活性氧介导铁过载对脐带间充质干细胞及其造血支持作用的研究

目的探讨铁过载对脐带间充质干细胞（UC-MSC）的损伤作用及活性氧物质（ROS）在该机制中的意义。方法体外培养UC．MSC，用不同浓度的枸橼酸铁胺（FAC）处理UC-MSC不同时间建立铁过载模型。采用细胞倍增时间计算细胞的增殖能力；用AnnexinV／PI双染法检测细胞的凋亡；用共培养方法检测UC-MSC的造血支持能力；并用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平；Western印迹法检测铁过载及抗氧化处理后UC-MSC内ROS相关信号蛋白p-p38MAPK、p38MAPK及1953的表达。结果（1）加铁组UC-MSC的群体倍增时间明显长于对照组[第3代细胞：（24．43±2．72）h比（16．03±2．31）h，P〈0．05]，但传代次数增加2代后两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；（2）加铁组UC-MSC的凋亡率（12．75％±0．32％）明显高于对照组（3．63％±0．80％）（P〈0．05）；（3）脐血单个核细胞（MNC）与加铁组UC-MSC共培养1和2周时，其造血集落形成能力均明显低于对照组（均P〈0．05）；（4）加铁组UC-MSC内ROS水平明显高于对照组，且ROS的水平呈时间与浓度依赖性，在400LLm0L／LFAC浓度下作用12h达到最高值（1499±86比548±97，P〈0．05）；（5）加铁组UC-MSC的p-p38MAPK、P53蛋白表达明显高于对照组，当给予抗氧化剂处理后，相关信号通路可被抑制。结论铁过载可能通过激活ROS相关信号传导因子p-p38MAPK、1953抑制UC-MSC的增殖能力，诱导其凋亡，降低其造血支持能力。