基于氧化应激探讨参附注射液延缓ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用及机制

目的探讨参附注射液对高脂喂养Apo E^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响,从氧化应激角度探讨其抗动脉粥样硬化机制。方法 C57小鼠作为对照,高脂喂养Apo E^(-/-)小鼠20周后随机分为模型组、参附组,连续给药4周。测定小鼠血脂水平,ELISA法检测MPO、NOX4水平,羟胺法测定T-SOD活力,TBA法检测MDA水平;大体油红O及主动脉窦HE染色观察斑块形成;real time q PCR法检测Nrf2、Keap1 mRNA表达。结果与对照组比较,模型组TG、TC、LDL升高,HDL降低;血清SOD活性降低,MPO、NOX4和MDA含有量升高;主动脉Nrf2和Keap1 mRNA表达下调;较于与模型组比较,参附组血脂变化不明显,斑块面积减小;参附注射液干预后,抑制氧化应激水平,上调Nrf2和Keap1 mRNA表达。结论参附注射液通过激活Nrf2,干预相关酶类,进而抑制氧化应激水平抗动脉粥样硬化。

siRNA沉默NOK基因抑制脑胶质瘤U251细胞增殖与侵袭

目的:通过小干扰RNA(siRNA)沉默NOK基因的转录表达,研究NOK基因在人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡及侵袭中的调控作用。方法:合成NOK siRNA(si-578和si-996),脂质体转染U251细胞,qRT-PCR、Western blot检测其对NOK基因转录及表达的抑制效果,MTS法及平板克隆形成实验研究其对细胞增殖的影响,Transwell试验检测细胞迁移能力,Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测细胞凋亡,Western blot检测Cyclin D1及AKT的蛋白表达。结果:si-578和si-996可显著降低NOK基因转录和表达(P<0.05)。抑制U251细胞NOK基因表达,可显著抑制细胞增殖和侵袭(P<0.05),凋亡细胞数量明显增加(P<0.05),G1期U251细胞数量显著增加(P<0.05),S期细胞明显减少(P<0.05),Cyclin D1表达和AKT磷酸化水平明显降低。结论:NOK在脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭和凋亡过程中发挥重要调节作用。

周细胞在相关疾病中的研究进展

周细胞是类似于血管平滑肌细胞的一类细胞,因定位于毛细血管及微血管基膜周围而得名。周细胞最初被证明与血管收缩,调控局部微血管的血流量有关。近年来,其调控血管生成及促进血管成熟等功能被陆续认知,多种微血管病变伴随着周细胞结构及功能的异常,因此,周细胞的调控受到广泛关注,但许多机制仍未阐明。文章主要对周细胞在脑神经病变、心血管疾病、糖尿病血管改变及肿瘤等微血管疾病中的作用进行综述。

非小细胞肺癌组织FOXM1基因表达和突变情况及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中FOXM1基因表达和突变情况及其临床意义。方法收集我院2014年-2016年的非小细胞肺癌手术切除病例的石蜡标本,采用免疫组织化学方法检测59例肺癌组织中FOXM1蛋白的表达水平,对其中的21例患者采用高通量测序方法检测肺癌组织中基因突变情况,收集病人的临床病例资料,分析FOXM1蛋白的表达水平和突变与病人临床病理例特征之间的相关关系。结果本组共收集非小细胞肺癌病例59个,男性45例,女性14例。在所有患者中FOXM1高表达病例29例,占49.2%;低表达30例,占50.8%;在FOXM1高表达患者中,20例分化程度低,占69.0%;低表达患者中12例分化程度低,占40%,有显著性差异(P<0.05);镜下见脉管内浸润患者,高表达组为9例,低表达组为3例,差异有统计学意义(P<0.05);21例病人中,有13例检测到FOXM1基因突变,其中9例肺癌标本检测到exon8:c.T1882C:p.S628P突变,其存在率达42.86%(9/21),远高于正常人群(<1%)。结论 FOXM1蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平升高,并与肿瘤的低分化程度和脉管内侵袭相关,非小细胞肺癌组织中FOXM1突变率显著升高,可能与肺癌发病存在高度相关性。

溶剂法提取长白山野生红松子油的工艺优化

对溶剂法提取长白山野生红松子油的工艺进行了优化。选取乙醚、氯仿、正己烷、甲醇、丙酮、异丙醇、乙醇、二氯甲烷和乙酸乙酯作为提取溶剂,观察其对松子油的提取率。结果显示:乙醚、氯仿和正己烷3种溶剂的提取率显著高于其他溶剂(P<0.05),结合生产成本等因素确定正己烷为松子油的提取溶剂。通过单因素试验和响应面优化试验确定了最佳松子油提取工艺:提取温度45℃、提取时间55 min和料液比1∶20(g/m L)。在此条件下,松子油的提取率为90.5%。

基于“肠道菌群-炎症”通路探讨丹蒌片防治ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的作用及机制

目的观察丹蒌片对高脂喂养动脉粥样硬化模型ApoE^-/-小鼠的影响,从菌群失调诱发炎症角度探讨丹蒌片抗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用C57BL/6J野生型小鼠作为对照,高脂喂养ApoE^-/-小鼠24周后随机分为模型组、丹蒌片组,连续ig给药8周后取血测定血脂水平;ELISA法检测血清中脂多糖(LPS)水平;动脉大体油红O及主动脉窦HE染色观察斑块形成;粪便16 SrRNA扩增子测序检测肠道菌群;GC-MS法检测短链脂肪酸;实时荧光定量PCR法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠血脂水平升高,肠道菌群失调,有害菌增加,有益菌减少,血清LPS水平升高,主动脉周围炎症水平升高;与模型组比较,丹蒌片干预可明显降低小鼠总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平(P<0.01),有效减少斑块面积;调节肠道菌群,进而降低血清LPS及主动脉周围炎症因子TNF-α、ICAM-1和IL-1β水平(P<0.01)。结论丹蒌片通过改善菌群结构,降低菌群失调诱发的炎症反应发挥抗动脉粥样硬化作用。

补阳还五汤干预缺氧预适应成纤维细胞促间充质干细胞迁移的机制

目的：探讨补阳还五汤干预缺氧预适应心脏成纤维细胞促间充质干细胞迁移的相关机制。方法：以6.5,13,26 g·kg^-1补阳还五汤和等量蒸馏水连续灌胃SD大鼠7 d后,制备补阳还五汤含药血清及空白血清。0.56,1.12,2.25 g·m L^-1含药血清干预缺氧预适应的心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）24 h后,酶联免疫吸附测定（ELISA）,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测CFs培养液中缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）,单核细胞趋化因子-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）及肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）的含量,mRNA及蛋白表达情况,并将补阳还五汤干预缺氧预适应CFs的培养液干预间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）后,检测MSC的细胞迁移能力。结果：与常氧组比较,缺氧可以显著促进CFs分泌HIF-1α,MCP-1及HGF（P〈0.01）,同时给予缺氧预处理的CFs培养液干预MSC后,HIF-1α,MCP-1及HGF的水平亦显著升高（P〈0.01）,当给予不同剂量的补阳还五汤含药血清干预后,与缺氧组比较,它们的表达进一步升高（P〈0.05,P〈0.01）;而给予HIF-1α抑制剂YC-1处理后,补阳还五汤各组可升高MCP-1,HGF的表达（P〈0.05）。结论：补阳还五汤协同缺氧预适应CFs旁分泌效应能够促进MSC迁移,其可能机制是通过上调HIF-1α的表达,提高迁移因子MCP-1,HGF的表达而实现的。

补阳还五汤及其组分治疗阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种起病隐匿的神经系统退行性疾病,其病因病机复杂,主要以胆碱能神经元损伤及神经突触缺失为病理改变,长期以来单一致病因素作为治疗靶点的研究收效欠佳。中医复方因其具有多通路多靶点干预的优势,在防治AD方面有显著效果。益气活血代表方-补阳还五汤广泛应用于脑血管疾病,对保护神经元、修复血脑屏障降低通透性对抗脑水肿、抵御血管内皮细胞损伤、促进新血管生成和成熟等方面具有显著的疗效。因其对大脑多方面强大的治疗作用,大量学者研究发现补阳还五汤对改善认知功能损伤疗效显著,且不同的组分通过不同的机制发挥改善认知损伤的治疗效果。但不同研究所侧重的作用机制相对单一,不利于全面认知其作用机制和干预靶点。文章总结近年相关文献从补阳还五汤及其组分降低β淀粉样前体蛋白(APP)表达减少β样淀粉蛋白沉积、抑制中枢神经系统炎症信号通路减少炎症因子释放、抑制神经元凋亡因子表达保护神经元、修复血脑屏障减少有害物质进入中枢神经系统、提高低密度脂蛋白相关受体(LRP)-1含量,降低晚期糖基化受体(RAGE)表达增加β淀粉样蛋白外周清除等方面阐述其保护神经元、改善学习及认知功能障碍的机制,以期为补阳还五汤治疗阿尔茨海默病提供有力的文献支持。

中药基于PI3K/Akt信号通路防治心肌缺血/再灌注损伤的研究进展

心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)是导致缺血性心脏病患者行经皮冠状动脉介入治疗后病死率仍居高不下的首要原因。中药防治MIRI的临床效果已经得到广泛肯定。近期研究发现,PI3K/Akt是防治MIRI的关键信号通路。文章将基于PI3K/Akt信号通路就近年来中药防治MIRI的分子机制进行综述,以期为临床防治MIRI提供进一步的实验依据。

外周血TLR9基因多态性与成人EB病毒感染易感性

目的探讨外周血Toll样受体9(TLR9)基因多态性与成人EB病毒(EBV)感染风险及免疫功能的关系。方法选择南京医科大学附属常州市第二人民医院2018年1月-2020年1月收治的EB病毒感染患者120例为研究组,选择同期医院进行体检的健康人70名为对照组。针对TLR9基因1486T/C设计特异性引物,采用高分辨率熔解曲线法(HRM)检测基因分型。采用流式细胞仪对EB病毒感染患者外周血中CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/D_(8)^(+)、NK细胞、B细胞占比进行检测。结果120例EBV感染阳性患者以传染性单核细胞增多症为主,共85例,占70.83%,其次是噬血细胞综合征、恶性肿瘤和恶性血液病,分别占10.00%、8.33%、6.67%。研究组TLR9基因1486T/C位点TT基因型、T等位基因频率(24.17%、47.50%)低于对照组(P<0.05)。TLR9-1486T/C位点TC/CC型患者CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/D_(8)^(+)、NK细胞、B细胞水平(27.10±2.58%、1.65±0.19、0.31±0.07%、0.41±0.08%)低于TT型患者;TLR9-1486T/C位点不同基因型疾病类型比较差异无统计学意义;多元Logistic回归分析结果显示,TLR9TC/CC基因型、TLR9C等位基因是成人EB病毒感染的独立危险因素(P<0.05)。结论TLR9基因1486T/C位点TC、CC基因型增加本地区人群对EBV的易感性,但与疾病种类无关。

Roles of Gut Microbiota in Pathogenesis of Alzheimer's Disease and Therapeutic Effects of Chinese Medicine

Alzheimer’s disease(AD)is the most common neurodegenerative disease characterized by progressive cognitive impairment.The pathogenesis of AD is complex,and its susceptibility and development process are affected by age,genetic and epigenetic factors.Recent studies confirmed that gut microbiota(GM)might contribute to AD through a variety of pathways including hypothalamic pituitary adrenal axis and inflammatory and immune processes.CM formula,herbs,and monomer enjoy unique advantages to treat and prevent AD.Hence,the purpose of this review is to outline the roles of GM and its core metabolites in the pathogenesis of AD.Research progress of CMs regarding the mechanisms of how they regulate GM to improve cognitive impairment of AD is also reviewed.The authors tried to explore new therapeutic strategies to AD based on the regulation of GM using CM.