端粒酶hTERT在非小细胞肺癌的表达

目的 探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中端粒酶逆转录酶 (hTERT)表达的分布及其和端粒酶活性表达的关系。方法 35例原发性非小细胞肺癌和 10例正常肺组织冰冻切片经抗hTERT抗体免疫组化染色 ,观察hTERT表达的分布。同时测定标本的端粒酶活性 ,分析两者的相关性。结果 35例肿瘤标本中 ,用免疫组化分析hTERT表达呈阳性2 7例 ,镜下观察阳性信号为棕黄色颗粒 ,主要分布于癌细胞的细胞质。用TRAP法测定 ,端粒酶活性表达呈阳性 30例 ,hTERT呈阳性表达的 2 7例标本中端粒酶活性也呈阳性的为2 2例。 10例正常组织二者均为阴性。结论 hTERT仅在肺癌细胞中的表达 ,且与端粒酶活性的表达相一致。

HCV/HBV复合抗原基因的克隆、表达及免疫应答研究

为探讨ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合疫苗的可行性，将合成的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）复合多表位抗原基因ＰＣＸ与ＨＢｓＡｇ 基因连接成ＰＣＸＳ基因，与β－半乳糖苷酶（ＧＺ）基因融合后在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得表达．目的蛋白ＧＺ－ＰＣＸＳ可被抗－ＨＢｓ 及抗－ＨＣＶ 抗体所特异识别．ＧＺ－ＰＣＸＳ抗原皮下注射免疫ＩＣＲ小鼠后，诱发了较高水平的抗－ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲ／ＰＣＸＳ）口服免疫小鼠后，诱发了高水平的ＣＤ８＋ Ｔ细胞增殖反应及抗ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．所有免疫小鼠均未见明显的毒副作用．该研究揭示，ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合抗原可诱发特异性体液免疫及细胞免疫应答，而活菌苗口服可能是理想的免疫途径，为ＨＣＶ／ＨＢＶ 双价疫苗研究提供了一定的理论及实验依据．

丙型肝炎病毒多表位抗原在小鼠与家兔中的免疫应答

在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus,HCV)基因组中优选 5个具有良好免疫原性的高度保守T/B细胞表位 ,组合成一个HCV多表位抗原基因 ,并与β 半乳糖苷酶基因融合后在E .coli中高效表达了具有HCV免疫特异性的GZ PCX抗原 .纯化的蛋白质免疫小鼠与家兔后 ,诱发了高滴度 ( 10 -6)的抗 GZ PCXIgG ,并可在高水平上维持数月 .弗氏完全佐剂与死减毒鼠伤寒沙门氏菌均可发挥高效的佐剂效应 .用GZ PCX抗原及其表位多肽刺激后 ,可诱发较高水平的特异性CTL应答、迟发性超敏反应及淋巴细胞增殖 .在免疫小鼠的肠道灌洗液中可检测到抗 GZ PCXsIgG .免疫后小鼠未见明显的毒副反应 ,具有良好的安全性 ,可望发展一种针对不同型。

溴化乙锭-TRAP法检测端粒酶活性(英文)

端粒酶是一种核蛋白，在真核生物体内，通过将端粒重复顺序转移到染色体末端而维持染色体的稳定．端粒酶活性存在于生殖细胞和永生癌细胞，但在正常细胞中却极低乃至无法检测．我们使用ＥＢ染色简化了端粒酶活性检测的传统的ＴＲＡＰ（Ｔｅｌｏｍ ｅｒｉｃ Ｒｅｐｅａｔ Ａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ）法．结果表明，对粗抽提物而言，ＥＢ染色具有足够的可信度和灵敏度，同时又经济省时。