显微切割法对肝细胞癌抑癌基因杂合性缺失的研究

目的通过对肝细胞癌(HCC)抑癌基因(tumor suppressor genes,TSGs)杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)谱系特点的分析,进一步了解HCC发生过程中多基因变异的特点。方法采用显微组织切割法从石蜡包埋的组织切片中提取基因组DNA直接测序,对33例信息性HCC进行了6种TSGs(APC、DCC、MCC、OGG 1、p53和RB1)的LOH检测。结果LOH的总体发生率为36.4％,其中p53:80.0％、OGG1:50.0％、APC:41.7％、RB1:20.0％、DCC:0.O％、MCC:0.0％。结论在HCC的发生和发展过程中有多基因变异的参与,其中p53、OGG1和APC基因在HCC的发生中起重要作用,RB1的作用次之,而DCC和MCC基因的作用可能较小。

胆管癌基因变异与临床病理学特征的关系

目的 了解肝内胆管癌 (ICC)在发生和发展过程中基因变异特点及其与临床病理学特征的关系。方法 采用微量组织切割法 ,从 2 2份ICC石蜡包埋组织块中提取基因组DNA ,经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳分离和DNA直接测序 ,检测 6种肿瘤抑制基因 (APC、MCC、DCC、OGG1、p5 3和RB1)的杂合性缺失和Ki ras 2癌基因点突变的状况 ,分析其与临床病理学指标的关系。结果 7种肿瘤基因变异的总检出率为 86 .4% (19/2 2 )。根据变异基因类型与临床病理学特征的关系 ,将 19例有基因变异的病例分为两型 :Ⅰ型患者 9例 ,47.4% ,具有APC、MCC、DCC和Ki ras 2基因变异 ,平均年龄 5 7.2岁 ;Ⅱ型患者 10例 ,5 2 .6 % ,具有p5 3、OGG1和RB1基因变异 ,平均年龄 6 9.1岁 (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ型患者的术后 3年生存率为 88.9% (8例 ) ,明显高于Ⅱ型患者的 30 0 % (3例 ,P <0 .0 5 )。结论 ICC的发生和发展与多基因变异的长期蓄积和协同作用密切相关 ;Ⅰ型基因变异 (APC、MCC、DCC和Ki ras 2 )主要在ICC的启动和早期演进阶段起作用 ,Ⅱ型基因变异 (p5 3、OGG1和RB1)则在促进ICC的晚期演进过程中发挥作用。