桩撑式支护基坑通用弹性地基梁分析法

弹性地基梁法常用于模拟分析桩撑(锚)式支护基坑在开挖、设撑等施工工况中变形和受力的变化。目前利用该方法对某工况基坑分析时,首先要将整个支护桩在支撑处划分为若干个桩段,然后利用相邻桩段交界处的位移连续条件和受力平衡条件,推导出相应的待定参数方程,之后再利用求出的待定参数分析支护体系(基坑)的变形和受力。由于不同施工工况对应的支撑数和桩段数不同,因此该方法必须根据不同工况重新推导各自的参数方程,从而导致计算过程繁杂,难以形成通用计算公式和方法,也不易编程等问题。通过将支撑与桩段归纳为3种基本连接形式(即支撑分别相连于桩顶、相邻两桩段之间和坑底),本文建立了相邻两个桩段间待定参数的递推公式,进而推导出了适用于内支撑和锚索支撑形式、任意支撑道数、开挖或设撑工况的通用待定参数方程。该方程仅含4个参数,远少于现有方法且易于求解。文中算例结果验证了本文方法的合理性和可行性。

猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究

为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV(MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证实SADS-CoV可以诱导Vero E6细胞发生自噬。构建pEGFP-LC3的真核表达质粒并经双酶切及测序鉴定正确后转染Vero E6细胞,24 h后以SADS-CoV感染,24 h后经激光共聚焦显微镜观察可见,与阴性对照组细胞相比,感染SADS-CoV的细胞出现绿色荧光的点状聚集。进一步将SADS-CoV(MOI 0.1)感染Vero E6细胞不同时间后通过western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62表达水平的变化,结果显示,与阴性对照组相比,SADS-CoV感染组LC3-Ⅱ的表达水平升高,LC3-Ⅱ/GAPDH比值呈上升趋势,而p62蛋白表达水平则显著降低(P<0.05),表明SADS-CoV感染能够诱导Vero E6细胞产生完整的自噬应答。为了探究自噬对病毒复制的影响,本研究分别采用自噬抑制剂3-MA和自噬诱导剂Rapamycin处理Vero E6细胞后以SADS-CoV感染,于感染后不同时间收获细胞,通过western blot和病毒滴度(TCID_(50))测定检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与仅感染病毒的对照组相比,采用3-MA处理Vero E6细胞后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)均显著降低(P<0.05),而采用Rapamycin处理后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)则均显著升高(P<0.05)。针对ATG5基因设计3条特异性的ATG5 si RNA(siATG5-1/2/3),将干扰效率较好的siATG5-1转染Vero E6细胞后再以SADS-CoV感染,24 h后检测病毒滴度并利用western blot检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与未转染siATG5的3组阴性细胞相比,转染细胞中SADS-CoV N蛋白的表达水平及病毒滴度均显著降低(P<0.05)。本研究首次表明SADS-CoV感染可以诱导宿主细胞自噬并促进病毒的复制,该结果为深入研究SADS-CoV感染与其致病机理以及防控该病毒的感染奠定了基础。

猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用

为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,通过western blot鉴定重组S1-CTD蛋白(rS1-CTD)的表达及反应原性。结果显示,r S1-CTD以包涵体的形式表达,在40 ku处出现特异性条带。诱导表达后的r S1-CTD经不同浓度尿素重悬并超声离心,SDS-PAGE检测后切胶纯化,得到纯化的重组蛋白。利用BCA试剂盒测得蛋白的浓度为33μg/m L。将该重组蛋白乳化后经3次免疫新西兰大白兔,并在3免一周后采血,分离血清获得S1-CTD蛋白PAb。将SADS-Co V感染Vero E6细胞24 h后,以获得的兔PAb为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测该PAb的反应原性。Western blot结果显示,在约250 ku处出现特异性条带,而阴性对照组无该条带;IFA结果显示,SADS-Co V感染的细胞中出现绿色荧光,而阴性对照细胞无绿色荧光。将SADS-Co V感染仔猪的回肠组织制备病理切片,以制备的PAb为一抗,通过免疫组织化学(IHC)检测SADS-Co V的抗原。结果显示,该组织切片中出现棕色阳性信号,而阴性对照仔猪回肠组织切片则无该棕色信号。表明该PAb可与感染SADS-Co V的仔猪回肠组织中的相应抗原发生特异性免疫反应。综上所述,本实验制备的S1-CTD蛋白PAb具有良好的反应原性和免疫原性,可以用于western blot、IFA、IHC检测体内外SADS-Co V的感染,为后续SADS-Co V检测方法的建立及S蛋白生物学功能的研究奠定基础。

猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析柱纯化,浓缩后的蛋白经SDS-PAGE、western blot鉴定显示获得了分子量约为130 ku且大于理论大小的重组S1蛋白,表明该蛋白为分泌表达且具有良好的翻译后修饰。利用获得的重组S1蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,初步建立了SADS-CoV S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清均无交叉反应,仅与SADS-CoV阳性血清反应,表明该方法特异性较强;该方法检测SADS-CoV阳性血清,当稀释至1:3 200时仍为阳性,表明该方法具有较高的敏感性;对4份阳性血清的批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性和稳定性;利用该方法和间接免疫荧光试验(IFA)对50份临床样品检测,结果显示该间接ELISA检测到9份阳性样品,41份阴性样品;IFA检出5份阳性样品,45份阴性样品,二者的总符合率为92%。综上表明,本研究建立的间接ELISA检测方法能够特异、灵敏地检测SADS-CoV S1蛋白抗体,可以用于SADS-CoV灭活疫苗的免疫效果评价以及该病原的血清学流行病学调查和免疫水平监测,为SADS-CoV所致疫病的鉴别诊断和防控奠定基础。

2019年盛夏最大降水环流成因分析

利用1961-2020年黑龙江省盛夏(7-8月)降水量、NCAR/NCEP大气再分析和Nino34 SST资料,分析2019年盛夏黑龙江降水异常与ENSO事件背景下大尺度环流特征。结果表明:2019年盛夏黑龙江省降水处于多水时段,ENSO暖事件多发期降水偏多发生的概率增加。指出了2019年降水特点主要受东北冷涡与3次台风北上相互作用,发生6次重大降水过程;500 hPa高度距平场为西北-东南向呈“+、-、+”形势;西太平洋副热带高压明显偏东,脊区向北伸展有利台风北上;低纬主要有3支强南风距平气流北上进入气旋环流,为维持台风暴雨提供充足水汽;黑龙江中部和东部地区最大上升气流速度出现在600-300 hPa高度,也是台风活跃区,辐合明显,黑龙江省强降水出现在东部最大降水中心,落区位于三江平原北部鹤岗至萝北。

基于多维侧窗聚类分块的退化书法文档二值化

书法字文档图像在不良光照条件下的灰度值分布差异较大,低光照区域图像对比度较低、笔画形态纹理特征出现退化,传统方法通常仅考虑了局部信息的均值、平方差、熵等因素,在形态纹理方面考虑较少,从而对低对比度区域的特征信息不敏感.针对此类问题,本文提出了一种多维侧窗聚类分块的退化书法文档的二值化方法 CSSWF (clustering segmentation based SWF),该方法首先利用SWF卷积核描述具有相似形态学特征的像素块,之后提出多种修正规则利用下采样提取低纬度信息去修正特征区域.最后,对特征图中聚类块进行前后景分离,得到二值化结果图.本文使用FM、PSNR和DRD为指标,将现有方法和本文方法进行对比,实验结果表明,在自建的100张手写退化文档图像数据集下,本文方法在低对比度暗部区域的二值化效果较为稳定,在精准度和鲁棒性上优于对比算法.

内在能力在社区老年人步行能力与跌倒风险关系的中介效应研究

目的:探讨内在能力在社区老年人步行能力与跌倒风险关系的中介效应。方法:选取2022年10月至2023年10月期间本社区卫生服务中心的786名老年人作为研究对象。采用一般资料调查表及内在能力、步行能力、跌倒风险评估量表分别收集和评估研究对象的一般资料、内在能力、步行能力、跌倒风险。采用结构方程模型分析内在能力在社区老年人步行能力与跌倒风险关系的中介效应。结果:本研究所有老年人内在能力得分为67.75±6.73分;步行能力为237.88±26.46 m;跌倒风险得分为81.85±5.19分。经Pearson相关分析结果显示,内在能力与步行能力呈正相关关系(P<0.05),与跌倒风险呈负相关关系(P<0.05),步行能力与跌倒风险呈负相关关系(P<0.05)。内在能力在社区老年人步行能力与跌倒风险中起部分中介作用,中介效应占总效应的30.89%。结论:内在能力、步行能力是影响社区老年人跌倒风险的重要因素,内在能力在步行能力与跌倒风险中起部分中介作用,可通过干预老年人内在能力控制其跌倒风险。

数控刀具技术与应用探析

数控刀具是切削加工的基础工艺装备,在制造过程中与数控机床相互配合承载不同的加工工艺,共同完成材料切削加工。针对数控刀具的选用,探讨了选用要点,并以具体数控车加工为例进行了刀具的选用,以促进数控刀具更好地发展与应用。

基于典型变径深孔的加工方法及应用

深孔加工技术是机械制造领域的工艺难题,变径深孔结构零件的制造更具有明显的工艺特征与加工难度。主要阐述了典型变径深孔件的技术特点,重点介绍了在车床上镗削、铰削深孔的工艺方法及在加工过程中需控制的技术要点,并简要介绍了变径深孔的精细加工方法以降低表面粗糙度,最后以加工案例为导向,分析了减振镗刀杆在复杂深变径深孔中的应用。采用减振镗刀杆可最大化降低切削振动,获得最佳工艺系统稳定性和加工精度。

纳米佐剂对树突状细胞活化效果的评估

为评价新型纳米佐剂乳化抗原的免疫效果,本研究以FITC标记的卵清蛋白(FITC-OVA)为抗原,以新型纳米佐剂乳化制备OVA抗原(Nano-OVA),并将ISA 201佐剂乳化制备OVA抗原(201-OVA),抗原浓度均为100μg/mL。将10μL Nano-OVA和201-OVA分别加入小鼠骨髓源树突状细胞(DC2.4)中,2 h后收集细胞样品,利用流式细胞术检测各组DC2.4对OVA抗原的吞噬水平(FITC-OVA+%)及交叉递呈OVA抗原肽(SIINFEKL)水平(PE-25-D1.16+%)。将DC2.4分别与5μL Nano-OVA和201-OVA共孵育24 h后收集细胞样品,利用荧光定量PCR(qPCR)检测各组DC2.4共刺激分子CD86、细胞因子IL-12p40和IL-6 mRNA的转录水平。流式细胞术检测结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组DC2.4 FITC-OVA+%和PE-25-D1.16+%均极显著升高(P<0.001),且均极显著高于对照组(P<0.001)。qPCR结果显示,Nano-OVA组DC2.4中IL-12p40 mRNA的转录水平极显著高于对照组(P<0.01),显著高于201-OVA组(P<0.05);Nano-OVA组DC2.4中CD86及IL-6 mRNA的转录水平极显著高于201-OVA和对照组(P<0.01),但201-OVA组和对照组DC2.4中CD86、IL-12p40及IL-6 mRNA的转录水平均无显著差异(P>0.05)。将50μL Nano-OVA和201-OVA分别通过足垫皮下免疫BALB/c小鼠,12 h后剖杀各组小鼠分离其腘窝淋巴结,制备冷冻切片,利用免疫组化试验检测各组FITC-OVA在小鼠腘窝淋巴结中的分布,并利用Image J软件量化各组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA平均荧光强度。免疫组化试验结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA荧光分布更广;荧光强度观察结果显示,Nano-OVA和201-OVA组小鼠腘窝淋巴结中FITC-OVA的平均荧光强度差异不显著(P>0.05),但均显著强于对照组(P<0.05)。上述结果表明,Nano-OVA可更高效地被DC2.4吞噬、交叉递呈以及促进DC2.4的活化,诱导机体产生更强的免疫应答及靶向淋巴结的能力。本研究初步评估了新型纳米佐剂对DC的活化效果及其向小鼠淋巴结靶向引流FITC-OVA抗原的效果,为其临床应用提供参考依据。

传播学视角下世界文化遗产网页翻译研究——以“数字敦煌”为例

散布在华夏大地上的世界文化遗产敦煌莫高窟是中华文明的生动见证,而敦煌文化的国际传播是推动中华文化“走出去”战略的重要举措之一。本研究以传播学为理论框架,结合哈罗德·拉斯韦尔5W传播要素,研究世界文化遗产敦煌莫高窟网站“数字敦煌”的网页翻译现状以及存在的问题。研究发现,“数字敦煌”有两点值得推广和借鉴之处,但是,网站也存在三个方面的问题。鉴于此,笔者提出四点改进措施,以期为世界文化遗产的网站设计提供借鉴思路。

AV80轴流压缩机叶片根部裂纹原因分析及对策

针对轴流式压缩机,分析了叶片根部裂纹原因,并通过优化防喘振线和加装阻塞线,防范了叶片根部断裂问题的发生,保障了机组平稳高效运行。

切削速度对钛合金切屑形貌和剪切带的影响研究

钛合金TC4是一种难加工材料,在切削速度不高时容易形成锯齿形切屑。利用AdvantEdge模拟钛合金TC4切屑的形成过程,研究切削速度对切屑形貌和剪切带的影响。仿真结果表明:随着切削速度的增加,切削力先快速增加,而后平稳在一定水平上,随着速度的增加又快速变大。产生的切屑均为锯齿状切屑,随着速度的增加,锯齿形切屑的锯齿化程度增加,锯齿化频率也增加。剪切带的宽度、温度、应变率、滑移速度随切削速度的增加而非线性增加,剪切带内的应力随速度的增加先减少再变大。

微细铣刀几何参数对TC4合金加工影响的仿真分析

在微细铣削过程中,刀具前角、刀尖圆弧半径等几何参数的选择与铣削力有着密切的关系,不仅会影响刀具的使用寿命,还会影响铣削过程的稳定性以及工件已加工表面质量。文章针对直径为0.1mm的双刃微细立铣刀展开研究,利用AdvantEdge有限元软件分析不同刀具结构参数铣削钛合金TC4对铣削力、铣削温度的影响规律,并设计正交试验求得三种因素的最优组合,并基于响应曲面法求得微细铣刀几何参数交互影响规律。结果表明:对铣削力造成影响的因素主次顺序为刀尖圆弧半径、径向前角、螺旋角;最小铣削力出现在"小径向前角+小刀尖圆弧半径+大螺旋角"区域。

基于平均差异度的改进k-prototypes聚类算法

针对k-prototypes聚类算法随机选取初始聚类中心导致聚类结果不稳定,以及现有的大多数混合属性数据聚类算法聚类质量不高等问题,提出了基于平均差异度的改进k-prototypes聚类算法.通过利用平均差异度选取初始聚类中心,避免了初始聚类中心点选取的随机性,同时利用信息熵确定数值数据的属性权重,并对分类属性度量公式进行改进,给出了一种混合属性数据度量公式.结果表明,改进后的算法具有较高的准确率,能够有效处理混合属性数据.

船舶通信终端远程导航监控算法研究

传统的船舶通信终端远程导航监控算法,监控结果准确率低,无法满足现代船舶业提出的要求。为解决上述问题,研究了一种新的船舶通信终端远程导航监控算法,利用GIS定位技术提取船舶运行参数,并将监控到的数据融合到一起,通过CAN总线压缩编码,传给中心系统,再利用简化处理完成整个监控计算过程。为验证研究的监控算法效果,与传统监控算法进行实验对比,结果表明,给出的监控算法计算结果准确率远远高于传统的监控算法,为检修工作提供强大的技术支持。

哈尔滨工业大学“大学物理”在线教学模式探索与实践

为保障疫情期间教学工作顺利开展,哈尔滨工业大学大学物理教研室采用QQ群视频进行在线授课.本文将讲述QQ群视频直播授课方法与相关技巧,将分别从课前准备、课堂授课及课后考核3个方面介绍如何有效进行在线大班理论课程教学.

猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立与应用

为建立简捷、灵敏的猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)检测方法,本研究针对SADS-CoV N基因片段保守区域设计特异性的反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,经条件优化后显示建立的SADS-CoV RTLAMP检测方法最佳反应条件为64℃,50 min,初步建立SADS-CoV的RT-LAMP快速检测方法。利用该方法检测SADS-CoV、猪流行性腹泻性病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪肠道病毒9型(PEV9),评估其特异性,结果显示除SADS-CoV外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;将病毒RNA 10倍倍比稀释后作为模板,利用该RT-LAMP与普通RT-PCR同时检测,结果显示,RTLAMP方法比普通RT-PCR方法的敏感性高103倍,敏感性较高。以同一批次或不同批次的SADS-CoV核酸为模板进行RT-LAMP试验,结果显示RT-LAMP批内批间均可稳定的检出阳性样本,表明该方法具有良好的重复性和稳定性。对经口服感染SADS-CoV和未感染仔猪的临床样本进行检测,结果显示RT-LAMP与普通RT-PCR检测结果高度一致。本实验首次建立的SADS-CoV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高,操作简便、快速和高通量检测的优点,为临床SADS-CoV感染的快速诊断和综合防控提供检测手段。

猪流行性腹泻病毒特异性SIgA抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

为检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性分泌性Ig A (PEDV SIg A)抗体,本研究以纯化的PEDV粒子作为包被抗原,以待检初乳或直肠拭子处理样品为检测样品,以HRP标记的鼠抗猪SIg A分泌成分(SC)的单克隆抗体(MAb)为酶标二抗,经过各条件优化,建立了检测初乳和直肠黏膜中PEDV SIg A的间接ELISA方法。并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验。结果显示,PEDV粒子的最佳包被浓度为5.8 ng/孔,HRP标记的鼠抗猪SC抗体的最佳稀释度为1∶3 000。该方法与TGEV、Po RV感染的初乳样品无交叉反应,特异性较强。当初乳的稀释度在1∶6 400时,该ELISA方法检测结果仍为阳性,敏感性较高;批内和批间重复试验的变异系数均小于10%,表明其重复性较好。该方法的建立为研究猪群感染PEDV和PEDV疫苗免疫后特异性SIg A水平及黏膜免疫评价提供了有效的技术手段,具有很好的应用前景。

猪流行性腹泻病毒IgA抗体间接ELISA方法的建立

为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用融合PCR的方法,将PEDV G2型LNct2a株S蛋白的S1基因片段与人源IgG分子的Fc基因片段融合,克隆于真核表达质粒pAAV-IRES-hr GFP中,构建真核表达质粒pAAV-LNCT2-S1-Fc并转染293T细胞,表达并纯化了S1蛋白。以纯化的S1蛋白作为包被抗原,以羊抗猪IgA-HRP为二抗,通过优化反应条件,建立了检测PEDV G2型特异性IgA抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验。特异性试验结果显示该方法对猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪德尔塔冠状病毒和圆环病毒的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示该方法能够检测出400倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性变异系数均小于10%。利用该间接ELISA方法和间接免疫荧光方法(IFA)同时对临床样品检测,结果显示二者总符合率为98.6%。本研究建立的ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,能够用于检测及评价血清中PEDV特异性IgA抗体的水平,为PEDV流行情况及免疫效果评价提供了有效的手段。