三种蛋白诊断结核分枝杆菌感染的价值研究

目的:探讨Krüppel样转录因子2(krüppel-like transcription factor 2,KLF2)、鸟苷酸结合蛋白5(guanylate-binding protein 5,GBP5)、双特异性磷酸酶3(dual specificity phosphatase 3,DUSP3)等3种蛋白及其不同组合对于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的诊断价值。方法:选取2023年1—3月首都医科大学附属北京胸科医院就诊患者和同期进行健康体检的人群作为研究对象,根据结核病诊断标准将研究对象分为活动性结核病(ATB)组(145例)、结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)组(145例)、健康对照(HC)组(200名)。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测研究对象血清中KLF2、GBP5、DUSP3蛋白水平[450 nm波长吸光度值;中位数(四分位数)],采用受试者工作特征曲线分析各蛋白单独或联合诊断MTB感染的价值。结果:KLF2在HC组的蛋白水平为0.317(0.198,0.496),明显高于ATB组的0.234(0.160,0.297)及LTBI组的0.224(0.145,0.320),差异均有统计学意义(P<0.001)。GBP5在ATB组的蛋白水平为0.327(0.259,0.402),明显高于LTBI组的0.196(0.150,0.273)及HC组的0.180(0.125,0.281),差异均有统计学意义(P<0.001)。DUSP3在ATB组的蛋白水平为0.329(0.223,0.458),明显高于LTBI组的0.213(0.160,0.248)及HC组的0.196(0.132,0.297),差异均有统计学意义(P<0.001)。GBP5与DUSP3双蛋白组合区分ATB和LTBI的诊断效能[曲线下面积(AUC)为0.800]优于KLF2(AUC为0.534)、GBP5(AUC为0.761)、DUSP3(AUC为0.720)等单一蛋白及其不同组合的诊断效能,最大约登指数下的敏感度为73.79%,特异度为75.86%;GBP5、DUSP3双蛋白组合区分ATB和HC的诊断效能(AUC为0.781)优于KLF2(AUC为0.629)、GBP5(AUC为0.740)、DUSP3(AUC为0.716)等单一蛋白及其不同组合的诊断效能,最大约登指数下的敏感度为77.93%,特异度为71.50%;三种蛋白及其不同组合区分LTBI与HC的诊断效能较差,其AUC均小于0.700。结论:研发基于蛋白水平的MTB感染免疫检测方法存在可能性,蛋白联和应用可提高诊断效能。

铆钉镀层对单边摩擦铆焊接头成形及力学性能的影响

铆钉镀层是影响铆接接头成形及力学性能的重要因素,采用单边摩擦铆焊(SSFR)工艺连接6005A-T6和6A01-T5铝合金板材,研究了无镀层、Zn镀层、ZnNi镀层三种类型铆钉对应的SSFR接头成形过程铆接力、能量输入及接头宏微观成形的演化规律,分析了接头中不同位置的镀层剩余厚度及铆钉/板材界面的元素扩散,探究了铆钉镀层对接头拉剪和十字拉伸性能的影响。研究结果表明,镀层的引入降低了铆钉旋转产生的能量输入,从而使铝合金材料的热影响区减小,但能量输入的降低不利于铆钉空腔内铝合金材料间固相连接的形成,导致接头的拉剪和十字拉伸性能下降。与Zn镀层相比,ZnNi镀层的耐磨性较强,在铆钉高速旋转的搅拌摩擦作用下镀层剩余厚度仍超过40%,有助于提高接头的抗腐蚀性能。

我国结核病体外诊断科技成果创新转化现状分析

明确的诊断对结核病的治疗和预防至关重要。早期准确诊断是结核病患者得以及时治疗的关键,提高诊断技术则是发现患者的核心。结核病体外诊断(In Vitro diagnostic,IVD)行业市场广阔,临床需求旺盛。目前,结核病的IVD的基础研发不能很好的满足临床需求,诊断相关专利技术成果储备有限,技术攻关仍在继续;在用的诊断产品还有各种缺点,难以覆盖全部的临床需求。结核病领域体外诊断科技成果快速高效地转化应用到临床需要针对技术成果化、成果产品化、产品商业化整个流程提供全方位的服务,助力IVD产业快速发展,提升结核病的防控能力。

郑州建设国际航空物流中心的推进策略

国际航空物流中心是一个国家或地区内提供国际物流服务且具有一定集散功能的物流活动的场所。国家支持郑州航空港经济综合实验区建设国际航空物流中心,旨在将其打造成为服务"一带一路"建设的现代综合交通枢纽。在国家的大力支持下,郑州国际航空物流中心建设已取得显著成效,但在宏观、中观、微观三个层面上依然存在诸多障碍和困难。因此,我们需要在枢纽机场、多式联运、空港物流园等方面采取有效措施,从而加快推进郑州国际航空物流中心建设。

空间视角下创新效率对经济增长收敛性的影响

创新是带动经济发展的核心动力,创新能力的差异是造成区域经济差距的重要原因之一。基于2000~2016年的省际面板数据,采用空间面板模型研究了创新效率及空间效应对我国经济增长收敛性的影响。结果发现:我国创新效率偏低,纯技术效率不高是制约我国创新效率提升的关键原因。我国创新效率有明显的空间相关性,一个地区创新效率的变化并不是由该地区内部因素决定的,还会受到来自相邻地区的影响。创新效率及空间效应的提升可以缩小我国区域经济差距,使区域经济呈现收敛性,且随时间的推移收敛性不断增强。

住院肺结核患者体重与口服异烟肼剂量的关系

目的分析初治肺结核患者体重变化与口服异烟肼剂量的关系,探讨异烟肼使用剂量的合理性。方法采取回顾性调查分析法,收集1955年5月至2012年12月北京胸科医院住院的初治肺结核患者,排除老年性肺结核、耐药肺结核、肺外结核病和各种合并症及并发症患者。选取时间段分为20世纪50.60年代、70年代、80年代、90年代及21世纪2000年代和2010年代;50-60年代和70年代每年每月抽取部分病例,80年代以后每隔5年抽取1年的部分病例,分别统计各时间段纳入患者的性别、年龄、体重和治疗方案中每天应用异烟肼的剂量,比较不同年代住院肺结核患者体重变化趋势与所服异烟肼剂量的变化。共纳入病例1398例,其中男924例,女474例,年龄18~65岁,平均(36.7±14.4)岁。本研究中不符合正态分布的数据采用秩和检验,检验水准P<0.05.两两比较单样本采用Kolmogorov-Smirnov非参数检验,检验水准α=0.003.结果2000年代与50.60年代、70年代和80年代比较,患者体重分别增加了3、3.5和3kg,差异有统计学意义(均P<0.003);21世纪2010年代与20世纪70年代比较,患者体重平均增加了1.5kg,差异也有统计学意义(P=0.002),而异烟肼治疗的剂量无论体重大小始终未变.90年代、2000年代及2010年代后每公斤体重异烟肼的剂量随着患者体重的增加而逐渐减少了0.0054、0.0052及0.0054g,且差异有统计学意义(均P<0.001).结论近60年来,住院肺结核患者的体重呈现逐渐上升趋势,其中体重与异烟肼药物剂量密切相关,无论体重大小常规使用异烟0.3g/d的治疗剂量可能存在血药浓度较低的现象。为防止异烟肼耐药,提高肺结核的治愈率,应根据患者体重的变化适当合理提高异烟肼的治疗剂量。

《中国人力资源开发》2016-2020年载文计量分析与研究

采用文献计量方法对2016-2020年《中国人力资源开发》的载文量、信息密度、社会认可度情况、载文学科、影响因子、作者及机构、关键词词频进行统计分析,结果发现,这些期刊呈现出影响力不断提升、期刊研究热点不断增加、期刊载文质量逐年上升、期刊作者群有待扩充等特征,为更多从事人力资源开发研究的作者和读者确立研究方向和明晰发展趋势提供帮助。

全民国防教育主体数字化能力提升研究

在明确国防教育对象和主体的基础上,分析了国防教育主体数字化的环境、能力、功能和约束,从数据获取能力、数字化学习能力、数字化管理能力、数字化应用能力、数字化决策能力、数字化前瞻能力等六个方面分析了国防教育主体数字化能力的建构机制,从智能化人机协同、嵌入式情景学习、微能力综合渗透、人本化共享创新、流程化团队合作、创新性赋能设计分析了国防教育主体数字化能力的提升路径,从政策支持、资源配置、组织保障、行为规范四个方面提出了国防教育主体数字能力的发展策略。

河南省创新创业载体升级的发展对策

2014—2018年,河南省实现了孵化载体全覆盖,孵化全链条初步形成,孵化服务提质升级,创新创业主体日益活跃,带动多元化投资主体,营造良好创新创业氛围,具备了双创升级的基础。河南省双创载体升级就是按照高站位、高质量、高标准、高效率的目标,全方位推进、全过程融合、全要素集聚,推动“双创”向更大范围、更高层次、更深程度发展。面对“双创”载体的成就与不足,河南省应尽快打造创新人才管理平台、创业信息连通平台、基础设施共享信息平台、专业化创新服务平台等五大平台。

新一代微测序基因芯片的设计及其耐药性检测效果的初步研究

目的设计和评价微测序基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法于北京结核病临床数据和样本资源库选取MTB实验室标准菌株(H37Rv)和109株MTB临床分离株,采用绝对浓度法进行表型药物敏感性试验(简称“表型药敏试验”)和基因测序法检测MTB耐药相关基因突变(包括inhA、katG、rpsL、gyrA、rrs、eis、rpoB和embB基因)。以荧光标记探针为基本检测原理设计制备微测序基因芯片,检测109株MTB临床分离株耐药基因突变,分析微测序基因芯片的检测效能。结果通过表型药敏试验及基因测序检测,明确了109株MTB临床分离株耐药相关基因(inhA、katG、rpsL、gyrA.rrs、eis、rpoB和embB基因)突变位点及突变形式。微测序耐药检测基因芯片初期设计包含了katG、inhA、rpoB、gyrA、embB、rpsL、rrs和eis基因的目前已报道的所有突变位点的全部已知突变形式,共计220条探针,并确认出67条优秀探针。采用包含67条探针的微测序耐药检测基因芯片对109株MTB临床分离株进行检测。结果发现,与测序结果相比,除检测embB基因突变的2条探针外,其余65条探针检测碱基突变形式的符合率均超过95%,其中42条探针检测的符合率达到100.00%。以测序结果为参照标准,基因芯片检测对embB基因、gyrA基因、inhA基因、katG基因、rpoB基因、rpsL基因、eis基因和rrs基因突变检测的敏感度分别为64.21%(61/95)、80.00%(8/10)、95.83%(23/24)、98.55%(68/69)、92.63%(88/95)、93.85%(61/65)、75.00%(3/4)和94.44%(17/18);特异度分别为92.86%(13/14)、100.00%(99/99)、97.65%(83/85)、87.50%(35/40)、85.71%(12/14)、63.64%(28/44).100.00%(105/105)和98.90%(90/91);Kappa值分别为0.29、0.88、0.92、0.88、0.68、0.60、0.85、0.93。结论本研究研发设计了一套包含67条探针微测序耐药基因检测芯片,经过初步验证后证明其检测MTB耐药相关基因突变的效能较好,对embB基因的耐药检测探针还需进一步优化,使之更好的满足临床需求。

结核分枝杆菌膜囊泡的分离及其对细胞因子释放的作用

目的分离体外培养的结核分枝杆菌分泌的膜囊泡，检测其形态和粒径分布，初步探索结核分枝杆菌膜囊泡对巨噬细胞中细胞因子释放的作用。方法采用结核分枝杆菌实验室标准菌株H37Rv，通过7H9培养基复苏、扩大培养标准株H37Rv至对数生长期，菌体全部接种于苏通培养基中继续培养3周，离心取上清，超滤浓缩结合超速离心分离提取结核分枝杆菌H37Rv膜囊泡，通过透射电镜观察膜囊泡的大小、形态，采用纳米颗粒跟踪仪分析膜囊泡的粒径及分布。同时，设置不处理对照组、H37Rv感染组[按照感染复数（ multiplcty ofinfection, MOI ）=20：1]和H37Rv膜囊泡处理组（按照膜囊泡=细胞=100：1）处理佛波酯（50mg/ml）诱导贴壁的单核巨噬细胞（THP-1）4h，更换新鲜培养基后0h、4h、8h、24h收集细胞培养上清，采用Milliples多细胞因子检测试剂盒检测细胞因子的释放情况，通过曼-惠特尼U（mann-Whimey U）检验对各时间点H37Rv膜囊泡处理组和不处理对照组之间肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）释放量进行比较，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果按照调整后的提取方法得到的提取物中可检测到H37RV分泌的膜囊泡，平均粒径为137nm，主要分布在30—510nm之间，〈250nm的膜囊泡数量占总量的96．88％。4h、8h和24h的TNF-α、IL-6和IL-1β释放量与不处理对照组[分别为348．19（333．99，360．47）pg/ml、412．38（406．67，418．79）pg/ml、324．44（316．11，331．14）pg/ml；3．01（2．81，302）pg/ml、5．40（5．26，5．83）pg／ml、13．22（11．80，13．77）pg／ml；118．92（113．97，122．47）pg/m、132．33（125．87，137．62）pg/m、169-31（167．75，172．49）pg／ml]相比，H37Rv膜囊泡处理组[分别为507．33（501．80，513．84）pg/ml、4483．00（4130．75，4522．50）pg/ml、8170．00（8058．25，8206．75）pg／ml；12．88（12．04，13．84）pg／ml、68．51（66．88，69．77）pg／ml、335．44（33102，340．64）pg/ml；800．57（791．18，809．60）pg／m1、1559．00（1546．00，1566．00）pg/ml、4316．50（4094．75，4389．75）pg/ml]均明显增加，差异均有统计学意义（U值均〈0．001，P值均〈0．01）；但4h、8h和24h的IL-10释放量[不处理对照组分别为1．23（1．21，1131）pg/ml、1．56（1.31，1．82）pg／ml、5．41（4．99，5．89）pg／ml；H37RV膜囊泡处理组分别为4．56449，4．82）pg／ml、1.43（1．28，1．89）pg/ml、1．56（1．48，1．68）pg/ml]差异均无统计学意义（u值分别为6．00、17．00、7．00，P值分别为0．065、0．898和0．087）。结论本研究建立了结核分枝杆菌膜囊泡分离提取的技术流程，可以得到纯度较好、形态完整、粒径正常的膜囊泡。同时，结核分枝杆菌膜囊泡可以诱发巨噬细胞中细胞因子TNF—α、IL-6和IL—β的释放。

适用于结核分枝杆菌微测序耐药基因芯片的多重PCR体系的优化与评价

目的优化结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系并评估其优缺点。方法利用改进的方法提取结核分枝杆菌基因组DNA,优化适合扩增rpoB,katG,mab4/inhA,pncA,embB,gyrA,rpsL,rrs和eis耐药基因片段的多重PCR体系,经测序确定所扩增出的基因片段,计算PCR操作过程所用的时间和材料成本等,分析多重PCR反应体系存在的优缺点。结果经过优化煺火温度、引物浓度以及添加NH*和二甲基亚砜可以较好的扩增出5重和4重PCR产物,达到两管同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因的目的。利用该条件可以扩增出全部培养出的135株菌株DNA样本和80.56%的痰菌DNA样本,并且可以缩短PCR操作时间、降低试剂耗材成本,减少操作失误。结论优化的两管多重PCR法在同时扩增9个结核分枝杆菌耐药相关基因,具有明显的优势,具有良好的实用价值。

4种化学物质对HaCaT细胞氧化应激相关基因表达的影响

目的:探讨过氧化氢、姜黄素、槲皮素及叔丁基对苯二酚对84种氧化应激相关基因表达的影响。方法:取对数生长期的HaCaT细胞,采用不同浓度的过氧化氢、姜黄素、槲皮素及叔丁基对苯二酚,用四甲基噻唑蓝(MTT)法评价受试物的细胞毒性。将不同浓度的过氧化氢(0.5和1.25 mmol/L)、姜黄素(5和20μmol/L)、槲皮素(200和500μmol/L)及叔丁基对苯二酚(10和50μmol/L)分别处理HaCaT细胞4 h及24 h后,提取RNA,对RNA质量进行评价,然后采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测HaCaT细胞中84种氧化应激相关基因的表达水平。结果:MTT试验显示,过氧化氢、姜黄素和叔丁基对苯二酚浓度分别在>1 mmol/L、>10μmol/L和>50μmol/L时,HaCaT细胞的存活率在80%以下;而槲皮素在浓度为1000μmol/L仍未显示出明显的细胞毒性。qPCR结果显示,上述4种化学物质在不同浓度不同时间对HaCaT细胞氧化应激相关基因的表达有一定的影响。过氧化氢1.25 mmol/L作用4 h能引起HMOX1、SPINK1等基因表达上调而1.25 mmol/L作用24 h时CCL5表达下调;姜黄素20μmol/L作用4 h能引起HMOX1、ALB等基因表达上调以及GSR等基因表达下调;槲皮素500μmol/L作用4 h能引起ALB、HMOX1等基因表达上调以及SEPP1等基因表达下调;叔丁基对苯二酚10μmol/L作用4 h能引起基因EPX、HMOX1等基因表达上调,而10μmol/L作用24 h时AOX1等基因表达下调。结论:过氧化氢、槲皮素、姜黄素及叔丁基对苯二酚,这4种化学物质均可引起氧化应激相关基因发生改变,均能引起基因HMOX1表达上调,而且高浓度的化学物质引起的基因表达变化高于低剂量,为抗氧化剂的添加提供了一定的理论依据。

区域数字经济与人口发展的耦合协调性空间差异研究

基于2016—2021年中部地区六省81个省辖市的数据,运用耦合协调度模型、Dagum基尼系数、Moran指数,揭示人口发展水平与数字经济耦合协调度的时序走势与空间差异特征。研究发现:中部地区的人口发展水平与数字经济的耦合协调度逐年递增,已经达到高度耦合协调类型。省会城市和非省会城市的人口发展与数字经济耦合协调度差异明显,省会城市远远领先于非省会城市。人口发展水平与数字经济耦合协调度的总体差异逐年减小,呈现一定的空间相关性,但空间相关性有变弱的趋势,河南与湖南存在着显著的空间溢出效应,安徽和湖北具有某种程度的集聚现象,山西和江西属于点状离散分布。

基于CT图像的影像组学特征鉴别肾透明细胞癌与血管平滑肌脂肪瘤

目的基于CT图像的影像组学特征分析鉴别肾透明细胞癌和血管平滑肌脂肪瘤。方法选取经手术病理证实的110例透明细胞癌患者及28例血管平滑肌脂肪瘤患者的术前增强CT扫描图像,采用ITK-SNAP软件逐层手工勾画整个病灶,通过Pyradiomcs软件获得病灶内影像组学特征进行统计学分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线筛选出对鉴别两者性能较好的特征参数。结果共筛选出29组诊断性能较好的参数,包括一阶特征(n=16)、形态特征(n=1)、灰度共生矩阵特征(n=7),灰度相关矩阵特征(n=2),灰度运行长度矩阵特征(n=3),其诊断两者的特异性、敏感度、准确率均较高。结论基于增强CT图像的影像组学特征参数对于鉴别肾透明细胞癌和血管平滑肌脂肪瘤有较好的诊断效能。

住院肺结核患者体重与口服异烟肼剂量的关系

目的分析初治肺结核患者体重变化与口服异烟肼剂量的关系，探讨异烟肼使用剂量的合理性。方法采取回顾性调查分析法，收集1955年5月至2012年12月北京胸科医院住院的初治肺结核患者，排除老年性肺结核、耐药肺结核、肺外结核病和各种合并症及并发症患者。选取时间段分为20世纪50—60年代、70年代、80年代、90年代及21世纪2000年代和2010年代；50—60年代和70年代每年每月抽取部分病例，80年代以后每隔5年抽取1年的部分病例，分别统计各时间段纳入患者的性别、年龄、体重和治疗方案中每天应用异烟肼的剂量，比较不同年代住院肺结核患者体重变化趋势与所服异烟肼剂量的变化。共纳入病例1 398例，其中男924例，女474例，年龄18～65岁，平均（36.7±14.4）岁。本研究中不符合正态分布的数据采用秩和检验，检验水准P〈0.05。两两比较单样本采用Kolmogorov－Smirnov非参数检验，检验水准α＝0.003。结果2000年代与50—60年代、70年代和80年代比较，患者体重分别增加了3、3.5和3 kg，差异有统计学意义（均P〈0.003）；21世纪2010年代与20世纪70年代比较，患者体重平均增加了1.5 kg，差异也有统计学意义（P＝0.002），而异烟肼治疗的剂量无论体重大小始终未变。90年代、2000年代及2010年代后每公斤体重异烟肼的剂量随着患者体重的增加而逐渐减少了0.005 4、0.005 2及0.005 4 g，且差异有统计学意义（均P〈0.001）。结论近60年来，住院肺结核患者的体重呈现逐渐上升趋势，其中体重与异烟肼药物剂量密切相关，无论体重大小常规使用异烟肼0.3 g/d的治疗剂量可能存在血药浓度较低的现象。为防止异烟肼耐药，提高肺结核的治愈率，应根据患者体重的变化适当合理提高异烟肼的治疗剂量。

Prokaryotic expression, localization and function of the infectious laryngotracheitis virus glycoprotein G

The infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G (gG) gene of E3 and Zhonghai strains was cloned, sequenced and compared with the gG gene of other Type I animal herpesviruses. To find the localization and the function of the gG in the infected cells, the 35 kD fusion pro-tein (His-GG) was expressed by inserting the coding region of gG except for the signal peptide into pET30a (+). After puri-fication of the His-GG fusion protein, the rats’ antibody to the His-GG was prepared and purified by using the protein G Sepharose. Results of laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that the ILTV gG was in the peri-nuclear region and membrane of chicken embryo liver (CEL) and kidney (CEK) cells, and that the gG accumulated more in the coalescent part than in the other parts of the adjacent CEL or CEK cells. The plaque size and the one-step growth curve tests suggested that the ILTV gG was required for viral growth by cell-to-cell direct infection in tissue-cultured CEL cells.