 ZY194株、SS2 QH株、SS7 ZY188株感染新西兰兔,通过临床症状观察,HE染色分析病理组织变化;利用实时荧光定量PCR检测脏器载菌量;通过试剂盒检测血清与肝脏生化指标变化;利用ELISA检测相关炎症因子的表达水平。【结果】3个试验组中,SS2组新西兰兔的临床症状表现与脏器的病理变化程度最明显。试验组新西兰兔各脏器均载菌,其中SS2组各脏器载菌量高于SS1和SS7组,且脾脏是载菌量最高的器官。各试验组新西兰兔葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)、低密度脂蛋白(LDL)和尿酸(UA)含量极显著或显著高于对照组(P<0.01;P<0.05),SS2和SS7组新西兰兔高密度脂蛋白(HDL)含量极显著低于对照组(P<0.01)。各试验组新西兰兔谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂肪酶(LPS)含量及炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平极显著或显著高于对照组(P<0.01;P<0.05),其中SS2组各指标的含量最高。【结论】不同血清型猪链球菌均可引起新西兰兔发病,其中SS2 QH株致病性最强。试验结果为猪链球菌病的致病机理研究提供借鉴,为临床防治该病提供理论基础。 展开更多
关键词 猪链球菌 血清型 新西兰兔 致病性
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真空贴体和高氧气调包装对冷鲜猪肉贮藏期品质和微生物的影响
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作者 李香远 费智国 +7 位作者 杨硕 王钰 张琳 吴家强 丁志勇 于江 任素芳 毛衍伟 《肉类研究》 北大核心 2024年第3期56-63,共8页
分析真空贴体包装(vacuum skin packaging,VSP)和高氧气调包装(high-oxygen modified atmosphere packaging,HiOx-MAP)冷鲜猪肉贮藏期间的pH值、肉色、总挥发性盐基氮含量、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,... 分析真空贴体包装(vacuum skin packaging,VSP)和高氧气调包装(high-oxygen modified atmosphere packaging,HiOx-MAP)冷鲜猪肉贮藏期间的pH值、肉色、总挥发性盐基氮含量、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)值、羰基含量、巯基含量、菌落总数、微生物多样性等指标,研究猪肉在0~4℃条件下VSP和HiOx-MAP贮藏过程中品质的变化。结果表明:在整个贮藏期内HiOx-MAP猪肉亮度值(L)和黄度值(b)始终显著高于VSP猪肉(P<0.05);相较于VSP猪肉,贮藏前期的HiOx-MAP猪肉显示出更高的红度值(a),但贮藏后期HiOx-MAP猪肉a显著低于VSP猪肉(P<0.05),颜色稳定性较差,并具有更高的TBARS值、羰基含量和更低的巯基含量(P<0.05);在货架期方面,VSP猪肉和HiOx-MAP猪肉的微生物货架期均为20~25 d,但是从贮藏10 d开始HiOx-MAP猪肉的菌落总数显著高于VSP猪肉(P<0.05);微生物多样性分析结果显示,随着贮藏时间的延长,2种包装猪肉的微生物多样性均呈下降趋势,但HiOx-MAP猪肉的α多样性(操作分类单元数、Chao1指数、Shannon指数)更高,说明相较于VSP猪肉,HiOx-MAP猪肉中的微生物种类和多样性更为丰富;当菌落总数接近国家标准规定上限时,HiOx-MAP猪肉中的优势菌群为明串珠菌属、沙雷氏菌属和假单胞菌属,而VSP猪肉的优势菌群为肉食杆菌属。总体而言,在短期贮藏销售(10 d内)时使用HiOx-MAP能够维持良好的肉色,VSP能更好维持猪肉品质并延长货架期。 展开更多
关键词 冷鲜猪肉 真空贴体包装 高氧气调包装 微生物多样性 肉品品质
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非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
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作者 矫健 李建达 +9 位作者 韩先杰 张琳 张玉玉 任素芳 刘飞 陈智 Nataliia Hrabchenko 张文娟 于江 吴家强 《山东农业科学》 北大核心 2023年第10期140-145,共6页
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的一种高度传染性病毒性疾病,发病率和死亡率高达100%,对我国的生猪养殖业造成了毁灭性打击。p22蛋白为ASFV的结构蛋白,本研究构建了重组原... 非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的一种高度传染性病毒性疾病,发病率和死亡率高达100%,对我国的生猪养殖业造成了毁灭性打击。p22蛋白为ASFV的结构蛋白,本研究构建了重组原核表达质粒pET-32a-p22,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞表达重组p22蛋白并纯化,经Western blot鉴定证实重组p22蛋白与ASFV阳性血清有良好的免疫反应性。利用重组p22蛋白免疫Balb/c小鼠并通过间接ELISA方法筛选到2株能够稳定分泌p22蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株2D6和5E7。经抗体亚型鉴定两株抗体均为IgG1型;经Western blot鉴定,两株抗体能够特异性识别过表达的p22蛋白。综上,本研究成功表达并纯化了p22重组蛋白,制备了p22单克隆抗体,为进一步探讨p22蛋白的结构功能及其在ASFV中的感染致病机制提供了基础条件。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p22蛋白 单克隆抗体 原核表达
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Toll样受体4与儿童自身免疫性疾病关系的研究进展
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作者 任素芳 郝金金 岳丽娟 《医学综述》 CAS 2023年第14期2728-2732,共5页
Toll样受体4(TLR4)是一种在巨噬细胞、内皮细胞等多种细胞中广泛表达的跨膜识别受体,其在识别细菌、病毒后激活相关信号通路,可诱发机体适应性、固有免疫应答。幼儿时期免疫系统发育尚不完善,免疫应答过程中存在不同程度障碍,当免疫功... Toll样受体4(TLR4)是一种在巨噬细胞、内皮细胞等多种细胞中广泛表达的跨膜识别受体,其在识别细菌、病毒后激活相关信号通路,可诱发机体适应性、固有免疫应答。幼儿时期免疫系统发育尚不完善,免疫应答过程中存在不同程度障碍,当免疫功能亢进时易诱发自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、化脓性脑膜炎等,不利于患儿生长发育,且给家庭造成较大的经济负担。而TLR4作为固有免疫的一个重要介质,在儿童自身免疫性疾病的发生、发展中具有重要作用,未来需进一步深入研究。 展开更多
关键词 儿童自身免疫性疾病 系统性红斑狼疮 化脓性脑膜炎 TOLL样受体4
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副猪嗜血杆菌脂多糖的提取、鉴定及初步应用 被引量:3
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作者 杨杰 李建达 +12 位作者 丛晓燕 杨胜男 任素芳 郭立辉 陈智 陈蕾 曾昊 孙文博 时建立 李俊 邱文彬 吴家强 于江 《中国动物检疫》 CAS 2018年第9期106-111,共6页
为建立一种有效提取高纯度副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)的方法,进一步阐明HPS的致病机制,通过热酚水法提取LPS,浓缩后,采用酶解法和超离法纯化提取物,分别用硫酸-苯酚法、BCA法、紫外分光光... 为建立一种有效提取高纯度副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)的方法,进一步阐明HPS的致病机制,通过热酚水法提取LPS,浓缩后,采用酶解法和超离法纯化提取物,分别用硫酸-苯酚法、BCA法、紫外分光光度法,测定LPS提取物中多糖、蛋白及核酸的含量,通过SDSPAGE电泳银染方法鉴定提取物。将提取的LPS作用于猪肺泡巨噬细胞,通过荧光定量方法检测IL-1β的表达量差异。结果显示:纯化的LPS平均产率为2.56%;LPS提取物中不含还原性单糖,多糖含量为3.27%,蛋白含量为0.77%,核酸含量为0.90%;提取的LPS能够引起猪肺泡巨噬细胞IL-1β表达量显著上调。因此,通过该方法提取纯化的LPS可以用于HPS与宿主细胞间作用机制的研究。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 脂多糖 提取 鉴定
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新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:3
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作者 徐敏丽 于江 +7 位作者 逯璐 张玉玉 任素芳 陈智 孙文博 郭立辉 吴家强 张琳 《山东农业科学》 北大核心 2021年第8期112-118,共7页
为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性反转录荧光定量PCR(reverse transcription fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法,基于对所有已知NDVF基因序列特征的分析,设计了... 为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性反转录荧光定量PCR(reverse transcription fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法,基于对所有已知NDVF基因序列特征的分析,设计了一对强毒特异性引物,以体外转录制备的RNA标准品为阳性模板,构建了标准曲线,并对该方法的敏感性、特异性和准确性进行了验证。结果表明,基于SYBRGreenⅠ嵌合荧光技术建立的检测方法能够特异性扩增NDV强毒,最低可检测1拷贝/μL的RNA,用于临床毒株的检测结果与序列测定一致,可作为适合大规模监测NDV强毒的方法和工具。 展开更多
关键词 新城疫病毒 强毒 反转录荧光定量PCR 监测
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肝硬化食管胃底静脉曲张出血的胃镜治疗效果分析 被引量:8
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作者 任素芳 张丽 褚敏 《中国药物与临床》 CAS 2020年第24期4074-4076,共3页
目的观察肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血(EGVB)患者入院后,在不同时间段内进行内镜下治疗的效果分析。方法选取108例肝硬化EGVB患者资料进行回顾性分析,根据胃镜治疗时间段的不同分为急诊组和常规组。比较2组患者入院后的住院天数、费... 目的观察肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血(EGVB)患者入院后,在不同时间段内进行内镜下治疗的效果分析。方法选取108例肝硬化EGVB患者资料进行回顾性分析,根据胃镜治疗时间段的不同分为急诊组和常规组。比较2组患者入院后的住院天数、费用、再出血率、并发症发生率及病死率。比较腹痛、恶心、便潜血消失时间。结果急诊组患者的总费用、住院天数均明显短于常规组(P<0.01)。急诊组患者的再出血、并发症、病死率发生率低(P<0.05)。急诊组患者腹痛、恶心、便潜血消失时间均短于常规组(P<0.01)。结论肝硬化EGVB患者,急诊胃镜治疗可以提高疗效,减轻患者费用,缩短住院时间,继而降低再出血率,甚至病死率,临床症状消失时间短,疗效满意度高。 展开更多
关键词 肝硬化 食管和胃静脉曲张 不同时间段 急诊内镜
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2017-2019年山东省部分地区猪瘟流行病学调查 被引量:2
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作者 王佳芸 王鑫 +10 位作者 王炳煜 曾昊 沈文慧 于江 陈智 张玉玉 孙文博 郭立辉 任素芳 李玉保 吴家强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1870-1881,共12页
为掌握近年来山东地区猪瘟病毒(CSFV)的流行及其遗传变异情况,本研究对2017年1月-2019年12月从山东省济南市、泰安市、聊城市、青岛市等10个地区采集的1687份疑似猪瘟感染猪病料运用反转录PCR方法进行了病毒核酸检测,将CSFV检测为阳性... 为掌握近年来山东地区猪瘟病毒(CSFV)的流行及其遗传变异情况,本研究对2017年1月-2019年12月从山东省济南市、泰安市、聊城市、青岛市等10个地区采集的1687份疑似猪瘟感染猪病料运用反转录PCR方法进行了病毒核酸检测,将CSFV检测为阳性的样品进行E2基因和CSFV全基因扩增和测序,利用生物信息学软件DNAStar和Mega 7.0对CSFV的E2蛋白以及全基因序列进行遗传进化分析。另外,将这些地区采集的4866份血清样本进行了抗体ELISA检测。结果显示,1687份病料中病原检测有188份阳性,总阳性率为11.1%,其中2017-2019年病原检测阳性率分别为8.5%、13.1%、15.1%,抗原阳性率逐年上升且呈不稳定性,提示规模化猪场猪瘟兔化弱毒疫苗的免疫存在一定的风险和压力;采集的4866份血清样本中4146份呈现抗体阳性(85.2%),统计得到2017-2019年抗体阳性率分别为84.3%、83.0%、92.3%,抗体阳性率呈现上升趋势,说明山东省规模化养殖场猪群猪瘟疫苗免疫保护的整体水平逐年提高;从阳性病料中扩增获得了5株CSFV全基因组序列和5株病毒E2基因序列,经过序列比对发现,5株临床分离毒株与2.1d亚型的CSFV全基因组序列同源性在97.5%~99.0%之间,表明5株分离毒株与2.1d亚型的CSFV亲缘性较近,分离毒株氨基酸位点的突变集中在102位(L→M)以及159位(K→R)氨基酸处。本研究分析了2017年1月-2019年12月山东部分地区猪群中CSFV毒株的流行与变异情况,为指导山东省CSFV预防与控制提供了有力的参考。 展开更多
关键词 猪瘟病毒(CSFV) 分子流行病学 全基因组 E2基因 2.1d亚型
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猪链球菌2型分离鉴定及其对小鼠的致病性分析 被引量:1
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作者 刘娜 于江 +9 位作者 李建达 张玉玉 杨灵芝 任素芳 丛雁芳 郭立辉 陈智 吕婷婷 安利国 吴家强 《山东农业科学》 北大核心 2022年第3期137-142,共6页
为了解猪链球菌2型菌株对昆明小鼠的致病性,并建立其感染昆明小鼠模型,本试验分别取2头疑似患链球菌病的病死猪脑组织、血液分别涂布于含5%胎牛血清的TSA固体培养基中进行细菌分离;并对分离获得的细菌进行形态观察、PCR鉴定、药物敏感... 为了解猪链球菌2型菌株对昆明小鼠的致病性,并建立其感染昆明小鼠模型,本试验分别取2头疑似患链球菌病的病死猪脑组织、血液分别涂布于含5%胎牛血清的TSA固体培养基中进行细菌分离;并对分离获得的细菌进行形态观察、PCR鉴定、药物敏感性试验、小鼠致病性试验及组织病理切片观察。结果显示,分离菌为革兰氏阳性短链球菌,经PCR鉴定为猪链球菌2型,命名为LY株;药敏试验证实LY株对青霉素、红霉素、氯霉素、苯唑西林、环丙沙星、诺氟沙星敏感,对四环素、多粘菌素B、克林霉素不敏感;LY株对小鼠致死剂量为2.2×10^(9) cfu/只;组织病理切片观察发现小鼠肺脏、脾脏及心肌均出现不同程度的病变。本研究明确了山东省猪链球2型毒株的毒力,为疫苗候选菌株的筛选提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 分离鉴定 小鼠 致病性
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Diagnosis and Control of Classical PRRSV Strain Infection in a Pig Farm
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作者 ren sufang Guo Lihui +4 位作者 Fu Jiangong Zhang Zhaokun Li Xingguang Wu Jiaqiang Zhang Yuyu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2019年第2期53-55,共3页
The suspected cases of PRRSV in a pig farm of Shandong Province were conducted pathologic autopsy, RT-PCR amplification, and sequencing and analysis of PRRSV N protein gene. The results showed that the homology of the... The suspected cases of PRRSV in a pig farm of Shandong Province were conducted pathologic autopsy, RT-PCR amplification, and sequencing and analysis of PRRSV N protein gene. The results showed that the homology of the nucleotide sequences of protein N was 99.7% between the isolate and the classical strains (VR2332 and SD1), and 93.4% between the isolate and the highly pathogenic strains (JXA1, HuN4, SX-1 and TJM). The results suggested that the virus was classical PRRSV in the pig farm. The research would provide a reference for the diagnosis and targeted therapy of classical PRRSV infection in swine production. 展开更多
关键词 PRRS PRRSV CLASSICAL STRAIN PATHOLOGICAL ANATOMY RT-PCR Sequencing
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Isolation and Identification of Highly Pathogenic PRRSV from a Pig Farm
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作者 ren sufang Guo Lihui +4 位作者 Gao Shuxia Zhang Zhaokun Liu Junzhen Wu Jiaqiang Zhang Yuyu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2018年第3期194-196,共3页
[Objective] To identify suspected cases of highly pathogenic PRRSV from a pig farm. [Method] The suspected cases of highly pathogenic PRRSV were conducted pathologic anatomy, the gene of PRRSV N protein was amplified ... [Objective] To identify suspected cases of highly pathogenic PRRSV from a pig farm. [Method] The suspected cases of highly pathogenic PRRSV were conducted pathologic anatomy, the gene of PRRSV N protein was amplified by RT-PCR and its sequences were determined and analyzed. [Result] The nucleotide sequence of N protein of N7/N8 isolate shared the consistency of 97.0% with highly pathogenic strains (JXA1, HUN4, SX-1 and TJ), and that of isolate N9 shared the consistency of 97.3% with highly pathogenic strains, indicating the infected virus in the pig farm was highly pathogenic PRRSV. [Conclusion] This research provides a reference for the diagnosis of highly pathogenic PRRSV infec- tion in swine production. 展开更多
关键词 Pathological anatomy PRRS Highly pathogenic PRRSV RT-PCR SEQUENCING
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猪链球菌和猪多杀性巴氏杆菌多重实时荧光PCR方法的建立 被引量:5
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作者 刘艳艳 吕婷婷 +7 位作者 吴家强 刘飞 任素芳 张玉玉 郝小静 蒋皓静 李华 于江 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期5112-5125,共14页
【背景】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)和猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)都是能引起宿主致病的人畜共患病原菌,常出现混合感染,临床诊断上易与猪瘟、猪丹毒等混淆。【目的】快速、有效鉴别猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌... 【背景】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)和猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)都是能引起宿主致病的人畜共患病原菌,常出现混合感染,临床诊断上易与猪瘟、猪丹毒等混淆。【目的】快速、有效鉴别猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌病,建立一种能同时检测2种病原的多重实时荧光定量PCR检测方法。【方法】基于猪链球菌的gdh基因和猪多杀性巴氏杆菌的plpE基因,设计2对特异引物及TaqMan探针,以细菌16S rRNA基因设计通用引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种能同时检测猪链球菌和猪多杀性巴氏杆菌的多重实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能够特异性地检测猪链球菌和猪多杀性巴氏杆菌,与细菌分离后的测序结果验证完全一致。此方法对重组质粒标准品的最低检出浓度分别为4.53×10^(2)copies/μL和3.97×10^(2) copies/μL。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于3%。【结论】本实验所建立的方法准确、简便、可靠,能够用于2种病原菌的同时检测,为猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌病的防治提供了有效的检测工具,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。 展开更多
关键词 猪链球菌(SS) 猪多杀性巴氏杆菌(Pm) 多重实时荧光定量PCR
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