基于Nanog信号通路探究miR-328对乳腺癌干细胞分化及间质转化的作用机制

目的 基于Nanog信号通路探究miR-328对乳腺癌干细胞分化及间质转化的作用机制。方法 选取秦皇岛市第四医院10例乳腺癌患者癌组织标本与10例癌旁组织标本进行研究。人乳腺癌干细胞分为乳腺癌组(乳腺癌干细胞)、NC组(乳腺癌转染miR-328-NC)、模拟物组(转染miR-328 mimics)、抑制物组(转染miR-328 siRNA)。运用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-328、E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、波形蛋白(Vimentin),检测细胞克隆形成情况,噻唑蓝(MTT)检测增殖,Transwell检测侵袭及迁移能力,Western印迹检测信号转导与转录活化因子(STAT)3、p-STAT3、肿瘤干性相关蛋白(Nanog)蛋白表达。结果 miR-328在乳腺癌组织中表达水平显著低于在癌旁组织(P<0.05)。乳腺癌组与NC组各指标间差异无统计学意义(P<0.05);与乳腺癌组相比,miR-328模拟物组miR-328表达、E-cadherin mRNA表达明显升高,N-cadherin及Vimentin mRNA表达、细胞增殖率、克隆形成率、STAT3、p-STAT3、Nanog、MUC-1蛋白表达、侵袭及迁移数量明显降低(P<0.05),miR-328抑制物组miR-328、E-cadherin表达明显降低,N-cadherin及Vimentin表达、细胞增殖率、克隆形成率、STAT3、p-STAT3、Nanog、MUC-1蛋白表达、侵袭及迁移数量明显升高(P<0.05),STAT3/Nanog抑制剂组与模拟物组以上指标水平差异无统计学意义(P>0.05),STAT3/Nanog激活剂组与抑制物组以上指标水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 上调miR-328通过可以抑制Nanog通路,诱导乳腺癌干细胞分化并抑制其上皮间质转化。

基于BIM技术的电力工程造价精细管控研究

伴随信息化技术在电力工程建设中应用的不断深入,BIM技术为电力工程造价的精细管控提供了新方法。本文探究BIM技术在电力工程造价管控中的应用价值,并以此为基础,梳理BIM模型的应用流程,从投资、设计、招投标、施工、竣工5个阶段分析BIM技术的具体应用功能,旨在为电力工程造价管控研究提供一定参考。

基于分子对接虚拟筛选铜绿假单胞菌胞外酶exoS抑制剂的研究

铜绿假单胞菌是引起宿主防御机制受损患者严重感染的重要原因。胞外酶S(exoS)为铜绿假单胞菌III型分泌系统(T3SS)分泌的毒力因子之一,是维持细菌在宿主体内繁殖的重要步骤。因此,本文首先运用虚拟筛选的方法学研究,确定exoS的6GNJ靶点蛋白为应用于分子对接虚拟筛选的最佳对接模型。随后利用分子对接、结构相似性筛选和类药性评价等多种策略,从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库中筛选出4个命中分子。分子对接显示MOL008550和MOL001870与exoS受体蛋白具有强氢键作用和疏水相互作用,表现出较高的结合亲和力,为前2位最佳命中分子。结合分子动力学模拟分析发现,MOL008550和MOL001870与exoS受体蛋白的复合物比参考化合物(F4W501)具有更有利的动态稳定性。结合自由能计算显示,MOL008550和MOL001870的结合自由能强于F4W501,且与exoS受体蛋白的作用方式和F4W501类似,主要为静电、疏水作用及范德华力促进两者间的结合,其可能对exoS表现出更高的抑制活性,为潜在的exoS靶向小分子抑制剂。虚拟筛选活性化合物并探究其与胞外酶S的互作模式及动力学稳定性,为开发新型的高效靶向exoS抑制剂提供了研究思路和物质参考。

海洋环境保护政策分析模型——以浙江为例

政策工具的选择和使用是政府综合治理海洋生态环境的主要手段之一,对实现海洋经济可持续发展具有重要意义。为审视浙江省海洋环境保护政策的合理性,选择2016-2022年浙江省出台的涉及海洋环境保护的政策文本为研究对象,利用Nvivo软件进行分析。研究发现:浙江省在海洋环境保护过程中出现了命令控制型政策工具使用过溢,市场激励型、信息公开型以及社会参与型政策工具使用不足的问题,且在控制阶段政策工具的搭配组合存在不合理现象。未来,浙江省应站在海洋环境可持续视角,着眼于政策效用调整政策工具的运用,充分发挥其协同作用以构建海洋环境保护的长效机制。

辽宁企业绿色技术创新机制及配套措施存在的问题及对策

党的二十大报告指出,我国应在未来发展中广泛形成绿色生产生活方式,碳排放达峰后稳中有降,生态环境根本好转,美丽中国目标基本实现。这样的背景下,企业如何解决因经济发展所带来的环境和资源困境便成为重中之重。辽宁企业绿色技术创新机制及配套措施存在着诸多问题,包括政府投入在总量、构成和效果不合理,政府资金的民间资本投入带动能力有限,对科技人才吸引力不足,支持企业绿色技术创新配套措施需要优化等。应采取增加财政投入,优化政府投入构成,提高资金使用效果,增强政府投入对民间资金的带动能力,加大人才引育力度,进一步完善绿色技术创新配套政策等方面的措施。

不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响

目的探究不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响。方法采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的小鼠随机分为对照组、冷消融低范围组、冷消融中范围组、冷消融全范围组,每组5只。冷消融组予以不同冷冻范围的冷消融手术,冷消融低范围组消融面积为肿瘤的50%~60%,中范围组为60%~90%,全范围组为100%;对照组予以假手术治疗。术后14日取外周血、脾脏及肿瘤组织。流式细胞仪检测肿瘤组织、脾脏中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞数量;Western blot法检测肿瘤组织中Foxp3蛋白表达情况;qRT-PCR检测肿瘤组织中Foxp3 mRNA表达;ELISA检测外周血中细胞因子白介素(IL)-2、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果与对照组相比,冷消融中范围组脾脏组织中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞比例降低(P<0.05),冷消融各组组间相比差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,冷消融全范围组肿瘤组织中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞比例降低(P<0.05),冷消融各组组间相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,冷消融各组Foxp3蛋白、mRNA表达低(P<0.05),中范围、全范围组低于低范围组(P<0.05),中范围组与全范围组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,冷消融各组外周血中IL-2水平均高(P<0.05),中范围组、全范围组均高于低范围组(P<0.05),全范围组低于中范围组(P<0.05)。与对照组相比,冷消融低范围组、中范围组、全范围组TGF⁃β水平均低(P<0.05),低范围组、全范围组均高于中范围组(P<0.05),全范围组高于低范围组和中范围组(P<0.05)。结论冷消融治疗不仅可直接引起肿瘤组织机械性损伤,而且可能通过抑制Tregs细胞表达抑制残余肿瘤的生长;冷消融范围60%~100%的效果优于冷消融低范围50%~60%。

暖温带北缘3种栎树径向生长对气候要素的响应差异及预测

[目的]比较同一气候区不同栎类树种生长对气候要素的响应差异,特别是在分布边缘不同树种的种内种间差别。[方法]利用树木年轮学方法,分析了我国暖温带北缘3种优势落叶栎树(蒙古栎、栓皮栎和麻栎)径向生长对气候要素的响应差异;同时利用混合线性效应模型构建了3个树种径向生长与气候的关系,并基于未来气候情景(RCP2.6和RCP8.5)预测了其未来生长趋势。[结果]同一地区栎类树种年表具有较高的相似性,而不同地区间差异较大;在径向生长对气候响应方面,同一地区的不同栎类树种和不同地区同一栎类树种也存在一定差别。其中北京地区的3种栎类树种的径向生长与当年6月气温呈负相关关系,但在辽宁仙人洞地区却与气温无显著相关关系;北京地区的麻栎、河北地区的蒙古栎、辽宁大黑山地区的栓皮栎的径向生长均受降水条件限制。模型预测显示,至本世纪末,北京地区和辽宁大黑山地区栎类树种的径向生长呈现下降趋势;而辽宁仙人洞地区栎类树种径向生长呈增加趋势。[结论]我国暖温带北缘不同地区的栎类树种对气候要素的响应存在显著差别,主要为取样地区的气候所支配,下一步尚需结合林分及立地因子,来厘清各类环境要素的相对贡献度。

新课标下小学音乐奥尔夫节奏训练的实践探索

2022年教育部颁布的《义务教育艺术课程标准》重构了小学音乐课程目标体系,同时优化了课程内容。相应地,奥尔夫节奏训练运用于小学音乐教学也必然产生应用创新与优化需求。基于奥尔夫节奏训练的概念与内涵,奥尔夫节奏训练在小学音乐教学中具有重要的意义。在小学音乐教学中应用奥尔夫节奏训练可通过节奏训练、情境游戏、乐器表达等,强化学生的音乐表演意识,促进创造力、实践力的发展和学生音乐综合素养的提升。

胡凯文运用柴胡桂枝干姜汤治疗恶性肿瘤寒热错杂证经验

柴胡桂枝干姜汤为《伤寒论》柴胡类方剂之一,其临床应用广泛,可治疗呼吸、消化、神经、泌尿、妇科等系统疾病,但在肿瘤方面的应用少见报道。胡凯文教授擅用经方治疗恶性肿瘤,形成了独特的辨证施治思路。胡教授认为,恶性肿瘤患者久病体虚,正气虚损、气机紊乱、寒热错杂、上热下寒是疾病发展的关键;治疗上当整体辨证与局部辨证相兼顾,攻邪与扶正相配合,辨证论治与辨病论治相结合,在厥阴病寒热错杂证的临证治疗上,疏解少阳、清上温下为其治疗总则;用药以柴胡桂枝干姜汤为基础方,秉承"尊其义不守其方,宗其法不泥于药"之原则,随症加减。

从温阳法论治肺结节经验

随着肺部CT的广泛应用,肺结节的检出率明显增高。目前肺结节的中医辨证、治则和方药尚未形成统一认识,但肺结节为有形之邪,其形成与机体和局部阴阳失调密切相关。胡凯文教授认为机体阳虚是肺结节形成的根本原因,局部水、湿、痰、瘀停滞是肺结节形成的直接原因,以温阳法治疗疗效显著。本文系统总结运用温阳法治疗肺结节的理论和实践经验,为肺结节的中医药治疗提供参考。

粒子群优化三维模型相似性评价

为了更好的度量三维CAD模型以实现面向设计领域的典型模型结构信息的智能重用,提出了基于粒子群算法优化的三维CAD模型典型结构挖掘和相似性评价方法。算法首先由组成模型各面的边的数目构造相似性评价矩阵,然后以此为描述体,通过粒子群算法搜索两模型的面最优匹配序列,最后根据搜索到的面最优序列提取并计算面相似度,进而对模型整体的相似度进行计算。通用ESB模型库实验结果表明,与已有算法相比,所提算法可以更准确地描述三维模型的典型结构相似性,有助于典型结构的准确挖掘和设计重用。

基于数据挖掘的中小微企业信贷评估决策研究

以中小微企业为研究对象,基于有信誉记录的中小微企业数据,通过K-means算法对企业的经济实力做聚类分析,构建风险系数衡量指标并进行回归分析,构建有信誉记录的信贷决策模型。基于无信誉记录的中小微企业数据,根据企业票据交易关系用聚类方法为企业分类,通过回归方程计算负票占有率、金额变动值和重复成交率之间的关系,对企业借贷能力进行评分,构建无信誉借贷决策模型,并在此模型基础上,通过回归方程对突发因素情况下企业有效利润进行计算,从而对企业借贷能力进行评分,构建突发因素无信誉借贷决策模型,为各类信贷机构的贷款策略提供参考。

北京市西城区儿童家长对EV71疫苗认知和接种意愿调查

目的了解北京市西城区儿童家长对肠道病毒71型(EV71)疫苗的认知情况和接种意愿,分析影响因素,为科学开展疫苗接种、预防手足口病提供依据。方法 2017年5—9月,在西城区预防接种门诊,使用统一设计的调查问卷,收集<3岁的儿童家长信息。采用单因素X^2检验与多因素Logistic回归对家长EV71疫苗认知和接种意愿影响因素进行分析。结果 1350名儿童家长中,31.56%的家长听说过EV71疫苗,25.11%的家长愿意给孩子接种EV71疫苗,拒绝接种的最主要原因是担心新疫苗的安全性。Logistic回归分析显示,大专及以上文化程度、独生子女家庭、既往有手足口病史儿童的家长对EV71疫苗知晓率高;大专及以上文化程度、独生子女家庭的家长更愿意给孩子接种EV71疫苗。听说过EV71疫苗的家长中,85.92%能接受的疫苗价格不超过200元,希望政府免费提供该疫苗接种的有67.61%。结论北京市西城区儿童家长对EV71疫苗知晓率和接种意愿均不高,需要适当加大相关疾病和疫苗知识的宣传力度。

基于MAPK/ERK信号通路探讨冷冻消融对肺癌小鼠的作用机制

目的:研究冷冻消融术对肺腺癌小鼠MAPK/ERK信号通路的调节作用。方法:采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的10只小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组5只,冷冻消融组小鼠选用双循环冷冻消融术,假手术组于移植瘤处切开缝合,术后14 d取肿瘤组织,通过Western blot检测冷冻消融对MAPK/ERK通路相关蛋白KRAS、RAF1、MEK1、ERK1/2、P-RAF1、P-MEK1、P-ERK1/2的影响,采用qRt-PCR进一步验证通路关键分子KRas基因表达情况。结果:与假手术组比,冷冻消融术后肿瘤组织中磷酸化蛋白P-RAF1、P-MEK1、P-ERK1/2降低(P<0.05),MAPK/ERK通路关键分子KRAS在蛋白和基因表达上均降低(P<0.05)。结论:冷冻消融可以通过下调KRAS表达,负向调控MAPK/ERK信号通路。

夜磨牙症的治疗进展

夜磨牙症是口腔常见病之一,对人类的咀嚼系统功能有严重的影响,危害患者的身心健康。夜磨牙病因复杂,发病机制尚未完全明确,目前还没有公认有效的治愈方法。本文就近年来有关夜磨牙症治疗的研究进展作一综述。

IgA肾病患者血浆FⅧ水平对不良预后的预测价值

目的分析血浆凝血因子VⅢ(FⅧ)对IgA肾病患者不良预后的预测价值。方法回顾性收集2017年4月至2018年5月就诊于沧州市中心医院的原发性IgAN患者共84例,收集所有研究对象的临床资料,包括一般情况(年龄、性别、病史、体质指数、血压)、24h尿蛋白量及血生化指标等,随后进行为期3年的随访。利用Spearman相关法分析血浆FⅧ水平与临床指标的相关性。采用单因素Cox回归分析建立模型并计算风险比值(HR),多因素Cox回归分析进行矫正,明确独立危险因素。采用ROC曲线分析检验不同指标的预测效能并进行比较。结果血浆FⅧ水平与年龄、eGFR下降速率、尿蛋白定量、收缩压、血肌酐、血浆纤维蛋白原、血总胆固醇、血三酰甘油、D-二聚体等指标均呈正相关;中位随访时间为38.19(36.32,40.56)个月,共10例患者(13.10%)发生不良预后。单因素Cox回归分析显示,FⅧ水平是IgAN患者发生不良预后的危险因素。进一步利用多因素Cox回归分析进行矫正,排除收缩压、尿蛋白、eGFR、间质纤维化/肾小管萎缩程度等因素后,血浆FⅧ水平仍是发生不良预后的独立危险因素,高FⅧ水平患者不良预后发生率是低FⅧ水平患者的4.241倍;ROC曲线分析结果显示血浆FⅧ水平的AUC高于血肌酐和收缩压,但低于肾小管萎缩/间质纤维化程度;通过联合预测分析,结果显示血浆FⅧ水平与上述指标联合均可有效提高预测效能,其中联合肾小管萎缩/间质纤维化程度的AUC最高。结论在IgAN患者中,血浆FⅧ水平与临床指标密切相关,且高FⅧ水平是发生不良预后的独立危险因素,通过联合病理检查结果能够及时有效预测患者预后,对指导临床干预具有积极意义。

玉米麸皮阿拉伯木聚糖咖啡酸酯的制备及其抗氧化活性

利用碱-H2O2法从玉米麸皮中提取出阿拉伯木聚糖(CAX),将咖啡酸(CA)通过酯键连接到CAX上得到阿拉伯木聚糖咖啡酸酯(CA-CAX),用红外,核磁氢谱、碳谱确定了结构,用高效液相色谱确定了CA的取代度,调整CA用量,得到不同取代度的CA-CAX-s(s表示取代度),并用高效凝胶渗透色谱测定不同取代度的分子量,CAX、CA-CAX-0.27、CA-CAX-0.51和CA-CAX-0.65的重均分子量分别为3.07×10^5、3.09×10^5、3.36×10^5和3.68×10^5 g/mol。通过紫外检测表明,CA-CAX-s在UVB具有较高的紫外吸收,而且CA-CAX-s水溶液的黏度明显增大,紫外吸收及黏度的大小均随CA含量的增加而增大。CA-CAX-0.27、CA-CAX-0.51和CA-CAX-0.65清除DPPH自由基的IC50分别为0.28、0.13和0.12 mg/m L。脂质过氧化物的检测CA-CAX-0.65用量为4 mg/mL时可以将丙二醛(MDA)的含量从120 ng/mL降低到最低值51.80 ng/mL。抗氧化能力指数(ORAC)测定结果表明改性后CA-CAX-s可将荧光消失的时间从13 min延长至60 min以上,ORAC值也从7上升至62.83。CA-CAX的抗氧化性较CAX有明显提高,而且咖啡酸含量越高CA-CAX-s的抗氧化性越好。

miR-194-5p靶向调节CD2AP参与大鼠肾病综合征的发展

目的探究微小RNA(miR)-194-5p通过靶向调节CD2相关蛋白(CD2AP)参与肾病综合征(NS)发展的机制。方法通过工具网站starbase预测miR-194-5p靶向CD2AP的潜在结合位点,然后通过荧光素酶报告验证。将大鼠分为3组(n=8):对照组、NS组和antagomir组,NS组和antagomir组通过静脉注射阿霉素建立NS模型。Antagomir组通过静脉注射miR-194-5p antagomir干预,其余两组注射等量溶剂。比较各组大鼠一般情况、24 h尿蛋白、肌酐水平。通过苏木精-伊红(HE)染色检测肾组织损伤情况。RT-PCR和Western blot检测CD2AP mRNA和蛋白的水平。结果通过双荧光霉素实验结果验证了同时转染miR-194-5p mimic和CD2AP-wt的细胞的荧光酶素活性显著降低(P<0.05)。过表达miR-194-5p显著抑制CD2AP mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。NS组大鼠在给药后出现精神萎靡、脱毛、活动力下降等现象,在第2周后开始大鼠出现浮肿,并有竖毛现象。Antagomir组大鼠在给予miR-194-5p antagomir后,各种症状均有所缓解。建模后,NS组和antagomir组大鼠24 h尿蛋白和肌酐水平显著高于对照组,干预后antagomir组的24 h尿蛋白和肌酐均显著降低,并显著低于NS组(P<0.05)。NS组肾小球硬化、毛细血管扩张以及肾小球系膜增厚,并可观察到肾小管空泡样变性以及蛋白管型;antagomir组的肾小球和肾小管基本正常,病变情况显著轻于NS组。与对照组比较,干预后NS组大鼠肾组织匀浆中的miR-194-5p显著升高而CD2AP mRNA和蛋白显著降低(P<0.05)。而antagomir组的miR-194-5p显著低于NS组,CD2AP mRNA和蛋白显著高于NS组(P<0.05)。结论 miR-194-5p靶向抑制CD2AP的表达并参与NS的发病机制,抑制miR-194-5p可促进CD2AP的表达水平,从而减轻NS肾损伤。

miR-328-5p通过调节自噬影响乳腺癌细胞对紫杉醇化疗敏感性的机制

目的探究miR-328-5p通过调节自噬影响乳腺癌细胞对紫杉醇(Taxol)化疗敏感性的作用机制。方法选取乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,根据目的不同分为miR-NC组(转染阴性对照)、miR-328-5p组(转染miR-328-5p mimics)、miR-NC+Taxol组和miR-328-5p+Taxol组,以及si-NC组(转染阴性对照)、si-整合素α5(ITGA5)组(转染si-ITGA5)、si-NC+Taxol组和si-ITGA5+Taxol组。采用qRT-PCR检测ITGA5 mRNA的表达水平,分别采用CCK-8实验、流式细胞术检测Taxol对各组乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率及凋亡情况,采用Western Blot方法检测各组ITGA5、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及p62蛋白的相对含量。结果miR-328-5p组miR-328-5p相对表达量较miR-NC组提高(P<0.01)。miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值低于miR-NC组,p62蛋白含量高于miR-NC组,且miR-328-5p+Taxol组上述指标低于或高于miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组(P<0.05)。miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组ITGA5 mRNA及蛋白表达均低于miR-NC组,且miR-328-5p+Taxol组低于miR-NC+Taxol组和miR-328-5p组(P<0.05)。si-ITGA5组、si-NC+Taxol组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值低于si-NC组,而p62蛋白含量高于si-NC组,且si-ITGA5+Taxol组上述指标低于或高于si-ITGA5组、si-NC+Taxol组(P<0.05)。不同Taxol浓度时,si-ITGA5+Taxol组细胞增殖抑制率及凋亡率均高于si-NC+Taxol组(P<0.05)。结论miR-328-5p可增强乳腺癌MCF-7细胞对Taxol的化疗敏感性,作用机制可能与miR-328-5p通过抑制ITGA5表达从而抑制细胞自噬相关。

上调miR-328-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的分析miR-328-5p在乳腺癌细胞系中的表达,并研究上调miR-328-5p表达对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法选取乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231及正常乳腺上皮细胞系MCF10A,分为miR-328-5p组(进行miR-328-5p转染)、转染对照组(转染miR-con)及空白对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组miR-328-5p表达情况,采用CCK-8实验及平板克隆形成实验检测miR-328-5p对各组细胞增殖能力的影响,采用细胞划痕实验检测miR-328-5p对各组细胞迁移能力的影响,采用Transwell体外细胞侵袭实验检测miR-328-5p对各组细胞侵袭能力的影响。结果乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231中miR-328-5p相对表达量均显著低于正常乳腺上皮细胞系MCF10A(P<0.05)。与转染对照组、空白对照组比较,miR-328-5p组MCF-7细胞增殖率、克隆形成率及细胞迁移、侵袭能力均明显降低(P<0.05),转染对照组与空白对照组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-328-5p在乳腺癌细胞中低表达,上调miR-328-5p表达可抑制乳腺癌细胞的增殖能力和减弱迁移、侵袭能力,或可成为临床治疗乳腺癌的新靶点。