吉林省延边地区蜱类分布及其携带发热伴血小板减少综合征病毒调查

本文旨在探讨吉林省延边地区自然环境和动物体表蜱类分布及其消长规律,掌握其携带发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)状况及传播病毒能力。2016年4~9月份按月采集延边州所辖8个县(市)自然环境中生长的蜱虫和放牧动物体表蜱虫进行形态学分类,对其进行构成分析。对其中部分蜱虫分组进行SFTSV核酸检测。SFTSV核酸检测方法采用了Real time RT-PCR和RT-PCR相结合的方法。结果共采集蜱虫3 446只,其中森林革蜱763只,嗜群血蜱222只,日本血蜱639只,长角血蜱515只,全沟硬蜱1 014只,其他血蜱293只;全沟硬蜱(29.43%)和森林革蜱(22.14%)为本地优势种。长角血蜱在图们市(70.88%)和珲春市(40.59%)分布较多。对部分蜱虫(1605只)SFTSV Real time RT-PCR检测结果总最低感染率为1.81%,分种最低感染率分别为嗜群血蜱8.65%、日本血蜱4.53%、长角血蜱1.59%。序列分析结果表明,本文检测到的SFTSV病毒与我国其他省份从患者身上分离到的大部分SFTSV有高度一致性(99%)且与2012年从浙江患者血清中分离到的SFTSV、2013年韩国国家疾病预防控制中心从人身上采集的长角血蜱中分离到的SFTSV处于同一分枝,把该病毒命名为YBHC-TICK1-2016/CHINA。

图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱中SFTS病毒监测分析

目的掌握图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱分布特征,了解该地区长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)病毒情况,分离病毒,分析其基因特征。方法 2017年4月～9月,在吉林省图们江流域中朝俄边境地区珲春市、图们市、和龙市、龙井市采集蜱虫进行形态学分类,选择新鲜长角血蜱对其进行分组,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测SFTS病毒。对阳性样品,利用绿猴肾细胞进行病毒分离,并扩增S、M、L基因片段,比对同源性,建立系统进化树,分析其基因特征。结果长角血蜱主要分布在图们江下游珲春市和图们市,为该两县优势种,分别达到71. 85%和87. 62%。在珲春市长角血蜱中分离到一株病毒,命名为YBHC-TICK2-2017/CHINA。该病毒S片段(1 746 bp)、M片段(3 336bp)、L片段(6 376 bp)基因序列与美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI) DNA序列数据库中记录的中国和韩国SFTS病毒分离株基因序列同源性为98. 00%～99. 00%。系统进化树分析,该病毒株S片段基因序列与中国吉林株(KT890282)分为一簇,M片段和L片段基因序列与中国江苏株(KR230781)分为一簇。结论长角血蜱在图们江下游中朝俄边境地区具有广泛的分布。该研究首次在该地区长角血蜱中分离到SFTS病毒,提示该地区为SFTS防控重点区域。

吉林省图们江流域常见蜱类调查研究

目的了解吉林省图们江流域常见蜱类及分布。方法 2016-2018年每年4-9月在吉林省图们江流域延边朝鲜族自治州(延边州)珲春、图们、汪清、延吉、安图、和龙和龙井市7个市(县)采集游离蜱和动物寄生蜱,蜱放入平皿后运送到实验室进行形态学鉴定,Excel 2007软件进行数据整理与统计分析,χ2检验用于率的比较。结果共采集蜱15 866只,其中游离蜱11 440只,动物体表寄生蜱4 426只;森林革蜱、嗜群血蜱、日本血蜱、长角血蜱、全沟硬蜱和未鉴定种(部分若蜱和全部幼蜱)分别占16.96%、12.41%、18.04%、27.41%、21.50%和3.68%,隶属1科3属。森林革蜱在安图县、嗜群血蜱在龙井市分布较多,分别占67.72%(1 519/2 243)和55.73%(1 322/2 372);日本血蜱在和龙市和汪清县、长角血蜱在珲春和图们市、全沟硬蜱在延吉市和汪清县有较多分布,分别占40.92%(620/1 515)和30.35%(889/2 929)、83.02%(3 633/4 376)和70.86%(710/1 002)、64.94%(928/1 429)和56.67%(1 660/2 929),不同地区蜱种构成差异有统计学意义(均P<0.001)。结论吉林省图们江流域常见蜱种类多样,具有明显地域分布特征,在该地区应该采取针对性的蜱传疾病防控措施。

图们江流域边境地区蜱携带斑点热群立克次体调查研究

目的 了解吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)图们江流域边境地区游离蜱携带斑点热群立克次体(SFGR)情况及基因型分布.方法 2017年4-9月,在延边州图们江流域边境地区的珲春、图们、和龙、龙井市用布旗法采集游离蜱进行分类鉴定;采用PCR方法检测蜱体内SFGR ompA基因,通过基因测序鉴定其种类,并进行系统进化分析.计算采用SFGR的组阳性率和最低感染率(MIR),比较不同特征蜱虫间组阳性率的差异.结果 本研究共采集蜱虫3 079只,共分成536个组, SFGR核酸组阳性率为39.7%(213组),MIR为6.9%.森林革蜱、嗜群血蜱、日本血蜱、长角血蜱、全沟硬蜱SFGR核酸组阳性率分别为80.4%(41/51)、14.0%(25/179)、20.2%(18/89)、78.9%(101/128)和25.9%(21/81)(P<0.001);MIR分别为19.4%、3.0%、3.4%、10.8%和5.9%.雌性成虫、雄性成虫、若虫和幼虫SFGR核酸组阳性率分别为36.4%(95/261)、34.2%(67/196)、56.3%(40/71)和7/8(P<0.001);而MIR分别为7.9%、7.7%、4.9%和3.5%.共鉴定5种SFGR基因型,分别为立克次体Candidatus Rickettsia longicornii、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体和立克次体Rickettsia monacensi ,其同源性均达到了98%~100%. Candidatus Rickettsia longicornii 、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体与已知种进化关系较近;Rickettsia monacensis进化关系较远.结论 图们江流域边境地区蜱类SFGR感染普遍,存在常见蜱种感染SFGR基因型多样性和携带SFGR蜱虫种类多样性.

吉林延边地区蜱复合感染新塔拉塞维奇立克次体及SFTSV调查研究

目的为了解吉林省延边地区蜱类新塔拉塞维奇立克次体(candidatus rickettsia tarasevichiae, CRT)和复合感染新布尼亚病毒(sever fever thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV)的感染情况。方法采集吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)延吉、汪清、珲春、敦化、安图、和龙6个县游离蜱,进行形态学分类,通过巢式多聚核苷酸链式反应(nested polymerase chain reaction, nested PCR)和实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)方法检测蜱体内CRT和SFTSV。对其CRT进行目标DNA测序,分析同源性和系统进化关系。结果此研究共采集各种蜱类1 032只,分别为全沟硬蜱(ixodes persulcatus)(35.56%)、森林革蜱(dermacentor silvarum)(20.64%)、日本血蜱(haemaphysalis japonica)(20.45%)、长角血蜱(haemaphysalis longicornis)(10.47%)、嗜群血蜱(haemaphysalis concinna)(8.33%)以及其他种类(4.55%)。全沟硬蜱、长角血蜱、日本血蜱、森林革蜱检测出CRT,最低感染率(minimum infection rate per 100 ticks,MIR)为10.47%。嗜群血蜱、日本血蜱、全沟硬蜱、长角硬蜱、森林革蜱检测出SFTSV,最低感染率为2.52%。全沟硬蜱、日本血蜱、森林革蜱3种蜱存在CRT和SFTSV复合感染现象,复合感染MIR为1.26%。本研究CRT ompA和17kDa基因序列与中国河南信阳株(KX365196.1)序列同源性达100%。系统进化分析,延边地区蜱CRT ompA基因序列和该河南信阳株基因序列成为一簇,而17kDa基因则形成独立分支。结论本研究首次从吉林省延边地区游离蜱中检测出CRT,全沟硬蜱为主要媒介宿主。因此,可以明确该地区为新塔拉塞维奇立克次体病自然疫源地。同时发现,延边地区蜱类存在CRT与SFTSV复合感染的现象。因此,在该地区必须加强新塔拉塞维奇立克次体病和发热伴血小板减少综合征(sever fever thrombocytopenia syndrome, SFTS)疫情监测。