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Identification of additional QTLs for flowering time by removing the effect of the maturity gene E1 in soybean 被引量:2
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作者 LU Si-jia LI Ying +10 位作者 WANG Jia-lin NAN Hai-yang CAO Dong LI Xiao-ming shi dan-ning FANG Chao shi Xin-yi YUAN Xiao-hui Jun Abe LIU Bao-hui KONG Fan-jiang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期42-49,共8页
The adaptability of soybean to be grown at a wide range of latitudes is attributed to natural variation in the major genes and quantitative trait loci (QTLs) that control flowering time and maturity. Thus, the ident... The adaptability of soybean to be grown at a wide range of latitudes is attributed to natural variation in the major genes and quantitative trait loci (QTLs) that control flowering time and maturity. Thus, the identification of genes controlling flowering time and maturity and the understanding of their molecular basis are critical for improving soybean productivity. However, due to the great effect of the major maturity gene E1 on flowering time, it is difficult to detect other small-effect QTLs. In this study, aiming to reduce the effect of the QTL, associated with the E1 gene, on the detection of other QTLs, we divided a population of 96 recombinant inbred lines (RILs) into two sub-populations: one with the E1 allele and another with the elns allele. Compared with the results of using all 96 recombinant inbred lines, additional QTLs for flowering time were identified in the sub-populations, two (qFT-B1 and qFT-H) in RILs with the E1 allele and one (qFT-J-2) in the RILs with the elnl allele, respectively. The three QTLs, qFT-B1, qFT-H and qFT-J-2 were true QTLs and played an important role in the regulation of growth period. Our data provides valuable information for the genetic mapping and gene cloning of traits controlling flowering time and maturity and will help a better understanding of the mechanism of photoperiod-regulated flowering and molecular breeding in soybean. 展开更多
关键词 multiple QTL model (MQM) mixed model-based composite interval mapping (MCIM) PHOTOPERIOD maturity productivity
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人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用及其分子机制 被引量:1
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作者 颜倩 石丹宁 +2 位作者 杨佳迪 何悦双 赵丕文 《中南药学》 CAS 2022年第5期1028-1033,共6页
目的探究人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用及分子机制。方法选取22~24 d SD的大鼠提取卵巢颗粒细胞进行原代培养,应用顺铂诱导建立卵巢早衰模型。设置正常组,模型组,人参皂苷Rg_(1)低浓度组、中浓度组、高浓度组和... 目的探究人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞的保护作用及分子机制。方法选取22~24 d SD的大鼠提取卵巢颗粒细胞进行原代培养,应用顺铂诱导建立卵巢早衰模型。设置正常组,模型组,人参皂苷Rg_(1)低浓度组、中浓度组、高浓度组和雌二醇(E2)组。HE染色及免疫细胞化学法进行颗粒细胞鉴定;CCK8法检测人参皂苷Rg_(1)作用24 h、48 h对顺铂损伤颗粒细胞的保护作用;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western blot法检测FSHR、PI3K、p-AKT、AKT、Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果细胞形态观察和胞质FSHR表达检测结果均表明所提取细胞为卵巢颗粒细胞;顺铂处理12 h后,颗粒细胞增殖率呈剂量依赖性下降,而给予人参皂苷Rg_(1)后,细胞增殖率下降被显著抑制,且呈剂量和时间依赖性;与模型组比较,人参皂苷Rg_(1)和E2处理后卵巢颗粒细胞中FSHR、PI3K、p-AKT/AKT及Bcl-2/Bax蛋白表达水平显著上升,而PI3K抑制剂干预后,Bcl-2蛋白表达显著下降。结论人参皂苷Rg_(1)对顺铂损伤的卵巢颗粒细胞具有保护作用,该保护作用可能通过激活FSHR/PI3K/AKT通路,抑制卵巢颗粒细胞凋亡实现。 展开更多
关键词 人参皂苷Rg_(1) 卵巢早衰 细胞凋亡 FSHR/PI3K/AKT 卵巢颗粒细胞
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四物汤在卵巢衰老大鼠骨骼肌中的雌激素样作用机制研究 被引量:3
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作者 杨佳迪 石丹宁 +2 位作者 陈瑶 何悦双 赵丕文 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第4期607-612,共6页
目的:探讨四物汤通过胰岛素样生长因子-1(Insulin-ike growth factors-1,IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)mTOR信号通路发挥对4-乙烯基环己烯二环氧化合物(4-Vinylcyc... 目的:探讨四物汤通过胰岛素样生长因子-1(Insulin-ike growth factors-1,IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)mTOR信号通路发挥对4-乙烯基环己烯二环氧化合物(4-Vinylcyclohexene Diepoxide,VCD)诱导的卵巢衰老大鼠骨骼肌的保护作用及其分子机制。方法:选用28日龄雌性F-344大鼠,随机选取6只作为空白对照组,剩余大鼠连续腹腔注射VCD溶液(160 mg/kg/d)20天,每天阴道涂片检测动情周期,连续观察12d无角化细胞或仅有少量角化细胞即符合"卵巢衰老"表现,经动情周期筛选出24只造模成功的大鼠,分为模型组(Model)、阳性(戊酸雌二醇,E2)对照组、四物汤高剂量(SWT-H)组和四物汤低剂量(SWT-L)组,每组6只,灌胃持续3周后取材。取大鼠骨骼肌组织进行HE染色观察病理组织结构;MASSON染色骨骼肌纤维形态变化;RT-PCR检测骨骼肌组织中各基因的mRNA水平。结果:与空白组比较,模型组骨骼肌肌纤维排列疏松,分布不均且有断点,胞浆不均,细胞核增多,出现增生的结缔组织,胶原纤维逐渐增多且肌纤维间距变宽;与模型组相比,E2组、SWT-H组与SWT-L组肌纤维排列相对整齐,胞浆较为均匀。肌肉形态较规则,纤维间距缩短,胶原纤维减少。RT-PCR结果显示,与空白组相比,模型组IGF-1、PI3K、AKT、mTOR基因的mRNA表达量明显下调,E2组、SWT-H组与SWT-L组的IGF-1、PI3K、mTOR的表达明显上升,SWT-H组AKT表达无明显变化,无统计学意义,SWT-L组AKT表达相对降低。与模型组相比,E2组、SWT-H组与SWT-L组的IGF-1、AKT、mTOR的表达明显增加,且具有剂量依赖性,PI3K表达增加,但无明显剂量依赖性。结论:四物汤可以明显改善VCD诱导的卵巢衰老大鼠的肌肉减少情况,其机制可能是通过IGF-1-PI3K-AKT-mTOR信号通路来发挥其抑制肌肉流失的作用。 展开更多
关键词 四物汤 肌肉减少症 IGF-1/PI3K/AKT/mTOR 4-乙烯基环己烯二环氧化合物 植物雌激素
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基于GPER介导途径探讨隐丹参酮诱导人乳腺癌SKBR-3细胞凋亡的分子机制 被引量:10
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作者 石丹宁 崔丽霞 +3 位作者 赵丕文 孙丽萍 陈梦 牛建昭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期4905-4911,共7页
基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)及其介导的PI3K/AKT途径探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)诱导人乳腺癌细胞凋亡的效应及其分子机制。选用核ER阴性、GPER阳性人乳腺癌SKBR-3细胞,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测CPT对细胞凋亡率的影... 基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)及其介导的PI3K/AKT途径探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)诱导人乳腺癌细胞凋亡的效应及其分子机制。选用核ER阴性、GPER阳性人乳腺癌SKBR-3细胞,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测CPT对细胞凋亡率的影响,Western blot法检测CPT对凋亡效应蛋白caspase-3表达的影响;Western blot及免疫荧光技术检测CPT对GPER介导的PI3K/AKT通路上关键蛋白表达的调控效应;同时,为进一步明确GPER介导的PI3K/AKT信号通路在CPT诱导SKBR-3细胞凋亡中的作用,选用GPER特异性激动剂G1、特异性拮抗剂G15及PI3K特异性抑制剂LY294002进行干预。结果显示,5,10μmol·L^-1CPT作用48 h后,SKBR-3细胞的凋亡率上升为46.1%,69.0%(P<0.01),caspase-3表达则随着CPT浓度增加而升高(P<0.01)。PI3K,AKT,p-AKT蛋白表达均可被CPT抑制(P<0.05或P<0.01),G1与5μmol·L^-1CPT联合作用48 h后可见AKT与p-AKT的表达量进一步降低(P<0.05),而G15与5μmol·L^-1CPT联合作用后AKT与p-AKT表达的下降被明显抑制(P<0.05);1μmol·L^-1LY294002干预下,可见AKT,p-AKT的表达受到了更为明显的抑制(P<0.01)。AKT与p-AKT的荧光表达强度同样能够受到CPT抑制,G1,G15,LY294002的干预与Western blot结果一致(P<0.05或P<0.01)。此外,CPT对SKBR-3细胞中GPER表达具有一定的抑制效应(P<0.01),加入G1可相对抑制CPT对GPER表达的下调作用;加入G15可使CPT对GPER表达的抑制作用进一步增强。综上,隐丹参酮可诱导人乳腺癌SKBR-3细胞凋亡,其分子途径可能与隐丹参酮对GPER表达及其介导的PI3K/AKT信号通路的调控作用有关。 展开更多
关键词 隐丹参酮 GPER 乳腺癌 SKBR-3 PI3K/AKT 细胞凋亡 植物雌激素
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基于网络药理学结合体内实验研究探讨四物汤的植物雌激素样效应及其分子机制 被引量:7
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作者 张则业 杨佳迪 +3 位作者 颜倩 石丹宁 何悦双 赵丕文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2750-2758,共9页
基于网络药理学结合体内实验研究探讨四物汤靶向生殖系统的植物雌激素样效应及其雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型调节与介导的分子机制。首先利用中药系统药理学技术平台(TCMSP),收集四物汤的活性成分及靶点。通过GeneCards和OMI... 基于网络药理学结合体内实验研究探讨四物汤靶向生殖系统的植物雌激素样效应及其雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型调节与介导的分子机制。首先利用中药系统药理学技术平台(TCMSP),收集四物汤的活性成分及靶点。通过GeneCards和OMIM数据库收集“雌激素”的相关基因。借助STRING网站和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI)网络及“化学成分-靶点-疾病”网络,筛选核心靶点。利用R软件对核心靶点进行GO(Gene Ontology)、KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析。体内实验选取22 d龄SD雌鼠,四物汤灌胃4 d。HE染色观测子宫形态学变化,RT-PCR方法检测子宫、卵巢ER亚型及其介导的EGFR/MAPK下游传导通路关键调控因子的mRNA表达量。结果显示,四物汤发挥植物雌激素样效应的相关靶点共74个;KEGG通路富集分析表明,其发挥效应的机制与雌激素信号通路密切相关。体内实验结果发现,四物汤组大鼠子宫内膜显著增厚;卵巢组织ERα、ERβ、GPER mRNA表达量均显著下降,子宫组织ERα、ERβmRNA表达量显著下降,GPER mRNA表达量显著上升。卵巢、子宫组织EGFR mRNA表达量均明显增加,p38 MAPK、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达量均明显减少。该研究通过网络药理学分析及体内实验揭示了四物汤靶向生殖系统发挥雌激素样效应的分子机制,为四物汤妇科疗效机制的全面揭示提供了依据。 展开更多
关键词 四物汤 雌激素受体 植物雌激素 丝裂原活化蛋白激酶
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基于GPER介导的EGFR/MEK/ERK途径探讨四物汤含药血清促进成骨细胞增殖的分子机制 被引量:2
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作者 张晨颖 石丹宁 赵丕文 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期5100-5103,共4页
目的:探究四物汤对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1增殖的影响及其基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路发挥效应的分子机制。方法:将20只雌... 目的:探究四物汤对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1增殖的影响及其基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路发挥效应的分子机制。方法:将20只雌性SD大鼠随机分为对照组,雌二醇(0.16 mg·kg^(-1)·d^(-1))组,四物汤高、低剂量(2.08、0.52 g·kg^(-1)·d^(-1))组。灌胃4 d后,经腹主动脉取血,制备含药血清。MTT法检测四物汤含药血清对MC3T3-E1细胞增殖的影响;Western blot法检测四物汤含药血清对MC3T3-E1细胞中EGFR/MEK/ERK信号通路相关蛋白EGFR、MEK、ERK1/2表达的调控作用。为了进一步明确GPER在四物汤影响成骨细胞增殖中的介导作用,在四物汤高剂量组中应用GPER特异性激动剂G1(终浓度1×10^(-8)mol/L)与抑制剂G15(终浓度1×10^(-8)mol/L)进行干预。结果:四物汤含药血清可促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.01)。与对照组比较,四物汤高剂量组可上调MC3T3-E1细胞中EGFR、MEK、ERK1/2蛋白表达水平(P<0.01)。与四物汤高剂量组比较,在加入G1后,上述蛋白表达进一步增高(P<0.01);加入G15干预则会拮抗此效应,即升高的蛋白表达水平将有所下降(P<0.05)。结论:四物汤可以促进MC3T3-E1细胞增殖,该效应可能是通过在GPER的介导下,上调EGFR/MEK/ERK信号通路实现的。 展开更多
关键词 四物汤 成骨细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体(GPER) EGFR/MEK/ERK信号通路
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GPER介导的丹参酮ⅡA抗三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移作用机制研究
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作者 何悦双 刘姣 +3 位作者 石丹宁 杨佳迪 尤凤鸣 赵丕文 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第24期4601-4605,共5页
目的:基于体外细胞实验,探索丹参酮ⅡA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的抑制作用及其分子机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,利用细胞增殖实验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞增殖的作用,并筛选适宜的药物浓度;应用划痕实验... 目的:基于体外细胞实验,探索丹参酮ⅡA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的抑制作用及其分子机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,利用细胞增殖实验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞增殖的作用,并筛选适宜的药物浓度;应用划痕实验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞迁移率的影响;Western Blot法检测丹参酮ⅡA对G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)及基质金属蛋白酶9(Matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达的影响。结果:细胞增殖实验结果显示,丹参酮ⅡA可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,且呈剂量依赖性(P<0.05);划痕实验结果显示,丹参酮ⅡA可以抑制MDA-MB-231细胞迁移,且呈剂量依赖性(P<0.01),加入GPER特异性抑制剂G15后迁移率有所上升(P<0.01)。Western Blot结果显示,丹参酮ⅡA可以显著下调GPER和MMP-9蛋白的表达水平并呈剂量依赖性(P<0.05),加入GPER特异性抑制剂G15后,MMP-9表达有所上升(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可以抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移,其机制可能与抑制GPER介导的MMP-9表达相关。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 丹参酮ⅡA G蛋白偶联雌激素受体 细胞迁移 基质金属蛋白酶9
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