曼氏血吸虫卵可溶性抗原基因克隆的研究

本文报导以曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)成虫mRNA为模板,通过逆转录酶促法合成cDNA。将虫源cDNA插入载体λgtll噬菌体基团组中编码β-半乳糖苷酶的LacZ基因区形成重组DNA,然后导入受体细胞E.coli KM392pmc9(lon^+)建立基因库,并从中筛选出若干株血吸虫抗原基因克隆。一株被兔抗虫卵可溶性抗原高免血清检获的基因克隆,其虫源基因片段经分子杂交证明系单拷贝基因。重组基因在溶原菌株中所表达的融合蛋白通过免疫印迹转移试验(EITB)证明与相关抗体具有很强的结合能力。DNA序列分析揭示该基因编码的多肽系由239个残基组成,其分子量理论推导值为28.7KD,化学性质呈强硷性和强亲水性。引人注意的是此多肽涟中含有一个由7个“精氨酸—甘氨酸”重复组成的结构独特片段。