地高辛标记的RNA分子探针检测血清HCV

利用构建的ｐＧＰ１４４质粒，进行ＨＣＶ地高辛ＲＮＡ分子探针的标记，以该探针对ＨＣＶ临床血清样品及已知ＨＣＶ滴度的阳性血清１０倍逐级稀释样品的ＰＣＲ基因扩增产物进行ＤｏｔＢｌｏｔ分子杂交检测。结果显示，４０例ＨＣＶ病人血清中３９例阳性，假阴性２．５％（１／４０）；２０例正常人血清，ＨＣＶ病毒检测结果均为阴性；ＨＣＶ检测线性范围为１０１～４０４（ｃｏｐｙ／１００μｌ）之间。套式ＰＣＲ第二轮基因扩增对上述血清检测电泳结果为４１例阳性，其余１９例正常血清为阴性，假阳性５％（１／２０）。与套式ＰＣＲ结果相比较，ＤｏｔＢｌｏｔ的敏感性与之接近并具有特异性高，不易因污染而造成假阳性结果，以及它的线性范围宽等优点，可以作为较理想的病原体微生物在体液中浓度的定量检测方法。