豇豆退绿斑驳病毒(CCMV)突变体的混合侵染研究

本研究采用 PCR点突变的方法 ,对豇豆退绿斑驳病毒 (CCMV) RNA3的 c DNA克隆进行突变 ,突变体 TP7是在外壳蛋白基因之前突变形成一个独特的 Sal I酶切点 ;TP8是在 3a基因之前突变形成一个独特的 Bam H I酶切点 ;AG 1是在外壳蛋白基因之后突变形成一个独特的 Not I酶切点。TP7、TP8、AG1体外转录产物分别与 CCMV RNA1、RNA2的 c DNA克隆的体外转录产物混和后接种豇豆 ,结果表明 ,接种后第 6 d TP7植株首先表现出症状 ,9d后 TP8、AG1和野生型 CCMV接种的植株表现出症状 ,TP7的症状发展最快。采用 TP7、TP8、AG1接种 2 0 d的毒源植株 ,按 TP7+ TP8、TP7+ AG1、TP8+ AG1等量混合汁液接种豇豆 ,接种 2 0 d,通过 RT- PCR分析接种植物 ,在 TP7+ TP8和 TP7+ AG1混合侵染中 ,TP7在混合侵染中占优势 ,在 TP8+ AG1的混合侵染中 ,TP8和 AG1的种群十分接近。