人原发性肝癌及癌旁组织丙肝病毒基因及其抗体的研究

本文报道运用巢式多聚酶链反应,ELISA等方法检测我国原发性肝癌、癌旁组织和外周血中HCV-RNA,抗-HCV、同时监测了HBVAg,所用引物位于HCV基因5’-端非编码区域。结果76例肝癌病人血清标本7例抗-HCV阳性,(7/76,9.2％)10例HCV-RNA阳性(10/76、13.2％);34例肝癌组织中4例HCV-RNA阳性(4/34,11.0％)。1例抗-HCV阴性的病人肝癌及癌旁组织中检测到HCV-RNA提示我国的HCC发病与HCV感染似有一定关系。本组检测到10例HCV-RNA阳性,其中4例(40％)系第二步扩增后检出,说明巢式PCR确可显著提高HCV-RNA的检出率,单纯用C100-3抗体检测有可能低估HCC中HCV的感染率。本研究发现HCVAg阳性的HCC中HBsAg检出率高于HCVAg阴性HCC者(P<0.05)。说明在我国HCC的发生中,HCV可单独,但更常与HBV共同作用。

巢式多聚酶链反应检测丙型肝炎病毒5′端非编码区基因

本文采用丙型肝炎病毒(HCV)基因中高度保守的5′端非编码区的两对引物,建立了检测 HCV 核酸(HCV-RNA)的巢式(两步法)多聚酶链反应(PCR),对其中标本 RNA的提取、互补 DNA(cDNA)合成时引物的浓度、PCR 的反应体积以及 PCR 时温度循环程序等进行了优化选择。用该法检测了67例非甲非乙型肝炎患者的血清标本,发现52例(78%)为HCV-RNA 阳性。在丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阴性的27例非甲非乙型肝炎患者中检出16例(59%)HCV-RNA 阳性。这些结果再次证实 HCV 感染是非甲非乙型肝炎的重要病因,并提示仅检测抗-HCV 可能会低估 HCV 的感染率。