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预免疫策略结合mVenus-p27K-系统构建休眠肿瘤小鼠模型
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作者 木司塔巴·木台力甫 王俊杰 +4 位作者 钱云臻 陈溯源 邵达 张志刚 李冬雪 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1104-1114,共11页
目的·通过融合预免疫策略与mVenus-p27K-细胞G0期指示系统、DTR-HSV/TK自杀基因系统以及Luc2-tdTomato示踪系统,构建一个无明显转移灶的肿瘤休眠小鼠模型。方法·在KPC1199小鼠胰腺癌细胞系中,依次引入mVenusp27K-细胞G0期指... 目的·通过融合预免疫策略与mVenus-p27K-细胞G0期指示系统、DTR-HSV/TK自杀基因系统以及Luc2-tdTomato示踪系统,构建一个无明显转移灶的肿瘤休眠小鼠模型。方法·在KPC1199小鼠胰腺癌细胞系中,依次引入mVenusp27K-细胞G0期指示系统、DTR-HSV/TK自杀基因系统及Luc2-tdTomato示踪系统,构建KPC1199-PDL稳定表达细胞株。KPC1199-PDL细胞在无血清条件下培养后,通过流式细胞术分选为mVenus(+)细胞及mVenus(−)细胞,采用实时荧光定量PCR(qPCR)验证G0期相关基因的表达。采用CCK-8细胞增殖实验评估KPC1199-PDL细胞对白喉毒素(DTX)和更昔洛韦(GCV)的敏感性。在野生型C57BL/6小鼠中构建经脾-门静脉-肝转移模型,利用免疫荧光技术验证KPC1199-PDL细胞在体内的功能。在C57BL/6小鼠皮下注射KPC1199-PDL细胞,5 d后原位注射DTX和GCV消融皮下瘤,获得预免疫小鼠,并在此基础上构建经脾-门静脉-肝转移模型。采用生物发光成像评估皮下瘤消融和肝转移情况,利用免疫荧光染色检测预免疫小鼠肝脏中肿瘤细胞的分布及休眠状态。结果·KPC1199-PDL细胞稳定表达3种工具系统,且其增殖能力未受影响。在无血清条件培养下,部分KPC1199-PDL细胞表达mVenus蛋白,即进入G0期;经流式细胞术分选后得到的mVenus(+)细胞G0期相关基因较mVenus(−)细胞显著高表达(均P<0.05),而增殖相关基因显著低表达(P<0.05)。CCK-8实验显示KPC1199-PDL细胞对DTX和GCV高度敏感。体内实验证实KPC1199-PDL细胞可通过表达tdTomato蛋白有效示踪,以及表达mVenus蛋白提示细胞进入G0期。经皮下种瘤和药物消融后成功获得预免疫小鼠,在此基础上构建的经脾-门静脉-肝转移模型,生物发光成像未在肝脏观察到转移信号,但肝脏组织切片经免疫荧光检测发现存在单个或小簇状同时表达mVenus和tdTomato,但不表达增殖标志物Ki67的G0期肿瘤细胞。结论·胰腺癌预免疫小鼠模型结合mVenus-p27 K-指示系统、DTR-HSV/TK自杀基因系统及Luc2-tdTomato示踪系统,成功得到可识别、可示踪的休眠肿瘤动物模型。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 休眠肿瘤细胞 预免疫小鼠 mVenus-p27K−系统 动物模型
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南海砗磲Sr/Ca比值测试:XRF和ICP-OES方法对比研究(英文) 被引量:1
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作者 梅衍俊 邵达 +7 位作者 王玉宏 杨仲康 杨文卿 高月嵩 何上明 郑怡 李爱国 孙立广 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1640-1647,共8页
对采自中国南海的5个砗磲(1个现代砗磲、4个化石砗磲)进行了两种高分辨率Sr/Ca比值分析。电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)得到的Sr/Ca比值呈现出年周期变化,且与海表面温度呈现负相关关系,这表明Sr/Ca可作为良好的SST替代性指标。I... 对采自中国南海的5个砗磲(1个现代砗磲、4个化石砗磲)进行了两种高分辨率Sr/Ca比值分析。电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)得到的Sr/Ca比值呈现出年周期变化,且与海表面温度呈现负相关关系,这表明Sr/Ca可作为良好的SST替代性指标。ICP-OES是测试砗磲壳体Sr/Ca常用的方法,但大量的样品需要钻样及预处理,相当耗时。而同步辐射X射线荧光分析(SR-XRF)可以克服这些缺点,它只需要前期的样品制备,并允许固态样品原位无损快速分析,具有高空间分辨率(微米级)、高灵敏度和多元素分析的特点。在本研究中,我们用SR-XRF方法测试砗磲样品化学元素的可行性。据查阅,目前尚未有类似的相关研究文献。本文实验结果显示SR-XRF数据能够揭示元素含量及其比值变化。且SR-XRF测得的砗磲Sr/Ca比值与ICP-OES分析方法测得的Sr/Ca通过相关统计分析发现其显著性水平p值(5个砗磲样品的p值均<0.05)非常显著,表明高分辨率SR-XRF测得的砗磲Sr/Ca比值在一定程度上代替ICP-OES分析方法的可能性非常大。SR-XRF方法在砗磲重建古气候领域有很大的应用前景。 展开更多
关键词 SR-XRF ICP-OES 砗磲Sr/Ca比值
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南海砗磲壳体成分及生物有机特征分析 被引量:2
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作者 梅衍俊 邵达 +4 位作者 刘文齐 杨文卿 杨仲康 谢周清 孙立广 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期550-559,共10页
砗磲(Tridacna spp.)作为地质历史时期以来最大的海洋双壳类生物,因其碳酸盐壳体有明显的年纹层甚至日纹层,正逐渐成为一种重要的高分辨率古气候研究载体.在利用砗磲壳体进行古气候研究之前需要判断其碳酸盐壳体是否发生方解石化.对采... 砗磲(Tridacna spp.)作为地质历史时期以来最大的海洋双壳类生物,因其碳酸盐壳体有明显的年纹层甚至日纹层,正逐渐成为一种重要的高分辨率古气候研究载体.在利用砗磲壳体进行古气候研究之前需要判断其碳酸盐壳体是否发生方解石化.对采自中国南海的5个砗磲壳体进行X射线衍射(XRD)测试,并对1个现代砗磲和1个古代砗磲进行差热-热重测试和顶空富集加气相色谱/质谱联用分析.结果显示,砗磲内壳没有发生方解石化,为文石相;主要无机成分为CaCO3,质量分数为96.5%~97.2%,有机成分质量分数在2.8%~3.5%,包括多种有机物,如十六烷及17种氨基酸.部分砗磲外壳发生了明显的方解石化.本研究提出了判别砗磲文石壳体是否方解石化的方法,并初步确定了砗磲壳体组分及含量,这是利用砗磲文石壳体研究气候环境变化的前提和依据. 展开更多
关键词 砗磲 南海 文石 碳酸盐 有机质 热重分析
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Dynamic friction modelling and parameter identification for electromagnetic valve actuator 被引量:6
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作者 shao da XU Si-chuan DU Ai-min 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第12期3004-3020,共17页
A new modified LuGre friction model is presented for electromagnetic valve actuator system.The modification to the traditional LuGre friction model is made by adding an acceleration-dependent part and a nonlinear cont... A new modified LuGre friction model is presented for electromagnetic valve actuator system.The modification to the traditional LuGre friction model is made by adding an acceleration-dependent part and a nonlinear continuous switch function.The proposed new friction model solves the implementation problems with the traditional LuGre model at high speeds.An improved artificial fish swarm algorithm(IAFSA)method which combines the chaotic search and Gauss mutation operator into traditional artificial fish swarm algorithm is used to identify the parameters in the proposed modified LuGre friction model.The steady state response experiments and dynamic friction experiments are implemented to validate the effectiveness of IAFSA algorithm.The comparisons between the measured dynamic friction forces and the ones simulated with the established mathematic friction model at different frequencies and magnitudes demonstrate that the proposed modified LuGre friction model can give accurate simulation about the dynamic friction characteristics existing in the electromagnetic valve actuator system.The presented modelling and parameter identification methods are applicable for many other high-speed mechanical systems with friction. 展开更多
关键词 LuGre friction model artificial fish swarm algorithm Gauss mutation chaotic search parameter identification electromagnetic valve actuator
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On the Track of a Sound Market Economy:Expert Interprets Recent Party Decision
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作者 shao da 《China Population Today》 2003年第5期7-9,共3页
关键词 市场经济体制 中国 城市化 所有制结构 私营经济
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利用Trios-WES检测分析58例不明原因发育迟缓/智力障碍儿童的遗传学特征
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作者 冯金彩 赵婷婷 +3 位作者 贾佳 田园 邵达 于广军 《中国儿童保健杂志》 CAS CSCD 2023年第8期889-894,共6页
目的采用基于全外显子组测序的单核苷酸变异(SNV)/小插入缺失(InDel)和拷贝数变异(CNV)家系分析(Trios-WES)提高发育迟缓/智力障碍(DD/ID)诊断能力。方法纳入2017年3月1日—2019年3月31日期间,就诊于上海市儿童医院高危儿整合门诊及康... 目的采用基于全外显子组测序的单核苷酸变异(SNV)/小插入缺失(InDel)和拷贝数变异(CNV)家系分析(Trios-WES)提高发育迟缓/智力障碍(DD/ID)诊断能力。方法纳入2017年3月1日—2019年3月31日期间,就诊于上海市儿童医院高危儿整合门诊及康复科门诊,经Gesell、WPPSI-Ⅳ或WISC-Ⅳ评估非外在因素引起、常规遗传检测为阴性、原因不明的58例DD/ID患儿,采用Trios-WES技术分析,对所发现基因变异进一步进行表型与Sanger测序验证,统计与分析结果。结果58例原因不明的DD/ID患儿,经Trios-WES分析,发现41个DD/ID相关的基因变异,其中13个首次报道。33个基因变异(33/58,56.9%)经验证为致病性单基因或多基因变异,包括3例CNV变异和1例父源单亲二倍体;含10个错义突变,7个剪切突变,7个移码突变,5个无义突变;新发变异占所有致病变异的79%;其中MECP2、TCF4、SYNGAP1、UBE3A、SHANK3基因变异高频出现。结论采用Trios-WES临床遗传检测策略,可提高不明原因DD/ID患儿的诊断率,为其进一步治疗及遗传咨询提供依据。 展开更多
关键词 发育迟缓/智力障碍 核心家系全外显子组检测 遗传检测 基因变异
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