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基于HK-2细胞的左金丸中生物碱类组分体外毒性筛选及机制初探 被引量:6
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作者 杨春启 连闻雨 +6 位作者 林毅 谢光辉 马增春 谭洪玲 肖成荣 王宇光 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期110-118,共9页
目的基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤。方法采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分。通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步... 目的基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤。方法采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分。通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步确定造成细胞损伤作用的生物碱,为组分中药配伍组方和配伍减毒提供体外毒理学依据。结果采用CCK-8法和高内涵技术初步筛选,表明吴茱萸碱(EVO)能够显著降低细胞数目,升高细胞膜通透性,降低线粒体膜电位。此外,细胞形态、细胞凋亡和细胞色素C表达与高内涵筛选结果一致,Western blot实验表明EVO能够诱导细胞凋亡造成肾细胞损伤。结论 EVO可明显导致肾细胞损伤,可能是通过影响线粒体、细胞色素C及细胞膜通透性诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 左金丸 吴茱萸碱 高内涵 肾毒性 凋亡 HK-2细胞
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不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓内NF-κB表达的影响研究
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作者 檀红玲 张军立 梁丹 《临床和实验医学杂志》 2021年第5期457-461,共5页
目的探究不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)的表达的影响。方法将50%豚鼠全脊髓匀浆诱导的80只Wistar大鼠EAE模型采用随机数字表法分为4组,每组20只,A组为EAE模型组,B、C、D组为硫辛酸干... 目的探究不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)的表达的影响。方法将50%豚鼠全脊髓匀浆诱导的80只Wistar大鼠EAE模型采用随机数字表法分为4组,每组20只,A组为EAE模型组,B、C、D组为硫辛酸干预组,同时选取20只健康Wistar大鼠作为健康对照组(E组),B、C、D组大鼠在免疫第1天开始腹腔注射1 mL的50、100、200μmol/L浓度的硫辛酸进行干预(共21 d);A组和E组每日腹腔注射1 mL生理盐水。比较4组大鼠EAE的发病情况及干预的第7、14、21天的NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果随干预时间的延长,A、B、C、D组大鼠神经功能评分先升高后降低,第14天达到高峰,A组大鼠的神经功能评分最高。且B、C、D组间随着硫辛酸浓度的升高,神经功能评分降低,潜伏期延长,发病率和死亡率降低;A、B、C、D组大鼠IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达先升高后降低,第14天达到高峰,E组大鼠的IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达最低,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达降低;IL-10水平先降低后升高,第14天达到最低值,E组大鼠的IL-10水平最高,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-10水平升高。结论随EAE大鼠病情的进展,其神经功能降低,NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达升高;不同剂量的硫辛酸均可缓解EAE大鼠病情,且高剂量的硫辛酸作用效果较强,随着硫辛酸剂量的升高,EAE的发病潜伏期延长,NF-κB异常表达及机体炎症反应缓解显著。 展开更多
关键词 大鼠 实验性自身免疫性脑脊髓炎 硫辛酸 核转录因子-ΚB 炎症反应
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麦冬皂苷D干预内质网应激减轻麦冬皂苷D'所致心肌细胞损伤 被引量:14
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作者 王佳 王宁宁 +4 位作者 葛运炫 谭洪玲 马增春 王宇光 高月 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1876-1881,共6页
研究麦冬皂苷D对麦冬皂苷D'诱导大鼠心肌细胞凋亡的干预作用及可能机制,为麦冬皂苷类成分的毒效差异深入研究提供参考。CCK-8法检测麦冬皂苷D与麦冬皂苷D'共处理对细胞存活率的影响; Western blot法及RT-PCR法检测麦冬皂苷D及... 研究麦冬皂苷D对麦冬皂苷D'诱导大鼠心肌细胞凋亡的干预作用及可能机制,为麦冬皂苷类成分的毒效差异深入研究提供参考。CCK-8法检测麦冬皂苷D与麦冬皂苷D'共处理对细胞存活率的影响; Western blot法及RT-PCR法检测麦冬皂苷D及麦冬皂苷D'对内质网应激相关基因PERK,Bip,ATF-4,p-eIF2α及CHOP表达的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;通过内质网形态特异性示踪探针检测麦冬皂苷D'造成的内质网形态改变及麦冬皂苷D的逆转效果,探究麦冬皂苷D保护心肌细胞损伤的可能作用机制。细胞实验结果显示,6μmol·L-1的麦冬皂苷D'可显著诱导内质网应激相关蛋白的表达,导致细胞内质网形态发生变化,促进细胞凋亡。不同浓度的麦冬皂苷D可在一定程度上逆转麦冬皂苷D'引起的心肌细胞损伤。结果表明,麦冬皂苷D可降低麦冬皂苷D'触发的内质网应激,进而对心肌细胞产生保护作用。 展开更多
关键词 麦冬皂苷D 麦冬皂苷D’ 内质网应激 CYP2J3 细胞凋亡
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凉血固元汤对肠道急性辐射损伤大鼠肠道菌群的调节作用 被引量:4
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作者 王毓国 谭洪玲 +1 位作者 冯剑 窦永起 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第6期436-441,453,共7页
目的探讨中药复方凉血固元汤(LGD)对肠道急性辐射损伤大鼠肠道菌群的调节作用。方法选择81只雌性SD大鼠,随机选取6只作为空白(control)组,其余大鼠采用60Co-γ射线照射制作肠辐射损伤模型,并随机分为模型(model)组、金双歧(GB)组及LGD组... 目的探讨中药复方凉血固元汤(LGD)对肠道急性辐射损伤大鼠肠道菌群的调节作用。方法选择81只雌性SD大鼠,随机选取6只作为空白(control)组,其余大鼠采用60Co-γ射线照射制作肠辐射损伤模型,并随机分为模型(model)组、金双歧(GB)组及LGD组,每组25只。照射后每日观察大鼠排便、死亡等一般情况,于照射后7 d称取大鼠体质量,并收集粪便样本用于肠道菌群检测,分析各组肠道菌群的α多样性和门、属水平上主要菌群相对丰度差异。结果照射后3 d开始各照射组大鼠出现腹泻、死亡等情况,以模型组最明显,照射后7 d各照射组体质量显著低于空白组(P<0.01),LGD组高于模型组(P<0.05)。肠道菌群α多样性比较,模型组及GB组Shannon指数较空白组升高(P<0.05),Simpson指数降低(P<0.05,P<0.01),而LGD组Shannon指数低于模型组(P<0.01),Simpson指数较GB组升高(P<0.05)。门水平各组菌群丰度比较可见,与空白组比较,模型组及GB组厚壁菌门相对丰度明显降低(P<0.01),拟杆菌门显著升高(P<0.01),两者比例倒置,而LGD组厚壁菌门较模型组及GB组明显升高(P<0.01),且拟杆菌门显著降低(P<0.01)。在属水平上,模型组和GB组拟杆菌属相对丰度较空白组升高(P<0.01,P<0.05),LGD组低于模型组(P<0.01),且布劳特菌属较模型组升高(P<0.01)。结论LGD能有效调节辐射导致的肠道菌群的结构失调和数量变化,改善大鼠生存质量。 展开更多
关键词 凉血固元汤 辐射损伤 肠道菌群 胃肠道 中药方剂学 中药药理学
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乌头碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大 被引量:6
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作者 王宁宁 王佳 +3 位作者 谭洪玲 王宇光 高月 马增春 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1642-1647,共6页
研究乌头碱(aconitine,AC)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2细胞肥大的抑制作用,并探讨其作用机制。通过AngⅡ诱导H9c2细胞肥大建立模型,并分别与不同浓度的乌头碱共同处理,Western blot法检测atrial natriuretic peptide(A... 研究乌头碱(aconitine,AC)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2细胞肥大的抑制作用,并探讨其作用机制。通过AngⅡ诱导H9c2细胞肥大建立模型,并分别与不同浓度的乌头碱共同处理,Western blot法检测atrial natriuretic peptide(ANP)、brain natriuretic peptide(BNP)、β-myosin heavy chain(β-MHC)、α-smooth muscle actin(α-SMA)在蛋白水平的表达;实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测肥大基因ANP,BNP,β-MHC mRNA的表达。采用激光扫描共聚焦显微镜检测肌原纤维中的重要组成成分F-actin标记的荧光强度。乌头碱可明显逆转AngⅡ所诱导的H9c2细胞总蛋白含量的升高; qRTPCR检测结果显示乌头碱可明显抑制AngⅡ所诱导的ANP,BNP,β-MHC mRNA的上调; Western blot法检测提示乌头碱可明显抑制AngⅡ所诱导的ANP,BNP,β-MHC蛋白的上调;荧光标记检测F-actin的表达水平,乌头碱可以抑制AngⅡ所诱导的F-actin的表达。乌头碱明显下调AngⅡ所诱导的心肌细胞肥大的多项指标,揭示乌头碱可能通过抑制肥大因子的上调来缓解AngⅡ所引起的心肌肥大,这可能是乌头碱发挥治疗作用的机制之一。 展开更多
关键词 乌头碱 血管紧张素Ⅱ 心肌肥大 H9C2细胞
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黄连碱通过线粒体损伤及内质网应激PERK-ATF4-CHOP通路导致L02细胞毒性 被引量:3
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作者 连闻雨 杨春启 +5 位作者 林毅 谭洪玲 肖成荣 马增春 王宇光 高月 《军事医学》 CAS 2021年第11期834-842,共9页
目的研究黄连碱(coptisine)对正常人肝细胞L02的细胞毒性及作用机制,为临床安全用药提供参考。方法分别以不同浓度黄连碱作用于L02细胞24 h,通过CCK-8法检测黄连碱对L02细胞存活率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内... 目的研究黄连碱(coptisine)对正常人肝细胞L02的细胞毒性及作用机制,为临床安全用药提供参考。方法分别以不同浓度黄连碱作用于L02细胞24 h,通过CCK-8法检测黄连碱对L02细胞存活率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内活性氧(ROS)含量的改变,激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体膜电位和细胞内钙离子水平的变化,Western印迹检测L02细胞内Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、细胞色素C(cytochrome C)、免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)、激活转录因子4(ATF4)、真核生物启动因子2α(eIF2α)、caspase-12蛋白表达水平,探讨黄连碱细胞毒性的可能作用机制。结果黄连碱能以浓度依赖方式抑制细胞存活,诱导L02细胞凋亡,可促使细胞内ROS大量蓄积,线粒体膜电位下降,细胞色素C、Bax蛋白表达量上升;同时,还可激活内质网应激PERK-ATF4-CHOP通路,显著影响相关蛋白的表达,其中BIP、CHOP、ATF4蛋白表达量升高,PERK、eIF2α蛋白表达量下降,明显诱导细胞内钙离子含量升高,激活下游因子caspase-12、caspase-3蛋白表达。结论黄连碱可通过线粒体途径和内质网应激(ERS)途径诱导L02肝细胞凋亡,其潜在的肝毒性风险及对中药黄连安全性的影响有待进一步研究。 展开更多
关键词 黄连碱 细胞凋亡 内质网应激 线粒体疾病 肝细胞 胱天蛋白酶3
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麦冬皂苷D通过铁死亡途径减轻麦冬皂苷D'所致心肌细胞损伤 被引量:17
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作者 林毅 杨春启 +4 位作者 连闻雨 肖成荣 谭洪玲 高月 王宇光 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2241-2247,共7页
本文研究麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)对麦冬皂苷D'(ophiopogonin D',OPD')诱导大鼠心肌细胞损伤的干预作用及可能机制,为中药麦冬的临床使用提供相关的实验依据。采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测麦冬皂苷D'及... 本文研究麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)对麦冬皂苷D'(ophiopogonin D',OPD')诱导大鼠心肌细胞损伤的干预作用及可能机制,为中药麦冬的临床使用提供相关的实验依据。采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测麦冬皂苷D'及麦冬皂苷D与麦冬皂苷D'共处理对大鼠心肌细胞存活率的影响;流式细胞仪检测细胞内活性氧(reaction oxygen species,ROS)含量;FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe^(2+)含量变化;相应的试剂盒检测细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量的变化;Western blot检测转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TFR1)、环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)、NADPH氧化酶1(NADPH oxidase 1,NOX1)、长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)、阳离子氨基酸转运蛋白11(cationic amino acid transporter 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)及铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)等铁死亡相关蛋白表达的变化,探究麦冬皂苷D保护心肌细胞损伤的作用机制是否与铁死亡有关。实验结果显示,1μmol·L^(-1)的麦冬皂苷D'可显著诱导铁死亡相关蛋白的表达,导致细胞Fe^(2+)、ROS和GSH-Px含量明显升高,GSH含量明显降低;经不同浓度麦冬皂苷D(0.5、1和2μmol·L^(-1))处理后在一定程度上逆转麦冬皂苷D'引起的心肌细胞损伤,并且剂量在1~2μmol·L^(-1)时效果最佳。结果表明,麦冬皂苷D可干预麦冬皂苷D'引起的铁死亡,进而对大鼠心肌细胞产生保护作用。 展开更多
关键词 麦冬 麦冬皂苷D 麦冬皂苷D' 心肌细胞 铁死亡
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雄黄及三氧化二砷对小鼠肠道菌群的初步探究 被引量:14
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作者 孙宇婷 徐焕华 +5 位作者 聂窈 王宇光 马增春 周维 谭洪玲 高月 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期142-148,共7页
观察雄黄及三氧化二砷对肠道菌群的影响。实验分为雄黄低剂量组(RL)、雄黄中剂量组(RM)、雄黄高剂量组(RH)、三氧化二砷组(ATO),其中ATO组与RL组中三价砷含量一致。灌胃1周建立雄黄及三氧化二砷毒性模型,第8天给药1 h后收集小鼠粪便,通... 观察雄黄及三氧化二砷对肠道菌群的影响。实验分为雄黄低剂量组(RL)、雄黄中剂量组(RM)、雄黄高剂量组(RH)、三氧化二砷组(ATO),其中ATO组与RL组中三价砷含量一致。灌胃1周建立雄黄及三氧化二砷毒性模型,第8天给药1 h后收集小鼠粪便,通过对细菌16S rRNA基因检测观察雄黄对小鼠肠道菌群的影响。结果发现,各给药组乳酸菌属均减少,瘤胃球菌属、粘放线菌属等增多。RL组与ATO组在普氏菌属、瘤胃球菌属、粘放线菌属等具有一致性,但在乳酸菌属、拟杆菌属等具有差异性。由此得出,雄黄与三价砷等量的三氧化二砷对肠道菌群影响具有相似性,但仍有差别;雄黄给药后肠道保护性细菌如乳酸菌属等减少,发生炎症;低剂量时抗炎性细菌如瘤胃球菌属、粘放线菌属等增多,可以抵消菌群失调造成的轻度炎症;高剂量时菌群紊乱,变形菌门增多,肠道炎症加剧,出现水肿等炎症反应。因此,作者认为临床使用雄黄后胃肠道不良反应可能与菌群紊乱有关,雄黄临床使用时应小剂量配伍使用,以减轻肠道炎症的发生。 展开更多
关键词 雄黄 三氧化二砷 肠道菌群 肠道炎症
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Tetramethylpyrazine protects lymphocytes from radiationinduced apoptosis through nuclear factor-κB 被引量:7
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作者 WANG Xiao-Yan MA Zeng-Chun +6 位作者 WANG Yu-Guang tan hong-ling XIAO Cheng-Rong LIANG Qian-De tanG Xiang-Lin CHENG Yu GAO Yue 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2014年第10期730-737,共8页
AIM: Radiation induces an important apoptosis response in irradiated organs. The objective of this study was to investigate the radioprotective effect of tetramethylpyrazine(TMP) on irradiated lymphocytes and discover... AIM: Radiation induces an important apoptosis response in irradiated organs. The objective of this study was to investigate the radioprotective effect of tetramethylpyrazine(TMP) on irradiated lymphocytes and discover the possible mechanism of protection. METHOD: Lymphocytes were pretreated for 12 h with TMP(25-200 μmol·L-1) and then exposed to 4 Gy radiation. Cell apoptosis and the signaling pathway were analyzed. RESULTS: Irradiation increased cell death, DNA fragmentation, activated caspase activation and cytochrome c translocation, downregulated B-cell lymphoma 2(Bcl-2) and up-regulated Bcl-2-associated X protein(Bax). Pretreated with TMP significantly reversed this tendency. Several anti-apoptotic characteristics of TMP, including the ability to increase cell viability, inhibit caspase-9 activation, and upregulate Bcl-2 and down-regulate Bax in 4Gy-irradiated lymphocytes were determined. Signal pathway analysis showed TMP could translate nuclear factor-κB(NF-κB) from cytosol into the nucleus. CONCLUSION: The results suggest that TMP had a radioprotective effect through the NF-κB pathway to inhibit apoptosis, and it may be an effective candidate for treating radiation diseases associated with cell apoptosis. 展开更多
关键词 耐力 辐射防护 NF-ΚB 细胞凋亡
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复方丹参滴丸对急性高原病大鼠作用及机制 被引量:3
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作者 闫佳怡 阮盼盼 +6 位作者 张卓 葛运炫 高敬 谭红玲 肖成荣 高全胜 高月 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期2736-2739,共5页
目的探究复方丹参滴丸对急性高原病作用机制。方法采用低压低氧舱,模拟海拔5000 m缺氧24 h,建立急性高原病大鼠模型。SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和实验组。阳性药组灌胃30 mg·kg^(-1)乙酰唑胺、实验组灌胃给予72.9 mg... 目的探究复方丹参滴丸对急性高原病作用机制。方法采用低压低氧舱,模拟海拔5000 m缺氧24 h,建立急性高原病大鼠模型。SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和实验组。阳性药组灌胃30 mg·kg^(-1)乙酰唑胺、实验组灌胃给予72.9 mg·kg^(-1)复方丹参滴丸,对照组与模型组灌胃等体积蒸馏水,每日一次,连续给药7天,测定血气、生化指标等。结果对照组、模型组和实验组血氧饱和度分别为(98.97±3.52)%,(81.84±3.11)%,(96.53±3.99)%;肌酸激酶同工酶B含量分别为(328.1±148.7),(590.2±251.3)和(342.6±136.1)U·L^(-1);血糖分别为(7.9±1.4),(32.1±4.0)和(9.4±2.0)mmol·L^(-1)。上述指标,模型组与对照组相比,或实验组与模型相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论复方丹参滴丸可通过提高血氧饱和度,降低心肌酶,恢复代谢水平等起到促进大鼠高原习服的作用。 展开更多
关键词 复方丹参滴丸 急性高原病 习服 心肌酶 代谢水平
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