加味四君子汤对肌萎缩侧索硬化症AR2小鼠运动功能的影响

目的:探索加味四君子汤对肌萎缩侧索硬化症(ALS)AR2小鼠运动功能的影响。方法:采用转基因方法制作保留部分运动功能的ADAR2flox/flox小鼠为对照组(Ⅰ组),将ALS AR2小鼠随机分为空白组(Ⅱ组)、中药低剂量组(Ⅲ组)及高剂量组(Ⅳ组)。各组小鼠正常进食水,中药组分别给予灌胃低、高剂量的加味四君子汤,每日1次。每4周观察小鼠活动状况以及抓握力、爬滚筒能力等运动功能,并在第24周检测小鼠血常规、心肝肾功能。结果:各组小鼠第8周开始均有不同程度的运动功能减退,到24周为止Ⅰ组运动功能减退速度缓慢,Ⅱ组AR2小鼠从12周开始无论活动度、抓握力还是爬滚筒能力均迅速下降,而AR2小鼠中药治疗组运动功能降低程度被延缓,且与中药剂量有关;24周时Ⅱ组AR小鼠的体质量、抓握力和爬滚筒能力与其余3组比较明显降低,差异有统计学意义。各组小鼠24周时的生化检测均无异常。结论:加味四君子汤能够延缓ALS小鼠运动功能的衰退。

在未编辑的谷氨酸受体2Q/R部位促使RNA2的次黄嘌呤腺苷脱氨酶丢失引起运动神经元的缓慢死亡

目的研究小鼠未编辑的谷氨酸受体2(GluR2)Q/R部位缺失RNA2的次黄嘌呤腺苷脱氨酶(ADAR2)是否引起缓慢的运动神经元死亡。方法利用Cre/loxP重组系统制作一个条件性基因敲除ADAR2小鼠品系(AR2),利用基因组PCR和反转录PCR技术,将AR2小鼠的运动神经元ADAR2基因条件性定位,观察及检测AR2小鼠、携带内源性GluR2等位基因的未编辑GluR2 Q/R小鼠(AR2res)和对照组小鼠的GluR2 Q/R部位编辑率、行为特征、电生理以及组织形态。结果 AR2小鼠GluR2 Q/R部位编辑率降低,脊髓与脑运动神经核细胞显示因ADAR2缺乏引起的运动神经元死亡,并且出现运动神经功能衰退症状,而GluR2 Q/R部位的编辑率在动眼神经核无明显减少。当失去ADAR2活性的AR2小鼠携带内源性的GluR2等位基因时,细胞和表型的变化可以被阻止。结论 ADAR2失活可以引起运动神经元α-氨基-3-羟基-5甲基-4异恶唑-丙酸受体介导的死亡,而在未编辑的GluR2 Q/R部位缺乏ADAR2可以引起运动神经元缓慢死亡。