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捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶对山羊PBMCs免疫功能的影响 被引量:2
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作者 胡孟娟 周丽娜 +4 位作者 牛延萍 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期804-810,共7页
旨在探究捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶(Hc58)对山羊外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的影响。采集健康山羊血液,分离出PBMCs和单核细胞,分别以质量浓度为0、10、20、40μg·mL-1的重组蛋白Hc58与细胞体外共培养,采用硝酸还原酶法测... 旨在探究捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶(Hc58)对山羊外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的影响。采集健康山羊血液,分离出PBMCs和单核细胞,分别以质量浓度为0、10、20、40μg·mL-1的重组蛋白Hc58与细胞体外共培养,采用硝酸还原酶法测定不同浓度Hc58对单核细胞分泌一氧化氮(NO)的影响;采用流式细胞术检测重组蛋白对单核细胞吞噬FITC-dextran能力的影响;采用荧光定量PCR检测PBMCs中IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、IFN-γ和TGF-β的mRNA转录情况;采用迁移小室研究重组蛋白对PBMCs迁移的影响;采用流式细胞术检测不同浓度Hc58对PBMCs凋亡的影响。研究表明重组蛋白Hc58显著促进山羊单核细胞分泌NO;并且增强了山羊单核细胞的吞噬能力;Hc58显著上调IL-2、IL-4、IL-17、IFN-γ的表达量;Hc58显著提高山羊PBMCs凋亡比例,也使PBMCs迁移率增加。捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶能通过多种途径影响宿主PBMCs发挥免疫作用。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 半胱氨酸蛋白酶 山羊 外周血单个核细胞 流式细胞术
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Investigation on the co-infections of Toxoplasma gondii with PRRSV, CSFV or PCV-2 in swine in part of China 被引量:2
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作者 WANG Shuai ZHANG Meng +9 位作者 LIU Xin-chao LIN Tao YANG Han-chun YUAN Shi-shan ZHAO Guang-wei IA Hassan YAN Ruo-feng song xiao-kai XU Li-xin LI Xiang-rui 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期1838-1844,共7页
The objective of the present investigation was to estimate the prevalence of Toxoplasma gondii infection and co-infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), classical swine fever virus(CS... The objective of the present investigation was to estimate the prevalence of Toxoplasma gondii infection and co-infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), classical swine fever virus(CSFV) and porcine circovirus type 2(PCV-2) in pigs in China. A total of 372 tissues or serum samples collected from pigs distributed in 9 provinces/municipalities of China during the period from February 2011 to November 2012 were assayed for T. gondii antigens and antibodies using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) technique, while the PCR was designed for the detection of the PRRSV, CSFV and PCV-2, respectively. The total positive rate of T. gondii, PRSSV, CSFV and PCV-2 was 9.14%(34/372), 50.00%(186/372), 37.10%(138/372) and 3.23%(12/372), respectively. Among the 34 T. gondii positive samples, 26 samples were simultaneously infected with T. gondii and viruses, while the remaining eight samples were infected with T. gondii alone. In addition, the co-infection rate of T. gondii with PRSSV, T. gondii with PRSSV and CSFV, T. gondii with PRSSV and PCV-2, T. gondii with CSFV and PCV-2, T. gondii with PRSSV, CSFV and PCV-2 was 1.61%(6/372), 4.03%(15/372), 0.27%(1/372), 0.27%(1/372) and 0.81%(3/372), respectively. The results of the present survey revealed that PRRSV and CSFV were the common pathogens co-existing with porcine toxoplasmosis in China, and both of them could increase the chances of T. gondii infection in pig. This is the first report of T. gondii co-infections with viruses in pigs. It is very important to understand the interactions of parasite and virus, and can be used as reference data for the control and prevention of co-infections of T. gondii and viruses in pigs. 展开更多
关键词 Toxoplasma gondii COINFECTION PRRSV CSFV PCV-2 pig
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Isolation and Molecular Characterization of Toxoplasma gondii from Chickens in China 被引量:2
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作者 ZHAO Guang-wei SHEN Bo +5 位作者 XIE Qing XU Li-xin YAN Ruo-feng song xiao-kai Hassan Ibrahim Adam LI Xiang-rui 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CSCD 2012年第8期1347-1353,共7页
One strain of Toxoplasma gondii was successfully isolated from chickens in China by bioassay in mice. Antibodies and circulating antigens of T. gondii were assayed by the ELISA kits in 100 free range chickens from a r... One strain of Toxoplasma gondii was successfully isolated from chickens in China by bioassay in mice. Antibodies and circulating antigens of T. gondii were assayed by the ELISA kits in 100 free range chickens from a rural area surrounding Funing, China. Fifty-three chickens were antibody-positive and 21 chickens were antigen positive. Hearts, brains, spleens, lungs, livers, and kidneys of 21 antibody or antigen-positive chickens were bioassayed in mice. One strain of T. gondii was isolated from 1 of 21 (4.76%) chickens. The isolated T. gondii killed all of the inoculated mice. Genotyping of this isolate using polymorphisms at the loci 5′-SAG2, 3′-SAG2, SAG3, cB21-4, L358, BTUB, and GRA6 revealed that it was Type I. These indicated that it was virulent for mice. This is the first report of isolation of T. gondii from chickens in China. 展开更多
关键词 Toxoplasma gondii CHICKENS China ISOLATION
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Type I strain of Toxoplasma gondii from chicken induced different immune responses with that from human,cat and swine in chicken 被引量:1
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作者 ZHAO Guang-wei WANG Shuai +8 位作者 WANG Wang ZHANG Zhen-chao XIE Qing ZHANG Meng IA Hassan YAN Ruo-feng song xiao-kai XU Li-xin LI Xiang-rui 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第5期956-965,共10页
In this study,four strains of Toxoplasma gondii with the same genetic type(Type I) originated from chicken,human,cat and swine were used to compare the immune responses in resistant chicken host to investigate the r... In this study,four strains of Toxoplasma gondii with the same genetic type(Type I) originated from chicken,human,cat and swine were used to compare the immune responses in resistant chicken host to investigate the relationships between the parasite origins and the pathogenicity in certain host.A total of 300,10-day-old chickens were allocated randomly into five groups which named JS(from chicken),CAT(from cat),CN(from swine),RH(from human) and a negative control group(—Ve) with 60 birds in each group.Tachyzoites of four different T.gondii strains(JS,CAT,CN and RH) were inoculated intraperitoneally with the dose of 1×10~7 in the four designed groups,respectively.The negative control(-Ve) group was mockly inoculated with phosphate-buffered saline(PBS) alone.Blood and spleen samples were obtained on the day of inoculation(day 0) and at days 4,11,25,39 and 53 post-infection to screen the immunopathological changes.The results demonstrated some different immune characters of T.gondii infected chickens with that of mice or swine previous reported.These differences included up-regulation of major histocompatibility complex class Ⅱ(MHC Ⅱ) molecules in the early stage of infection,early peak expressions of interleukin(IL)-12(IL-12) and-10(IL-10) and long keep of IL-17.These might partially contribute to the resistance of chicken to T.gondii infection.Comparisons to chickens infected with strains from human,cat and swine,chickens infected with strain from chicken showed significant high levels of CD4~+ and CD8~+ T cells,interferon gamma(IFN-γ),IL-12 and IL-10.It suggested that the strain from chicken had different ability to stimulate cellular immunity in chicken. 展开更多
关键词 chicken Toxoplasma swine pathogenicity parasite inoculated infected immunity inoculation interleukin
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Synthesis, Structure and Electrochemistry of Macrocyclic 1,1'-Bis(1,3-phenyleneoxyacetylpyrazoyl)ferrocene
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作者 ZHU Mei-Jun song xiao-kai +1 位作者 SUN Jing YAN Chao-Guo 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期505-510,共6页
1,1'-Diacetoacetylferrocene 1 reacted with phenylene-1,3-dioxyactyl hydrazine 2 in absolute ethanol to give the macrocyclic ferrocenyl dipyrazole compound in moderate yield. Determined by X-ray structure analysis, it... 1,1'-Diacetoacetylferrocene 1 reacted with phenylene-1,3-dioxyactyl hydrazine 2 in absolute ethanol to give the macrocyclic ferrocenyl dipyrazole compound in moderate yield. Determined by X-ray structure analysis, it crystallizes in monoclinic system, space group P21/c with a = 13.7509(4), b = 8.1277(2), c = 21.7472(6) A, β = 103.1030(10)°, V = 2367.25(11) A^3, Z = 4, Dc = 1.505 g/cm^3, R = 0.0353 and wR = 0.0811. The electrochemical studies reveal that redox of Fe^+/Fe in ferrocene is a reversible one-electron process. 展开更多
关键词 FERROCENE ACETYLACETONE PYRAZOLE cyclic voltammetry
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变电站电气设备安装故障分析及控制措施
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作者 宋晓凯 王文豪 《电力系统装备》 2018年第7期165-166,共2页
变电站是电力系统的重要组成,其安装与设计质量直接影响电力系统能否有效运行。在进行变电站电气设备安装操作过程中,需要相关人员谨慎做好各项工作,并在变电站电气设备安装操作完成之后进行必要的质量检测。为此,文章结合变电站电气设... 变电站是电力系统的重要组成,其安装与设计质量直接影响电力系统能否有效运行。在进行变电站电气设备安装操作过程中,需要相关人员谨慎做好各项工作,并在变电站电气设备安装操作完成之后进行必要的质量检测。为此,文章结合变电站电气设备安装常见问题,为如何优化变电站电气设备安装进行策略分析。 展开更多
关键词 变电站 电气设备 安装故障 控制措施
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捻转血矛线虫海藻糖酶特性研究
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作者 文兆海 卡力比夏提·艾木拉江 +5 位作者 张朝莹 陆明敏 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1034-1039,共6页
对捻转血矛线虫海藻糖酶(HcTre)基因进行了克隆表达,得到了纯化的重组HcTre蛋白(rHcTre蛋白)。通过qPCR技术分析了HcTre基因在虫体不同发育阶段的转录水平。将rHcTre蛋白与山羊外周血单个核细胞(PBMCs)共孵育,探究其对PBMCs功能的影响... 对捻转血矛线虫海藻糖酶(HcTre)基因进行了克隆表达,得到了纯化的重组HcTre蛋白(rHcTre蛋白)。通过qPCR技术分析了HcTre基因在虫体不同发育阶段的转录水平。将rHcTre蛋白与山羊外周血单个核细胞(PBMCs)共孵育,探究其对PBMCs功能的影响。结果显示,HcTre基因在捻转血矛线虫不同发育阶段均有转录,且在虫卵阶段的转录水平最高。qPCR结果显示,rHcTre蛋白抑制了PBMCs中MHC-Ⅱ分子的转录水平,促进了IFN-γ、IL-17的转录水平。本研究分析了rHcTre蛋白的功能特性,有助于进一步了解寄生性线虫与宿主之间的相互作用机制。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 海藻糖酶 外周血单个核细胞 MHC-II IFN-Γ IL-17
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捻转血矛线虫BLAODA蛋白单克隆抗体的制备及在诊断中的初步应用 被引量:3
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作者 卡力比夏提·艾木拉江 文兆海 +4 位作者 陆明敏 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期753-760,共8页
为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4... 为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4、2E3和5B4。将这4株杂交瘤细胞分别接种小鼠腹腔,制备腹水,用层析柱纯化抗体并建立双抗体夹心ELISA方法。结果显示:筛选出的1B2、1G4、2E3和5B4细胞株产生的抗体效价高、特异性强,其抗体亚型均为Ig G1型,轻链均为kappa型,纯化的小鼠腹水的效价均可达1∶2^(22);基于抗捻转血矛线虫BLAODA的单抗1B2、5B4建立了双抗体夹心ELISA检测方法,其敏感性为90.6%,特异性为90.6%。本研究获得了捻转血矛线虫抗BLAODA单克隆抗体并建立了双抗体夹心ELISA方法,为捻转血矛线虫诊断试剂盒的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 BLAODA蛋白 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
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刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的免疫保护作用 被引量:2
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作者 周天缘 于正青 +7 位作者 李纯静 王茗悦 刘军龙 罗建勋 徐立新 宋小凯 严若峰 李祥瑞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期296-304,共9页
为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv。表达后的上述重组蛋白纯化后免疫小鼠,采集免疫后小鼠的血清,测定血清中的总一... 为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv。表达后的上述重组蛋白纯化后免疫小鼠,采集免疫后小鼠的血清,测定血清中的总一氧化氮(NO)、抗体及免疫相关细胞因子,分离小鼠脾,测定小鼠脾淋巴细胞的吞噬功能,最后小鼠腹腔接种弓形虫并绘制小鼠的生存曲线。结果显示,成功表达了弓形虫重组蛋白H2Bb(rTgH2Bb)及重组蛋白H2Bv(rTgH2Bv)。Western-blot结果表明重组蛋白具有良好的免疫原性。重组蛋白rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清中Ig G1的水平在一免和二免后均与对照组差异显著(P<0.05),rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清细胞因子γ干扰素的水平在一免及二免后均有显著提高(P<0.05)。rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠血清中NO含量在2次免疫后均显著高于对照组(P<0.05)。二免后重组蛋白rTgH2Bb免疫组和rTgH2Bv免疫组小鼠脾淋巴细胞的吞噬能力均显著高于对照组(P<0.05)。攻虫感染后,rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠的生存时间较对照组相比有所延长。结论:重组蛋白rTgH2Bb和rTgH2Bv有一定的抗弓形虫急性感染的作用,具有作为弓形虫疫苗候选抗原的潜在价值。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 组蛋白 原核表达 免疫保护 疫苗
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microRNA-654调控巨噬细胞游走抑制因子抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用
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作者 罗金 刘文阁 +4 位作者 任巧云 严若峰 宋小凯 刘光远 李祥瑞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1023-1030,共8页
为了解microRNA(mi RNA)调控巨噬细胞游走抑制因子(MIF)抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用,利用PCR扩增获得MIF基因的完整ORF,并进行体外原核表达,制备抗原免疫家兔,验证MIF重组蛋白对长角血蜱发育的影响。另外,预测可能调控MIF基因的mi ... 为了解microRNA(mi RNA)调控巨噬细胞游走抑制因子(MIF)抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用,利用PCR扩增获得MIF基因的完整ORF,并进行体外原核表达,制备抗原免疫家兔,验证MIF重组蛋白对长角血蜱发育的影响。另外,预测可能调控MIF基因的mi RNA分子,用双荧光素酶报告系统分析mi RNA与靶标基因之间的调控关系,并解析此作用下靶标基因引起的抗病原作用。结果显示,MIF基因是一个包含348 bp核酸,编码116个氨基酸的片段。动物免疫试验证实,MIF+GST重组蛋白对蜱发育的各项生理指标影响较小。并且MIF受mi R-654的负调控,其调控效率达到60%。在蜱体中,mi RNA抑制后的MIF表达对东方泰勒虫感染不同发育阶段的长角血蜱有一定的识别和清除作用,可降低蜱体中约55%的虫体。尽管MIF对蜱的发育没有明显影响,但是在蜱抗病原感染过程中扮演着重要的角色。mi RNA作为功能基因的重要调控因子,在MIF识别和清除病原方面发挥着重要作用。为进一步蜱传疾病的防控提供了新的策略。 展开更多
关键词 巨噬细胞游走抑制因子 MICRORNA 长角血蜱 东方泰勒虫 抗感染
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旋毛虫IFN-γ诱导的溶酶体硫醇还原酶对大鼠外周血单个核细胞功能的影响
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作者 储稳 廖书漪 +4 位作者 卡力比夏提·艾木拉江 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期176-182,共7页
为了研究旋毛虫(Trichinella spiralis)IFN-γ诱导的溶酶体硫醇还原酶(GILT)对体外大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的影响,将不同质量浓度的重组蛋白TsGILT(rTsGILT)与大鼠PBMCs体外共孵育后,用间接免疫荧光技术检测该蛋白与细胞... 为了研究旋毛虫(Trichinella spiralis)IFN-γ诱导的溶酶体硫醇还原酶(GILT)对体外大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)免疫功能的影响,将不同质量浓度的重组蛋白TsGILT(rTsGILT)与大鼠PBMCs体外共孵育后,用间接免疫荧光技术检测该蛋白与细胞之间的结合情况,并测定其对细胞增殖、迁移、凋亡、吞噬和NO分泌的影响。结果表明:rTsGILT可与大鼠PBMCs结合,可显著促进大鼠PBMCs的增殖、迁移、吞噬和NO的分泌(P<0.01),并呈现一定剂量依赖性;10、20μg/m L的rTsGILT对大鼠PBMCs的凋亡没有影响,40和80μg/m L的rTsGILT均能显著促进大鼠PBMCs的凋亡(P<0.001)。综上所述,旋毛虫GILT能通过多种途径影响宿主PBMCs发挥免疫作用,对宿主的免疫应答具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 旋毛虫 IFN-γ诱导的溶酶体硫醇还原酶 外周血单个核细胞 免疫功能
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“笑气”:让人欢喜让人忧——“笑气”的功过及其滥用问题的思考 被引量:1
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作者 陈超越 牟志刚 +4 位作者 庄严 宋肖锴 肖启振 杨廷海 刘维桥 《化学教育(中英文)》 CAS 北大核心 2021年第12期8-15,共8页
我国青少年"笑气"滥用问题日趋严峻,引发社会关注。介绍了"笑气"的简要历史、制备方法、结构与性质、重要应用、滥用原因及危害等,期望引导青少年全面了解"笑气",科学使用"笑气",提早构筑起心... 我国青少年"笑气"滥用问题日趋严峻,引发社会关注。介绍了"笑气"的简要历史、制备方法、结构与性质、重要应用、滥用原因及危害等,期望引导青少年全面了解"笑气",科学使用"笑气",提早构筑起心理防线,自觉抵制"笑气"滥用。 展开更多
关键词 笑气 一氧化二氮 结构与性质 重要应用 “笑气”滥用
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