蒲公英甾醇对AFB_(1)诱导鸡原代肝细胞凋亡和自噬的影响

【目的】探究蒲公英甾醇对黄曲霉毒素B 1(AFB_(1))诱导鸡原代肝细胞凋亡、自噬的影响及其作用机制。【方法】采用MTT法测定蒲公英甾醇对鸡原代肝细胞的毒性,确定蒲公英甾醇安全作用浓度。将鸡原代肝细胞分为空白组(Normal)、模型组(AFB_(1),0.05μg/mL)、水飞蓟宾阳性组(Sil,2μg/mL)以及蒲公英甾醇低(L-dose,5μg/mL)、中(M-dose,10μg/mL)、高(H-dose,20μg/mL)剂量组。各试验组经相应浓度药物处理后收集细胞,利用流式细胞术和CYTO-ID法检测鸡原代肝细胞凋亡和自噬情况。采用实时荧光定量PCR检测鸡原代肝细胞中细胞色素酶、凋亡和自噬相关基因mRNA表达量。【结果】蒲公英甾醇浓度为5~25μg/mL时对鸡原代肝细胞无明显毒性,因此后续选用蒲公英甾醇低、中、高剂量组给药浓度分别为5、10、20μg/mL。流式细胞术和CYTO-ID检测结果显示,与空白组相比,模型组鸡原代肝细胞中绿色荧光标记的自噬滤泡数量明显增多。与模型组相比,水飞蓟宾组、蒲公英甾醇各剂量组鸡原代肝细胞中绿色荧光标记的自噬滤泡数量明显减少。实时荧光定量PCR结果显示,与空白组相比,模型组鸡原代肝细胞中细胞色素酶P4501A5(CYP1A5)、CYP 3 A 37 A、半胱氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Caspase-9、苄氯素1(Beclin-1)、自噬蛋白5(ATG-5)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)和LC 3-Ⅱ基因mRNA表达量均极显著升高(P<0.01)。与模型组相比,水飞蓟宾和蒲公英甾醇各剂量组鸡原代肝细胞中CYP 1 A 5、CYP 3 A 37、Caspase-3、Caspase-9、Beclin-1、ATG-5、LC 3-Ⅰ、LC 3-Ⅱ基因mRNA表达量均极显著减低(P<0.01)。【结论】蒲公英甾醇通过影响细胞色素酶、凋亡和自噬相关基因的表达,进而对AFB_(1)所致鸡原代肝细胞损伤起到保护作用。

蒲公英甾醇对AFB_(1)性肝损伤肉鸡肝组织氧化应激的影响

旨在探讨蒲公英甾醇对黄曲霉毒素B 1(AFB_(1))性肝损伤肉鸡肝组织氧化应激的影响。将120只肉鸡随机分成6组:空白组,模型组,蒲公英甾醇低、中、高剂量组(25、50、100 mg·kg^(-1)BW)及阳性组(300 mg·kg^(-1)水飞蓟宾)。除空白组饲喂基础日粮外,其余各组饲喂含有0.5 mg·kg^(-1)AFB_(1)的日粮,连续喂养21 d建立肉鸡肝损伤模型,且每日在饮水中给予各组对应浓度的药物。试验期间记录各组肉鸡体重和采食量并计算料重比;通过试剂盒检测肉鸡血清中肝功能指标谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyltransferase,GGT)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的含量;通过试剂盒检测肉鸡肝组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的含量;RT-qPCR法和Western blot法分别检测肉鸡肝中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、血红素氧合酶1(Heme Oxygenase-1,HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NAD(P)H:Quinone oxidoreductase-1,NQO1)mRNA及蛋白表达量。结果显示,蒲公英甾醇高剂量组在14、21 d可提高AFB_(1)性肝损伤肉鸡的体重(P<0.05)并降低料重比(P<0.05);试验21 d后,蒲公英甾醇高剂量组降低AFB_(1)性肝损伤肉鸡血清中肝功能指标ALT(P<0.05)、AST(P<0.01)、GGT(P<0.01)、TBIL(P<0.01)和ALP(P<0.01)的活性;蒲公英甾醇高剂量组抑制AFB_(1)性肝损伤肉鸡肝中ROS和MDA含量(P<0.01),并提高SOD(P<0.01)、CAT(P<0.05)和GSH(P<0.05)活性;蒲公英甾醇高剂量组可上调AFB_(1)性肝损伤肉鸡肝中Nrf2(P<0.05)、NQO1(P<0.01)和HO-1(P<0.05)mRNA及蛋白表达水平,下调Keap1 mRNA(P<0.05)及蛋白表达水平。综上,蒲公英甾醇可通过调控Nrf2/Keap1信号通路抑制肉鸡肝中ROS、MDA的过量产生并提高抗氧化物SOD、CAT、GSH含量,增强肝抗氧化功能,且明显改善肝功能并提高其生长性能,从而对AFB_(1)诱导所致的氧化损伤具有明显抑制作用。

中药联合益生菌对大肠杆菌致小鼠腹泻保护机制研究

【目的】前期研究表明中药联合益生菌对致病性大肠杆菌所致小鼠腹泻具有明显的保护作用,本研究旨在进一步探讨中药联合益生菌对致病性大肠杆菌致小鼠腹泻的保护机制。【方法】选取小鼠60只,随机分为5组,空白组、模型组、中药组、益生菌组及中药联合益生菌组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠通过腹腔注射1×10^(7) CFU/kg大肠杆菌分离株菌悬液建立小鼠腹泻模型,空白组腹腔注射等量生理盐水。中药组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖),益生菌组灌胃给予枯草芽孢杆菌悬液(2×10^(8) CFU/kg),中药联合益生菌组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖)与枯草芽孢杆菌悬液(5×10^(7) CFU/kg)的混合液,1次/d,连续给药7 d。HE染色观察小肠组织病理学变化,扫描电镜观察小肠组织超微结构变化,ELISA法检测小鼠小肠匀浆和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,RT-PCR法检测小肠组织及血液中TNF-α和IL-6 mRNA表达,免疫组织化学染色检测小肠组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达。【结果】中药联合益生菌能改善小肠病理组织学病变、修复小肠绒毛高度脱水萎缩和微绒毛脱落明显的损伤。同时,中药联合益生菌可明显降低小肠组织及血清中TNF-α和IL-6的含量(P<0.05;P<0.01),显著抑制小肠组织及血液中TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.05;P<0.01)。中药联合益生菌可明显降低小肠组织NF-κB p65蛋白的表达。【结论】中药联合益生菌可通过调控NF-κB信号通路,抑制小肠组织及血液TNF-α和IL-6 mRNA的过度表达,降低小肠组织及血清TNF-α和IL-6含量,改善肠腺变性和黏膜炎性细胞浸润以及小肠绒毛和微绒毛损伤,从而对大肠杆菌所致小鼠腹泻起到保护作用。

衢州市柯城区古道资源评价、保护与修复

为针对性地保护衢州市柯城区古道,传承历史文化底蕴。通过文献查阅、实地考察、访谈等方法对衢州市柯城区内的古道资源进行调查,建立柯城区古道景观综合价值评价模型并对古道资源进行评价,分为3个等级。结果表明:整理得到柯城区具有保护与修复价值的古道共计26条,一级古道3条,二级古道7条,三级古道16条,存在古道本体损毁严重、缺乏保护修复规划、资金投入力度弱、社会舆论宣传力度不足的问题。基于存在的问题,从完善保护制度、发展古道经济、拓展融资渠道、做好保护宣传等方面提出了保护与修复思路。

水库大坝GNSS监测系统设计和应用分析

水库坝体的安全稳定性是整个水利工程的核心,这需要精准的监测手段来保证。本文以水库大坝为实例,介绍了GNSS监测系统的应用情况。首先介绍了该系统组成、原理和功能;之后详细分析了系统设计工作,包括基点和位移点施工,GNSS主机选择和技术参数;最后通过与全站仪监测数据对比发现系统精度完全满足要求,而且对监测数据进行统计,发现坝体位移量在很小的范围,并且保持了稳定,可为以后类似工作提供必要的技术参考。

智慧水利框架下立体化感知体系构建

基于《“十四五”水安全保障规划》中“强感知、增智慧、促应用”的水利智慧化发展思路,本文通过对水利业务对象的研究,进一步明确感知对象、内容、要素及实现手段,充分发挥信息技术支撑作用,搭建一个全面、高效的信息基础设施感体系,实时、准确地获取水利相关信息,为决策支持、灾害预警、资源配置等提供数据支撑。

中药复方呼宁散安全性毒理学评价

【目的】明确呼宁散的毒理作用,评价其安全性,为其用于临床治疗鸡呼吸道疾病综合征提供科学依据。【方法】急性毒性预试验中,将24只小鼠随机均分为对照组和呼宁散低、中、高剂量组,呼宁散低、中、高剂量组小鼠分别灌胃2.5、5、10 g/kg BW呼宁散1次,0.2 mL/10 g BW,对照组灌胃等体积灭菌蒸馏水,连续观察7 d,记录小鼠中毒和死亡情况。最大给药量试验中,将20只小鼠随机均分为对照组和试验组,试验组小鼠在24 h内分4次灌胃呼宁散10 g/kg BW,0.2 mL/10 g BW,对照组灌胃等体积灭菌蒸馏水,于试验第15天记录小鼠体重并剖检,观察小鼠主要脏器病理变化。亚急性毒性试验中,将40只小鼠随机均分为对照组和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),连续给药28 d,于末次给药12 h后对小鼠称重、采血,剖检并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏,计算小鼠体重变化、脏器系数,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)和IL-6含量,并对心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏进行组织病理学检查。在骨髓微核试验中,将50只小鼠随机均分为对照组、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg BW)和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),各组小鼠灌胃给药2次(间隔24 h),末次给药6 h后处死小鼠并制作骨髓涂片,计算微核率及嗜多染红细胞(PCE)/成熟红细胞(NCE)值。在精子畸形试验中,将25只雄性小鼠随机均分为对照组、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg)和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),每天灌胃给药1次,连续给药5 d,于首次灌胃后35 d处死小鼠并制作精子涂片,计算精子畸形率。【结果】急性毒性试验中,各组小鼠全部存活,均未见中毒症状,无法测出呼宁散的半数致死量(LD 50),测得小鼠对呼宁散的最大耐受量>40 g/kg BW,说明呼宁散对小鼠无急性毒性。亚急性毒性试验中,与对照组雄性小鼠相比,给药第7天,呼宁散低剂量组小鼠体重显著增加(P<0.05);给药第28天,呼宁散中剂量组小鼠体重极显著增加(P<0.01);呼宁散对各组小鼠主要脏器系数、细胞因子含量均无显著影响(P>0.05),剖检和病理学检查未见明显异常变化,说明呼宁散无亚急性毒性。骨髓细胞微核试验和精子畸形试验中,各剂量呼宁散对小鼠骨髓微核率及精子畸形率无显著影响(P>0.05),且PCE/NCE值均在正常范围内,说明呼宁散无遗传毒性。【结论】10 g/kg BW及以下剂量呼宁散无毒性作用,安全性好。

蒲公英甾醇对AFB1所致鸡原代肝细胞氧化损伤的保护作用

【目的】探讨蒲公英甾醇对黄曲霉毒素B1(AFB1)诱导的鸡原代肝细胞氧化损伤的保护作用及机制,为应用蒲公英甾醇防治AFB1中毒提供理论依据。【方法】采用组织块酶消化法分离鸡原代肝细胞并进行PAS糖原染色鉴定,通过CCK-8法绘制肝细胞生长曲线;通过MTT法测定AFB1对鸡肝细胞的毒性,结合测定肝细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平,以确定AFB1的体外建模浓度。通过MTT法确定蒲公英甾醇的安全给药浓度后,将试验分为6组:空白对照组、模型组、蒲公英甾醇剂量组(高、中、低剂量组)、阳性对照组。建立AFB1诱导的鸡原代肝细胞损伤模型并给予药物,通过试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及还原型谷胱甘肽(GSH)水平。通过实时荧光定量PCR法测定Keap1/Nrf2信号通路关键基因血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶1(NQO1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)表达量。【结果】试验成功分离鉴定鸡原代肝细胞,在培养24~72 h细胞活力较高;确定0.05μg/mL作为AFB1体外诱导鸡原代肝细胞损伤的建模浓度;确定20、10、5μg/mL作为蒲公英甾醇高、中、低剂量组的给药浓度;与模型组相比,蒲公英甾醇可极显著降低AFB1所致鸡原代肝细胞氧化应激相关指标ROS和MDA含量(P<0.01),极显著提高抗氧化物SOD活性(P<0.01);极显著或显著提高AFB1所致鸡原代肝细胞中HO-1、NQO1和Nrf2基因(除低剂量组外)表达量(P<0.01;P<0.05),降低Keap1基因表达量。【结论】蒲公英甾醇通过调控鸡原代肝细胞Keap1/Nrf2信号通路提高其抗氧化能力,从而对AFB1诱导的鸡原代肝细胞氧化损伤起到保护作用。

媒体诱导迁移率变化的双斑块SIRS传染病模型研究

建立了一类具有媒体报道的双斑块迁移SIRS传染病模型,研究媒体报道作用下易感者与感染者迁移速率的改变对斑块内疾病状态的影响.首先,定义无迁移下的斑块基本再生数R1,R2,并推导系统的基本再生数R0,得到当R1<1且R2<1时,系统的无病平衡点是全局渐近稳定的,当R0>1时,疾病是一致持续的.最后,通过数值模拟验证结果的有效性.

雪窦山风景名胜区游憩资源满意度研究

通过收集2020年7月1日至2021年12月30日相关旅游网站上游客对雪窦山风景名胜区的评论数据,进行游憩资源要素编码及分级评定,确认了五大类评价维度——服务管理、自然环境、旅游设施、人文景观、游客体验,23个评价指标,通过IPA分析法(重要性-绩效分析法)获取游客对景区游憩资源的认知程度与满意度评价水平。结果表明,游客对雪窦山风景名胜区游憩要素的认知程度均值为9.76,满意度均值为3.81,在23个游憩资源要素中,有13个要素满意度在均值以上,10个要素在满意度均值以下;以重要性均值9.76为纵坐标分界线,满意度均值3.81为横坐标分界线,将IPA分析图划分为四个象限——优势维持区、继续改善区、积极提升区和适当过渡区。综合以上分析,提出雪窦山风景名胜区游憩资源的优化建议:软件服务专业化、硬件设施合理化、人文景观多元化。

柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化

目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞,实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量;Western blot法检测NLRP3蛋白的变化,免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后,NLRP3和IL-1β表达明显升高;下调NLRP3后,IL-1β分泌明显减少;NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染,组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化,增加炎症因子IL-1β表达和释放。

E-51/KH-570 改性水性羟基丙烯酸树脂防腐涂料的研制

通过半连续溶液聚合制备了E-51环氧树脂/KH-570偶联剂改性水性羟基丙烯酸树脂(EK-war),在EK-war中添加水性氨基树脂cymel-303(固化剂)、颜填料及助剂,得到了一种防腐涂料。讨论了羟基含量,硬软单体质量比,环氧树脂E-51、硅烷偶联剂KH-570和引发剂用量对EK-war性能的影响,以及固化剂用量、颜料体积浓度(PVC)、活性防锈颜料等因素对涂膜性能的影响。结果表明,当引发剂用量为单体总量的2.0%,羟基含量为10%,硬软单体质量比2.2∶1.0,E-51用量为10%,KH-570用量4.0%时,制备的EK-war性能最好。EK-war与cymel-303的质量比为5∶1,PVC为35%,三聚磷酸铝和磷酸锌质量比为2.5∶1.0时,制备的水性防腐涂料漆膜的综合性能最佳:附着力1级,铅笔硬度5H,耐冲击性(1 kg)50 cm,耐酸性(5%H2SO4)达312 h,耐碱性(5%NaOH)达258 h,耐盐水性(3%NaCl)达1650 h。

西双版纳2021年冬末盛夏暴雨对比分析

利用ERA5欧洲中心再分析资料、常规观测资料对比分析了2021年2月7~9日和7月19~21日西双版纳冬夏暴雨天气。结果表明:(1)500hpa南支低压槽加深东移和700hPa低空急流充沛的水汽输送并急剧辐合以及低层切变线或辐合区扰动触发抬升利于冬季暴雨发生;夏季暴雨是在500hPa“东高西低”高压环流间低涡持久稳定和热力抬升低层大量的水汽至暴雨区上空引发强辐合上升运动下产生的;(2)大气边界层弱偏强冷平流利于冬季暴雨发生,近地面极弱的冷平流是夏季暴雨发生的有利条件。

蒲公英提取物对LPS诱导小鼠乳腺炎的减轻效应及其机制分析

旨在研究蒲公英提取物对内毒素(LPS)诱导小鼠乳腺炎的减轻效应及其机制分析。将小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组和蒲公英提取物高、中、低剂量组。蒲公英提取物高、中、低剂量组分别按10.0、5.0、2.5g·kg^(-1)灌胃给药,连续灌胃6d,2次·d^(-1),空白组灌胃等体积生理盐水。末次给药1h后,于小鼠乳房基部分别灌注50μL 0.2mg·mL^(-1)LPS,建立LPS诱导的小鼠乳腺炎模型,阳性组在建模后6和12h腹腔注射5mg·kg^(-1)地塞米松。24h后取血,分离血清,剥离乳腺组织。ELISA法测定小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,髓过氧化物酶(MPO)试剂盒测定小鼠血清MPO的含量,HE染色观察病理变化,Western blot法测定小鼠乳腺中TLR4蛋白以及NF-κB信号通路和MAPKs信号通路相关蛋白的表达。结果显示,蒲公英提取物高、中剂量组对LPS诱导的乳腺炎小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌有极显著抑制作用(P<0.01),极显著降低小鼠血清中MPO的含量(P<0.01);蒲公英提取物高、中剂量组能改善LPS诱导的小鼠乳腺组织的病理变化,极显著下调LPS诱导的小鼠乳腺中TLR4、p-IκB、p-p65、p-p38、p-JNK、p-ERK蛋白的表达(P<0.01)。结果表明,蒲公英提取物通过调控NF-κB和MAPKs信号通路对LPS诱导的小鼠乳腺炎有明显减轻作用,为蒲公英的临床开发及应用奠定了基础。

KH-550/E-44改性水性丙烯酸树脂的合成与性能

先将甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸丁酯、丙烯酸接和E-44树脂接枝共聚,然后用硅氧烷KH-550扩链,合成具有亲水性羧基和硅氧烷单元的KH-550/E-44改性水性丙烯酸树脂。采用FTIR、XRD、TGA对接枝产物做了结构表征和热分析。实验表明:KH-550为丙烯酸单体总量的4%,E-44为丙烯酸单体总量的8%的KH-550/E-44改性水性丙烯酸树脂,稳定性好,固化涂膜吸水率为8.1%,铅笔硬度为5H,附着力为1级,在涂料行业具有较好应用前景。

牛磺熊去氧胆酸的药理作用及应用研究进展

牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)是天然熊胆中的一种结合型胆汁酸,在临床上用于治疗肝胆疾病。TUDCA具有保肝、利胆、溶石的作用,而且在非肝胆疾病中也具有潜在的药用价值。论文以近年来国内外TUDCA对各种疾病模型的研究为基础,对TUDCA的药理作用及应用进行综述,为TUDCA的进一步开发利用提供参考。

污泥基生物炭活化过硫酸钠降解水中萘的研究

以城市污水处理厂脱水污泥为原料制备污泥生物炭并利用污泥炭活化过硫酸钠降解水中的萘,考察了不同温度(500、700、900℃)条件下热解制备的污泥炭(SDC-5、SDC-7、SDC-9)活化过硫酸钠对降解水中萘的性能与效果。利用SEM、N吸附-脱附和FT-IR对材料进行表征。结果表明,随着制备温度的升高,生物炭的比表面积逐渐减小,基团丰富度不断下降。在pH为6、萘质量浓度为8 mg/L、SDC-9质量浓度为0.4 g/L、过硫酸钠浓度为8 mmol/L时,对萘的去除率可以达到83%。自由基抑制实验结果表明,在酸性条件下,SO·起主要作用;在碱性条件下,·OH起主要作用。

联合用药抗弓形虫效果研究进展

弓形虫病(Toxoplasmosis)属于危害严重的全球性寄生虫病。该病主要以药物治疗为主,但目前尚无针对弓形虫病的特效药物。相比于单独用药,联合用药以其较好的药效和较低的不良反应逐渐成为兽医学及其相关研究领域的热点。为进一步发现潜在的新的抗弓形虫药物和治疗策略,论文对具有抗弓形虫作用的中药复方、西药配伍以及中西联合用药的研究进展进行综述。

大蒜提取物对猪源大肠杆菌所致小鼠腹泻的作用效果研究

为了探究大蒜提取物对猪源大肠杆菌所致小鼠腹泻的作用效果,笔者通过体外抑菌试验测定大蒜提取物对临床分离的猪源大肠杆菌的抑菌效果、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),通过腹腔注射猪源大肠杆菌建立小鼠腹泻模型,成功建模后将小鼠分为空白组,模型组,大蒜提取物低、高剂量组,连续灌胃给药7 d,观察小鼠临床症状,测定各组小鼠死亡率、腹泻率,测定脏器指数和粪便隐血指数,并进行病理组织学分析。结果表明:试验成功分离、鉴定出猪源大肠杆菌,对大蒜提取物非常敏感,大蒜提取物对猪源大肠杆菌的MIC为31.25 mg/mL,MBC为62.5 mg/mL;与模型组相比,大蒜提取物低、高剂量组小鼠给药后采食量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01);大蒜提取物低剂量组小鼠第1,3,4,6,7天体重显著增加(P<0.05),大蒜提取物高剂量组小鼠第1,7天体重显著增加(P<0.05);大蒜提取物低、高剂量组小鼠肝脏指数极显著降低(P<0.01),小鼠脾脏指数显著降低(P<0.05);粪便隐血检测结果转为阴性。模型组十二指肠肠绒毛断裂变短且大量脱落,肠腺出现明显变性,黏膜中发生大量炎性细胞浸润;大蒜提取物高、低剂量组小鼠十二指肠黏膜上皮及腺体结构基本完整,固有层腺体间质有少量炎症细胞浸润。说明大蒜提取物对猪源大肠杆菌具有明显的体外抗菌作用,可有效抑制猪源大肠杆菌所致的小鼠腹泻。

黄芪总黄酮对RAW264.7细胞细胞因子和介质分泌水平的影响

试验采用传统中药黄芪的主要成分黄芪总黄酮为研究对象,探讨了黄芪总黄酮的体外免疫作用。以RAW264.7细胞为模型,通过细胞毒性试验拟定黄芪总黄酮的试验剂量,分别设立药物低、中、高剂量组以及空白组,通过ELISA法测定细胞因子IL-6、IL-1β、IFN-γ、TNF-α和介质PGE2的含量,Griess法测定介质NO分泌水平,Western blot法分析iNOS和COX-2蛋白含量变化。结果表明:黄芪总黄酮剂量依赖性的促进了正常条件下RAW264.7细胞上清液中细胞因子IL-6、IL-1β、IFN-γ、TNF-α和细胞介质NO、PGE2的分泌,上调了iNOS和COX-2蛋白的表达,表明黄芪总黄酮具有体外免疫增强作用。