毕Ⅱ式联合Braun与单纯毕Ⅱ式吻合在腹腔镜远端胃癌根治术中疗效比较的Meta分析

目的系统评价BillrothⅡ式与BillrothⅡ式联合Braun吻合重建术在腹腔镜远端胃癌根治术中的临床疗效差异。方法计算机检索CNKI、VIP、万方数据库、PubMed、Embase、Web of Science等,收集国内外公开发表关于两种消化道重建方式在腹腔镜远端胃癌根治术中比较的临床应用研究。检索时限为2000年1月至2022年10月。对纳入的临床研究进行质量评价及数量提取,并采用Cochrane协作网提供的RevMan5.3统计软件进行Meta分析。结果共纳入9项符合标准的研究,共1483例患者。Meta分析结果显示:在腹腔镜远端胃癌根治术中使用单纯BillrothⅡ式吻合手术时间及消化道重建时间短、术中出血量少,但使用BillrothⅡ联合Braun吻合住院时间短、近期总并发症少、远期反流性疾病少、远期营养状况好,差异均有统计学意义(P<0.05)。而淋巴结清扫数量、首次排气排便时间及部分短期并发症,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜远端胃癌根治术中,与单纯BillrothⅡ吻合相比,应用BillrothⅡ式联合Braun重建消化道,虽延长手术时间并增加术中出血量,但能减少患者术后近、远期并发症,减少术后住院时间,改善患者远期营养状况,临床应用具有一定优势。

从瘀热理论探讨慢性前列腺炎病机源流及证治

慢性前列腺炎多为外邪侵入下焦,郁而化热,与血相搏而成瘀热所致。文中对“瘀热”理论的源流浅作梳理,分析“瘀热”在慢性前列腺炎病机中的核心地位,并以此为基探讨其对本病临证的指导意义,为中医治疗慢性前列腺炎提供理论依据以及证治思路。

贵州不同区域乌、红天麻质量差异分析

目的:通过分别建立贵州不同区域乌、红天麻HPLC指纹图谱共有模式,并测定贵州不同区域乌、红天麻中8种化学成分含量,初步分析贵州不同区域乌、红天麻化学成分质量差异。方法:采用HPLC法,色谱柱Waters-C18(4.6×250 mm;5μm)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.1%甲酸为流动相A;以乙腈为流动相B,流速1 mL/min;柱温30℃,波长270 nm,梯度洗脱,建立15批乌天麻、10批红天麻指纹图谱共有模式,利用聚类分析、主成分分析法、正交偏最小二乘法-判别分析、Person相关性分析等多元统计分析方法确定贵州不同区域乌、红天麻化学成分含量是否存在差异,同时测定腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、对羟基苯甲醛、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A 8个化学成分含量。结果:15批乌天麻相似度均在0.868~0.986,10批红天麻相似度在0.919~0.990,共标定15个共有峰,指认8个共有峰。根据聚类分析、主成分分析法和正交偏最小二乘法-判别分析发现贵州不同区域乌、红天麻具有明显的地域差异且不同区域天麻差异化学成分为腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷A;化学成分含量测定和Person相关性分析结果表明产地与天麻素、巴利森苷C、巴利森苷A含量具有相关性,黔产天麻不同品种乌、红天麻与腺苷、天麻素、巴利森苷C含量具有相关性。结论:贵州不同区域乌、红天麻在具有地域差异的同时还存在品种差异,其中腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A含量可能是贵州不同区域天麻质量差异成分,腺苷、天麻素、巴利森苷C含量可能是黔产天麻不同品种乌、红天麻的质量差异成分;该质量分析方法操作简单、稳定、可靠,可以为后续贵州不同区域乌、红天麻药材进一步质量评价研究提供理论参考。

冠心病心绞痛特色针法临床研究进展

冠心病心绞痛临床表现为胸前区阵发性、压榨性疼痛,多发生于劳动、情绪激动时。该病发病基础为冠状动脉粥样硬化从而导致的心肌缺血缺氧甚至坏死,病患有急性心肌梗死、心力衰竭的风险[1]。据调查显示,缺血性心脏病患者中,约有三分之一的缺血性心脏病病人都曾出现过心绞痛症状,在经过标准药物治疗后,也仍有超过五分之一的患者仍频繁心绞痛发作[2]。随着人口老龄化进程加快,冠心病心绞痛的高死亡率、高发病率对人们健康的危害和挑战不言而喻[3]。因此,对冠心病心绞痛的治疗研究也显得尤为重要。

天麻对贵州典型生境中土壤理化性质与肥力的研究

以种植天麻的土壤(TW)与未种植天麻的土壤(TB)为试材,采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、X射线衍射(XRD)、X射线荧光光谱(XRF)等方法对TW和TB进行表征,研究了天麻种植土壤的理化性质与肥力,以期为天麻轮作模式提供新思路。结果表明:其主要矿物相组成是以SiO_(2)为主的高岭石,主要组成成分为SiO_(2)、Al_(2)O_(3)、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、MgO、CaO等,种植天麻前后土壤的结构特征无显著改变。对TW和TB进行肥力研究发现,TW较TB含水量均升高,而pH则无显著差异,除木本丰富度高的4号德江沙溪土壤外,TW的土壤有机质含量(SOM)、阳离子交换量(CEC)、全氮、全磷、碱解氮、有效磷等含量较TB均有上升的趋势;全钾含量除2号德江石柱丫土壤外,其它的TW全钾含量较TB均有降低的趋势,速效钾1号和2号德江石柱丫TW含量高于TB,其它土壤速效钾含量相反,说明种植天麻在一定程度上提高了土壤的肥力。通过聚类分析发现Y1与Y3的壳斗科林为同一类群,Y2、Y5和Y6的杂木灌木混杂林与松树林为同一类群,而Y3的杂木林为同一类群,可见木本类型与木本的丰富程度均是影响土壤肥力的重要因素。该研究可以为天麻连作障碍现象探究和轮作作物选择提供数据支撑。

贵州中药材产地初加工发展现状及对策建议

为贵州中药材产地初加工建设提供参考,针对贵州中药材产业产地初加工现状,深入分析了产地初加工存在的问题;提出从推进中药材产地初加工基地建设、培育壮大初加工经营主体、破解资金难题、强化人才队伍建设和科技引领、拓宽中央农机购置补贴范围、强化中药材加工体系和质量安全监控体系建设、推进产地初加工与炮制一体化发展等方面提出加快推进中药材产地初加工发展的对策建议。

PI3K/Akt/mTOR信号通路在大鼠急性骨骼肌钝挫伤修复中的作用

目的:研究PI3K/Akt/mTOR信号通路在大鼠急性骨骼肌钝挫伤修复中的作用及变化趋势,探讨骨骼肌损伤修复的可能生物学机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组和损伤后1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组,每组各6只,采用自制打击装置建立腓肠肌钝挫伤模型。HE染色观察各组腓肠肌的形态结构;免疫印迹检测各组腓肠肌中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(P-Akt Ser473)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P-mTORSer2448)的蛋白表达量;逆转录实时定量聚合酶链反应检测腓肠肌中成肌分化抗原(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)的mRNA相对表达量。结果:(1)HE染色结果显示:损伤后1 d可见肌细胞变性坏死,炎性细胞浸润;损伤后3 d和5 d可见新生的成肌细胞和肌管;损伤后7 d和14 d可见新生肌细胞和胶原纤维。(2)免疫印迹结果显示:与正常对照组比较,损伤后1 d、3 d、14 d组的各蛋白表达量升高,差异无统计学意义(P>0.05);损伤后5 d组PI3K、Akt、P-Akt Ser473表达量显著升高(P<0.01),mTOR和P-mTORSer2448表达量显著升高(P<0.05);损伤后7 d组PI3K、P-Akt Ser473、mTOR、P-mTORSer2448表达量显著升高(P<0.05),Akt表达量显著升高(P<0.01)。(3)逆转录实时定量聚合酶链反应结果显示:与正常对照组比较,损伤后1 d组Myo D1和MyoG的mRNA表达量显著升高(P<0.05,P<0.01);损伤后3 d、5 d、7 d各组Myo D1和Myo G的mRNA表达量显著升高(P<0.01);损伤后14 d组MyoG的mRNA表达量显著升高(P<0.05),MyoD1的mRNA表达量升高,但无统计学意义(P>0.05)。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路具有时间规律性地正向调控骨骼肌钝挫伤后的自我修复,可以作为临床治疗及科学研究骨骼肌损伤的靶点。

半夏植株腐解液对8种作物的化感作用及化感物质成分分析

为探究半夏植株腐解液(PTDL)化感作用与连作障碍的关系以及半夏合理种植制度的建立,采用生物测试法研究半夏植株腐解液对8种作物种子萌发和幼苗生长的影响,并结合气质联用(GC-MS)技术对潜在的化感物质进行定性分析。结果表明,在物种水平,半夏植株腐解液对8种受试材料均有化感抑制作用,作用强度依次为生菜>莴笋>小麦>玉米>高粱>油菜>决明子>半夏。半夏植株腐解液的自毒作用呈低促高抑的浓度效应,0.01 g·m L-1是半夏植株腐解液产生显著自毒作用的临界浓度;半夏植株腐解液对生菜等7种作物的抑制作用强度与浓度呈正相关。乙醚萃取半夏植株腐解液所得活性组分中鉴定到30种化合物,其中2,6-二叔丁基对甲酚、芥酸酰胺和2,2'‐亚甲基双(4甲基-6-叔丁基苯酚)的相对含量合计占总体的60.35%,为化感物质,由此推测这是导致半夏连作障碍发生的重要原因之一。本研究为缓解和消除半夏连作障碍提供了理论依据。

不同间作模式下半夏产量及品质的综合评价

以半夏、魔芋、大豆及辣椒为试材,采用随机区组设计大田试验,研究单作半夏及半夏间作魔芋(半夏‖魔芋)、半夏间作辣椒(半夏‖辣椒)、半夏间作大豆(半夏‖大豆)3种间作处理对半夏产量及品质的影响。结果表明:在产量方面,与大豆间作半夏总产量最高,与辣椒间作半夏一级种产量最高,一级种与四级种呈此消彼长的态势,再加之变异系数较大,所以通过间作提高半夏一级种产出是提高半夏产量的有效途径;在品质方面,与魔芋间作半夏的可溶性蛋白质及浸出物含量最高,与辣椒间作半夏的可溶性糖、还原糖、琥珀酸及鸟苷含量最高,与大豆间作半夏的生物碱含量最高,但品质方面变异系数较小。通过主成分对产量及品质分析综合评分得出半夏‖大豆最高,半夏‖辣椒次之,可作为半夏高产优质栽培的理想间作搭配,为半夏产业化种植提供重要的理论依据。

半夏化感物质浸提液对8种作物的化感效应

为探明半夏连作障碍的化感物质释放途径和构建半夏高效种植制度提供参考,以半夏、生菜、莴笋、高粱、决明子、小麦、油菜和玉米8种作物为受试材料,采用生物测试方法研究半夏植株腐解液、半夏根系分泌物浸提液和半夏根际土壤浸提液对受试材料的化感效应。结果表明:半夏植株腐解液对受试材料均有强烈的化感抑制作用,半夏根际土壤和根系分泌物浸提液对受试材料有微弱的化感促进或抑制作用,3种浸提液化感作用强度为半夏植株腐解液>半夏根系分泌物浸提液>半夏根际土壤浸提液,半夏植株腐解液含有丰富的化感物质,可能是半夏自毒物质的主要来源之一,是半夏化感物质研究的可靠基础材料。半夏化感物质对受试材料的化感抑制作用强度表现为玉米>生菜>莴笋>小麦>高粱>油菜>半夏>决明子,决明子是8种受试材料中最耐化感胁迫的作物,可以用于构建半夏高效种植体系。在试验设置的浓度范围内,半夏化感物质对受试材料的抑制作用与其质量浓度呈正比,其中0.01g/mL是半夏自毒作用临界值,大于0.02g/mL就会产生强烈的自毒作用。

电针干预经TGF-β1/Smad3信号通路对失神经肌萎缩大鼠肌卫星细胞分化的影响

目的:观察电针干预对失神经肌萎缩大鼠腓肠肌中转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号通路以及与肌卫星细胞分化密切相关的成肌分化抗原(Myod1)、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、微小RNA206(Mir-206)表达的影响,探讨电针延缓失神经肌萎缩发展的可能机制。方法:将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)和电针组(n=8)。通过横断坐骨神经制备大鼠右后肢失神经肌萎缩模型。造模后对电针组大鼠术侧足三里、环跳穴进行电针干预,每次10 min,每日1次,每周6次,连续4周;假手术组和模型组大鼠不予电针干预。电针干预结束后计算各组大鼠的腓肠肌湿重比、HE染色测定腓肠肌纤维横截面积,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠腓肠肌中肌卫星细胞分化相关因子mRNA的相对表达量。结果:4周后,模型组大鼠腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积以及术侧腓肠肌中Smad7 mRNA相对表达量均低于假手术组和电针组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组术侧腓肠肌中HDAC4、TGF-β1、转化生长因子β受体1(TGF-βr1)、TGF-βr2、Smad3 mRNA相对表达量均高于假手术组和电针组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组术侧腓肠肌中Myod1、Mir-206 mRNA相对表达量高于假手术组,但低于电针组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针干预可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,下调HDAC4mRNA的表达,并上调Myod1、Mir-206 mRNA的表达促进肌卫星细胞的分化,从而延缓大鼠腓肠肌失神经肌萎缩的发展。

贵州产白及组培瓶苗分级标准及其验证

制定贵州产白及的质量分级标准,为贵州产白及组培瓶苗销售和栽培提供理论依据和借鉴,以通过组培方法获得的白及组培瓶苗为试验材料,对白及组培瓶苗农艺性状进行测定并作相关性分析、主成分分析、K-均值聚类分析,制定白及组培瓶苗质量分级初级标准,并以移栽存活率为考察指标对该标准进行验证。结果表明:白及组培瓶苗分级标准为Ⅰ级苗假鳞茎直径≥7mm,株高≥8cm;Ⅱ级苗假鳞茎直径≥5.5mm,株高≥4cm;Ⅲ级苗假鳞茎直径≥4mm,株高≥4cm;Ⅰ级苗、Ⅱ级苗、Ⅲ级苗和等外苗的存活率分别为91.67%、68.33%、56.67%和34.34%;各等级白及组培瓶苗在培养过程中相对叶绿素先下降再上升,到一定程度后都趋于稳定,等级之间差异较小;炼苗培养90d后,Ⅰ级苗的出芽率(70%)和单株的新芽数(1~2个/株)明显高于Ⅱ级苗和Ⅲ级苗,且根系发达。白及组培瓶苗质量越好,越容易适应外界生长条件,炼苗移栽后存活率越高。

针刺拮抗肌治疗中风偏瘫肢体痉挛研究进展

WHO发布的流行病学研究显示,中风是成人致死及致残的主要因素之一[1]。随着社会老龄化及心血管疾病危险因素的暴露,中风在我国的发病率呈现爆发增长的趋势[2],并以其发病率高、病死病残率高及治疗周期长的特点,对患者健康及其家庭生活质量造成严重负担[3-4]。肢体痉挛是中风致残的重要因素。大约有90%的中风偏瘫患者在恢复期会发生肌肉痉挛,过高的肌张力限制其肢体活动,导致患者残疾,使其生活质量降低[5]。

八月瓜果实营养成分分析和评价

为分析研究八月瓜果实的营养价值,本文用火焰原子吸收光谱法、液相色谱法、荧光分光光度法等实验方法对八月瓜果皮、果肉和种子中营养物质成分进行检测分析。基于检测分析可知,八月瓜果实具有很高的营养价值。其中,八月瓜果皮含有锰、钾矿物质营养成分,含量分别为0.645、342 mg/100 g;八月瓜果皮总氨基酸含量为0.313 mg/100 g,含15种氨基酸,其中必需氨基酸7种,必需氨基酸比重达到WHO/FAO提出理想蛋白质条件,必需氨基酸含量不及果肉均衡,营养价值比果肉低;含有少量的维生素E、果胶、蛋白质和脂肪。八月瓜种子含有多种矿物质营养成分,即含钾、磷、钙、铁矿物质营养成分,含量分别为586、180、191、2.85 mg/100 g;八月瓜种子富含多种矿物质营养成分,即富含锰、铜、镁矿物质营养成分,含量分别为:4.63、1.3、157 mg/100 g;脂肪酸含量为2.662 g/100 g,不饱和酸含量比重为76%。八月瓜果肉含有铜矿质营养成分,含量为0.25 mg/100 g;富含锰矿物质营养成分,含量为7.51 mg/100 g;八月瓜果肉总氨基酸量含量为0.419 mg/100 g,含16种氨基酸,其中必需氨基酸8种,必需氨基酸比重达到WHO/FAO提出理想蛋白质条件,必需氨基酸含量均衡,营养价值高;含有少量的维生素、脂肪、蛋白质和黄酮。本文可为八月瓜果的开发利用提供理论支持和技术指导,推动八月瓜理论研究进程。

综合评分法优选葛根药材产地加工方法

目的:优选黔产葛根最佳产地加工方法。方法:分别采用晒干、阴干、烘干法对不同切制规格的葛根药材进行加工处理,以葛根素、大豆苷、大豆苷元、水溶性浸出物、醇溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法优选葛根最佳产地加工方法。结果:不同产地加工方法对葛根的内在质量影响较大,综合评分值较大的加工方法主要为趁鲜切厚片(2~4 mm)后晒干(0.81)>趁鲜切块(1~2 cm)后60℃烘干(0.80)>趁鲜切块(1~2 cm)后晒干(0.79);而综合评分值最低的加工方法为趁鲜切段(4~6 cm)后阴干(0.03)。同一切制规格下,晒干和烘干对葛根质量影响差异不大。结论:葛根最佳的产地加工方法为:取原鲜品药材,除去杂质泥土,刮去外皮,趁鲜切厚片(2~4 mm)或块(1~2 cm)后,晒干或60℃烘干。该方法能较好地控制葛根药材的质量。

黔产魔芋质量标准研究

目的:完善黔产魔芋饮片的质量研究,初步制定其饮片标准。方法:根据饮片外观性状、显微鉴别及薄层鉴别法建立其定性鉴别方法,依据《中国药典》2020年版中相关方法对其水分、总灰分、浸出物含量定量测定,以总多糖为指标,通过系统的方法学考察,建立魔芋饮片的UV含量测定方法。结果:魔芋饮片性状、显微特征明显,薄层色谱与对照品相同位置处显相同颜色斑点。10批魔芋饮片样品的水分、总灰分、浸出物含量的范围分别为11.95%~13.52%、2.87%~6.77%、12.24%~16.94%,总多糖的含量为13.10%~18.30%。结论:研究建立魔芋饮片质量标准,为其开发利用提供参考。

电针对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞焦亡非经典途径的调控作用研究

目的:观察电针对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝细胞焦亡非经典途径的影响及其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(n=15)和高脂造模组(n=45),高脂造模组以定制高脂饲料喂养8周建立NAFLD模型。从造模成功的大鼠中选取30只随机分为模型组(n=10)、电针组(n=10)和非穴浅刺组(n=10),另从普通饮食组中随机选取10只大鼠作为对照组。电针组大鼠于双侧“丰隆”“肝俞”穴行电针干预,予疏密波,频率4 Hz/20 Hz,电流强度3 mA;非穴浅刺组大鼠于双侧“丰隆”“肝俞”穴旁5 mm处浅刺,电针刺激参数同电针组。两组干预均每日1次,每次20 min,每周5 d,连续干预4周。干预后,采用油红“O”染色法观察各组大鼠肝脏形态;ELISA法检测各组大鼠血清脂多糖(LPS)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;Western blot法检测各组大鼠肝脏组织消皮素D(GSDMD)、GSDMD末端氨基结构域(GSDMD-N)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-11、IL-1β、IL-18及TNF-α蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肝脏组织GSDMD、Caspase-11、IL-1β、IL-18及TNF-αmRNA表达。结果:模型组大鼠肝细胞胞质中可见大小不等的空泡,脂滴呈片状堆积;与模型组比较,电针组及非穴浅刺组大鼠肝细胞脂滴减少,肝脏脂肪变性程度降低。与对照组比较,模型组大鼠血清LPS、IL-1β、IL-18、TNF-α含量升高(P<0.01);肝脏组织GSDMD、Caspase-11、IL-1β、IL-18、TNF-α蛋白和mRNA表达升高(P<0.01),GSDMD-N蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组及非穴浅刺组大鼠血清LPS、IL-1β、IL-18、TNF-α含量降低(P<0.01),肝脏组织GSDMD、IL-1β、IL-18、TNF-α蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),肝脏组织GSDMD-N蛋白表达及Caspase-11 mRNA表达降低(P<0.01);电针组大鼠肝脏组织Caspase-11蛋白表达降低(P<0.01)。与非穴浅刺组比较,电针组大鼠血清LPS、IL-1β、IL-18、TNF-α含量降低(P<0.01);肝脏组织GSDMD、Caspase-11、IL-1β、IL-18蛋白和mRNA表达降低(P<0.01),GSDMD-N蛋白及TNF-αmRNA表达降低(P<0.01)。结论:电针干预可抑制NAFLD大鼠肝细胞焦亡,其作用机制可能与降低血清LPS含量,下调细胞焦亡非经典途径相关因子GSDMD、GSDMD-N、Caspase-11、IL-1β、IL-18、TNF-α表达相关。

基于Wnt/β-catenin信号通路探究推拿对KOA大鼠软骨降解和软骨细胞终末分化的影响

目的探讨推拿对膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的疗效及其对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。方法从32只无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠中随机选取8只作为对照组。剩余24只采用4%木瓜蛋白酶0.2 mL关节腔注射建立KOA模型。造模后随机分为模型组、推拿组和阳性药物组,每组各8只。采用Lequesne评分评估造模情况。造模成功后,对照组不进行任何干预;推拿组采用膝关节局部顺时针环形拇指揉法,纵向压力为3 N,频率控制为每分钟120-140次,每次15 min;最后屈伸关节10次。阳性药物组每日予以塞来昔布(每公斤体重24 mg)灌胃。各组干预每日1次,每周6 d,连续4周。治疗结束后对大鼠再次进行Lequesne评分评估;苏木素-伊红(HE)染色、番红O-固绿染色观察软骨形态结构;改良Mankin评分进行病理评分;酶联免疫吸附法检测软骨II型胶原C端肽(CTX-II)和寡聚基质蛋白(COMP);免疫印迹法检测软骨组织Wnt信号蛋白4、β-连锁蛋白、基质金属蛋白酶13(MMP-13)和骨形态发生蛋白2(BMP-2);免疫组化检测软骨细胞X型胶原(ColX)阳性细胞率。结果推拿组和阳性药物组Lequesne评分均优于模型组(P<0.01),HE染色、番红O-固绿染色形态结构及改良Mankin评分同样优于模型组(P<0.01)。与对照组相比,模型组血清中的CTX-II和COMP含量显著上升(P<0.01);软骨组织中Wnt4、β-catenin、MMP-13和BMP-2蛋白表达水平显著上升(P<0.01);软骨细胞ColX阳性细胞率显著上升(P<0.01)。与模型组相比,推拿组和阳性药物组CTX-II和COMP含量显著下降(P<0.01);Wnt4、β-catenin、MMP-13和BMP-2蛋白表达显著下降(P<0.01);软骨细胞ColX阳性细胞率显著下降(P<0.01)。与阳性药物组相比,推拿组CTX-II、COMP含量和Wnt4、β-catenin、MMP-13和BMP-2蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01);软骨细胞ColX阳性细胞率显著下降(P<0.01)。结论推拿可以减缓KOA的退变,其机制可能与通过下调Wnt/β-catenin信号通路降低MMP-13和BMP-2蛋白表达,减少软骨细胞外基质降解,减缓细胞终末分化有关。

推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠炎症、氧化应激及细胞自噬相关因子的影响

目的 观察推拿对大鼠骨骼肌急性钝挫伤修复过程中炎症、氧化应激、细胞自噬相关因子的影响，探讨推拿治疗骨骼肌损伤可能的作用机制。 方法 采用随机数字表法将42只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为正常组（n=6）、模型组（n=18）、治疗组（n=18），模型组和治疗组再根据取材的时间点随机分为1d、7d、14d三个亚组（n=6）。模型组和治疗组用自备打击器建立腓肠肌急性钝挫伤模型，治疗组于造模48h后开始推拿治疗，每日1次，每次15min。各组分别于各自的取材时间点心脏采血后取损伤侧腓肠肌，苏木精-伊红染色（HE）观察损伤部位腓肠肌形态学变化；酶联免疫法（ELISA）检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E2（PGE2）表达水平；紫外-可见分光光度法检测各组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）含量；Western blotting检测各组大鼠腓肠肌自噬微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Bcl-2同源结构域蛋白Beclin1、泛素结合蛋白P62表达水平。 结果 骨骼肌损伤修复过程中，HE染色显示，各时间点模型组较正常组细胞形态崩塌，肿胀明显，7d和14d亚组有成肌细胞核出现。各时间点治疗组较模型组恢复更好，新生肌细胞较多，形态更趋正常。ELISA结果显示，模型组各取材时间点较正常组同取材时间点血清促炎因子明显升高，但治疗组1d和7d组较模型组同取材时间点显著降低，差异有统计学意义（P〈0.05）。紫外-可见分光光度法结果显示，模型组血清SOD和MDA含量较正常组明显升高，治疗组SOD较模型组同取材时间点显著升高，差异有统计学意义（P〈0.05），MDA较模型组同取材时间点显著降低，差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blotting结果显示，模型组各取材时间点较正常组腓肠肌LC3（II/I）、Beclin1明显降低，P62明显升高，而治疗组较模型组同取材时间点LC3（II/I）、Beclin1显著升高，P62显著降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。 结论 骨骼肌损伤后，其炎症及氧化应激水平明显升高，细胞自噬活性明显降低，通过推拿治疗能有效减轻机体炎症反应，降低其氧化应激损害，提高组织细胞自噬活性，从而加速受损组织的修复，这可能是推拿促进骨骼肌损伤修复的机制之一。

推拿联合跑台训练对急性骨骼肌损伤大鼠肌蛋白代谢相关因子的影响

目的:观察推拿、跑台训练及联合干预对急性骨骼肌损伤大鼠腓肠肌蛋白代谢信号通路相关分子雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化(p-)mTOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、p-p70S6K、Smad2/3、肌生成抑制素(MSTN)表达的影响,探讨骨骼肌修复的可能机制。方法:采用随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为正常组、自然恢复组、推拿组、跑台组及联合组。通过打击器制备大鼠右后肢急性骨骼肌损伤动物模型。于造模24 h后推拿组予以患侧拇指揉法干预,跑台组予以跑台训练,联合组则予以推拿及跑台训练联合干预;各组大鼠每周干预5次,连续干预3周。于干预结束后进行行为学检测,分析各组大鼠步态并统计落入电网次数,采用HE染色测定腓肠肌纤维横截面积,采用免疫印迹法检测mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、Smad2/3蛋白相对表达量,采用实时荧光定量PCR法检测腓肠肌中MSTN mRNA相对表达量。结果:电网打击实验结果显示,推拿组、跑台组及联合组被打击次数均较自然恢复组明显减少(P<0.05)。推拿组、跑台组及联合组肌纤维横截面积、患侧腓肠肌湿重均较自然恢复组明显增加(P<0.05);且跑台组、联合组肌纤维横截面积亦较推拿组明显增大(P<0.05)。与正常组比较,自然恢复组、推拿组、跑台组及联合组mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),Smad2/3蛋白相对表达量和MSTN mRNA相对表达量均明显降低(P<0.05);与自然恢复组比较,推拿组、跑台组及联合组mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),Smad2/3蛋白相对表达量及MSTN mRNA相对表达量均明显减少(P<0.05);与推拿组比较,跑台组及联合组mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白相对表达量均明显增加(P<0.05),Smad2/3蛋白相对表达量及MSTN mRNA相对表达量均明显降低(P<0.05)。结论:早期推拿、跑台训练及联合干预均可能通过抑制Myostatin-Smad2/3信号通路,促进mTOR-p70S6K信号通路来增加急性骨骼肌损伤大鼠肌蛋白合成,促进肌肉肥大,改善损伤后腓肠肌结构及功能,且以跑台训练及跑台训练联合推拿干预的疗效较显著。