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猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达 被引量:7
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作者 郑亮 邹德华 +8 位作者 程丽鑫 李兴志 张雅婷 沈玉江 武雪宁 徐嘉欣 王显赫 张华 曹宏伟 《黑龙江八一农垦大学学报》 2018年第4期81-85,共5页
E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中... E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。 展开更多
关键词 PEDV E基因 载体构建 蛋白表达
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产表面活性素枯草芽孢杆菌YHI的培养基优化研究 被引量:5
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作者 沈玉江 雷亚峰 +13 位作者 刘健 郑亮 张雅婷 王显赫 武雪宁 徐嘉欣 郭德轩 李钰昌 刘昕旸 徐淑艳 李鹏飞 曹宏伟 吴志军 张华 《黑龙江八一农垦大学学报》 2020年第5期69-76,128,共9页
表面活性素(surfactin)是由微生物代谢产生的一类具有高表面活性、抑菌、抗病毒、抗肿瘤等特性的脂肽类物质,在石油开发、环境治理、生物医药、生物防治等领域具有广阔应用前景。目前surfactin的工业化发酵生产产率不高与发酵培养基种... 表面活性素(surfactin)是由微生物代谢产生的一类具有高表面活性、抑菌、抗病毒、抗肿瘤等特性的脂肽类物质,在石油开发、环境治理、生物医药、生物防治等领域具有广阔应用前景。目前surfactin的工业化发酵生产产率不高与发酵培养基种类及浓度具有重要关系。研究采用单因素和Placket-Burman试验设计方法对一株产surfactin的枯草芽孢杆菌分别进行最适碳源、氮源种类和影响surfactin产量的显著因素进行筛选,最后利用响应面法建立二阶回归模型,获得了使surfactin产率最大的培养基组成及各成分浓度,分别为淀粉+米糠油(1∶1)32 g·L^-1、豆粕水解液8 g·L^-1、氯化钙4.5 mg·L^-1、酵母粉0.3 g·L^-1,KH2PO41 g·L^-1,MgSO4·7H2O 0.02 mg·L^-1,FeSO4·7H2O 0.02 mg·L^-1,硫酸锌0.02 mg·L^-1,L-谷氨酸钠1 mg·L^-1,硫酸锰0.01 m·L^-1,氨基酸:Thr,Met各0.02 mg·L^-1,利用此优化培养基在pH 7.0,35℃、摇床200 r·min-1条件进行发酵,培养48 h,surfactin的最高产量达到3.76 g·L^-1,比初始培养基提高了127.45%,与模型预测值接近。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 表面活性素 响应面 发酵优化
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EV71病毒诱导细胞应激颗粒形成的初步研究
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作者 武雪宁 徐嘉欣 +8 位作者 王显赫 邹德华 郑亮 程丽鑫 李兴志 张雅婷 沈玉江 张华 曹宏伟 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第5期83-90,共8页
肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科,肠道病毒属,肠道病毒A型的成员,是引起婴幼儿手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)的一种重要病原病毒。但截至目前,EV71病毒与宿主细胞相互作用的机制仍不清楚。为了研究EV7... 肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科,肠道病毒属,肠道病毒A型的成员,是引起婴幼儿手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)的一种重要病原病毒。但截至目前,EV71病毒与宿主细胞相互作用的机制仍不清楚。为了研究EV71病毒诱导应激颗粒形成的分子机制,研究首先构建了真核表达载体pDsRed2-G3BP1,随后构建了稳定表达融合蛋白RFP-G3BP1蛋白的HeLa细胞系(HeLaRFP-G3BP1),并应用Western Blot和免疫荧光技术证实了G3BP1融合蛋白的正确表达。EV71病毒感染HeLaRFP-G3BP1后,超过40%感染细胞的胞质中出现了应激颗粒。此外,应用微管特异性抑制剂破坏细胞微管完整性之后,显著抑制应激颗粒的迁移聚集。研究证明了EV71病毒诱导细胞应激颗粒的初步形成并且应激颗粒的迁移聚集依赖于微管的完整性。 展开更多
关键词 EV71病毒 应激颗粒 G3BP1 微管
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Construction and preliminary application of large language model for reservoir performance analysis
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作者 PAN Huanquan LIU Jianqiao +13 位作者 GONG Bin ZHU Yiheng BAI Junhui HUANG Hu FANG Zhengbao JING Hongbin LIU Chen KUANG Tie LAN Yubo WANG Tianzhi XIE Tian CHENG Mingzhe QIN Bin shen yujiang 《Petroleum Exploration and Development》 SCIE 2024年第5期1357-1366,共10页
A large language model(LLM)is constructed to address the sophisticated demands of data retrieval and analysis,detailed well profiling,computation of key technical indicators,and the solutions to complex problems in re... A large language model(LLM)is constructed to address the sophisticated demands of data retrieval and analysis,detailed well profiling,computation of key technical indicators,and the solutions to complex problems in reservoir performance analysis(RPA).The LLM is constructed for RPA scenarios with incremental pre-training,fine-tuning,and functional subsystems coupling.Functional subsystem and efficient coupling methods are proposed based on named entity recognition(NER),tool invocation,and Text-to-SQL construction,all aimed at resolving pivotal challenges in developing the specific application of LLMs for RDA.This study conducted a detailed accuracy test on feature extraction models,tool classification models,data retrieval models and analysis recommendation models.The results indicate that these models have demonstrated good performance in various key aspects of reservoir dynamic analysis.The research takes some injection and production well groups in the PK3 Block of the Daqing Oilfield as an example for testing.Testing results show that our model has significant potential and practical value in assisting reservoir engineers with RDA.The research results provide a powerful support to the application of LLM in reservoir performance analysis. 展开更多
关键词 reservoir performance analysis artificial intelligence large model application-specific large language model in-cremental pre-training fine-tuning subsystems coupling entity recognition tool invocation
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