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用单性结实基因2A11-iaaM转化罗汉果的研究 被引量:1
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作者 周琼 胡姗姗 +5 位作者 郝庆林 莫燕梅 李刚 唐美琼 辛佳佳 宁弋珍 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1614-1625,共12页
为了实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化,该研究利用pBI121-Gus构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因(2A11-iaaM)过量表达载体,以罗汉果雌株叶盘为材料,采用农杆菌介导法建立罗汉果高效遗传转化体系,转化... 为了实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化,该研究利用pBI121-Gus构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因(2A11-iaaM)过量表达载体,以罗汉果雌株叶盘为材料,采用农杆菌介导法建立罗汉果高效遗传转化体系,转化和创制单性结实罗汉果种质,通过基因特异引物对的PCR扩增,初步检测出转基因阳性植株,将之移栽大田,观察转基因植株的单性结实性的表现。结果表明:构建罗汉果单性结实性相关的pBAI-Gus植物双元表达载体获得成功;建立了农杆菌介导的罗汉果叶盘遗传转化优化体系,即农杆菌菌液OD_(600)值为0.3~0.5,侵染10 min,最优选择培养基为MS+TDZ 0.7 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1)+Kan 5 mg·L^(-1)+Cef 300 mg·L^(-1);经PCR鉴定共获得4株转基因阳性雌株;将阳性植株扩繁后移栽田间,经田间调查发现,24株阳性扩繁植株中有5株正常开花,占总植株数的20.8%,且其子房未经人工授粉发育成幼果,表现单性结实性。在载体构建和农杆菌介导的罗汉果遗传转化体系优化的基础上,将外源单性结实相关嵌合基因整合进罗汉果基因组并得到表达,为后续研究单性结实罗汉果的遗传生理,创制转基因罗汉果单性结实新种质,以及克服其产业化中需要人工授粉和无籽化提供了理论和应用基础。 展开更多
关键词 罗汉果 单性结实 转基因 遗传转化
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罗汉果分子生物学研究进展
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作者 唐美琼 李刚 +3 位作者 胡营 覃芳 闫志刚 韦荣昌 《江苏农业科学》 2020年第8期13-18,共6页
罗汉果是广西著名的道地药材,也是我国特有的药食两用植物,具有重要的药用价值和开发前景。近年来,罗汉果分子生物学的研究涉及罗汉果种质资源鉴定、功能基因克隆、抗病性育种等方面,这些技术研究内容主要包括罗汉果性别鉴定、遗传多样... 罗汉果是广西著名的道地药材,也是我国特有的药食两用植物,具有重要的药用价值和开发前景。近年来,罗汉果分子生物学的研究涉及罗汉果种质资源鉴定、功能基因克隆、抗病性育种等方面,这些技术研究内容主要包括罗汉果性别鉴定、遗传多样性、转录组特征及功能基因克隆等。应用现代分子生物学技术已实现了罗汉果幼苗性别鉴定,全面揭示了其遗传多样性及品种间的亲缘关系;通过构建罗汉果转录组数据库,促进了对该植物的果实生长发育和代谢调控相关功能基因的研究;利用RNAi技术有望获得抗病毒病的罗汉果转基因植株。今后可利用罗汉果基因组数据,深入挖掘基因资源,研究候选基因的功能,明确罗汉果果实生长发育过程中的基因调控网络,利用基因工程手段促进罗汉果种质资源开发及分子遗传育种发展。 展开更多
关键词 罗汉果 分子标记 遗传差异 基因克隆 转基因
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道地中药材栽培及产地加工技术规范——广西罗汉果 被引量:4
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作者 韦荣昌 唐美琼 +4 位作者 黄芩芬 潘丽梅 闫志刚 吴庆华 覃芳 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第4期815-818,共4页
以《中药材生产质量管理规范》(中药材GAP)为指导原则,对广西罗汉果道地中药材栽培及产地加工的术语和定义、道地产区生态环境、选地整地、搭棚、组培苗培育、定植、田间管理、采收、产地加工、包装、贮存进行了规定,为提高广西罗汉果... 以《中药材生产质量管理规范》(中药材GAP)为指导原则,对广西罗汉果道地中药材栽培及产地加工的术语和定义、道地产区生态环境、选地整地、搭棚、组培苗培育、定植、田间管理、采收、产地加工、包装、贮存进行了规定,为提高广西罗汉果产量和质量提供技术保障。 展开更多
关键词 道地中药材 广西罗汉果 栽培 产地加工
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罗汉果组培苗扦插繁殖技术研究 被引量:1
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作者 韦荣昌 韦莹 +4 位作者 闫志刚 吴庆华 施力军 覃芳 唐美琼 《中国南方果树》 北大核心 2019年第3期76-79,共4页
采用正交试验设计研究了扦插温度、基质、植物生长调节剂种类及其浓度对罗汉果组培苗扦插效果的影响。结果表明,成活因子和长势因子分别为第1、2主成分,2个因子的方差累计贡献率在77%以上;扦插温度、植物生长调节剂种类对扦插苗的影响较... 采用正交试验设计研究了扦插温度、基质、植物生长调节剂种类及其浓度对罗汉果组培苗扦插效果的影响。结果表明,成活因子和长势因子分别为第1、2主成分,2个因子的方差累计贡献率在77%以上;扦插温度、植物生长调节剂种类对扦插苗的影响较大,扦插基质、植物生长调节剂浓度影响次之。扦插效果最佳组合为吲哚丁酸200 mg/L+25℃+细河砂。 展开更多
关键词 罗汉果 扦插繁殖 成活率 主成分分析
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A woman by successful IVF and caesarean delivery without complications in autosomal dominant centronuclear myopathy
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作者 LI Shenmei LI Yuan +2 位作者 tang meiqiong DAI Yunyun GAO Yan 《中西医结合护理(中英文)》 2020年第8期343-345,共3页
Autosomal-dominant centronuclear myopathy is a rare hereditary disease in adolescents,mainly involving the distal muscles of the lower extremity.It is extremely rare in pregnancy.This study presented a case of a woman... Autosomal-dominant centronuclear myopathy is a rare hereditary disease in adolescents,mainly involving the distal muscles of the lower extremity.It is extremely rare in pregnancy.This study presented a case of a woman by successful IVF and caesarean delivery without complications in autosomal dominant centronuclear myopathy.This report also reviewed the clinical spectrum of CNM and its management,which resulted in the delivery of a healthy infant.It is important that the clinician has a clear understanding of the clinical spectrum of CNM,the available methods for perinatal diagnosis,and optimal antenatal care.A multidisciplinary team approach is emphasized,with specific reference to the method of analgesia and anesthesia during labor and route of delivery. 展开更多
关键词 autosomal dominant centronuclear myopathy pregnancy woman vitro fertilization and embryo transfer caesarean delivery
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基于社会生态系统理论的产妇出院后应对困难的质性研究
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作者 刘艳 张莉莉 +5 位作者 唐美琼 张艺媛 唐奕 彭岚岚 徐云云 高玲玲 《中华现代护理杂志》 2023年第23期3155-3160,共6页
目的基于社会生态系统理论探讨产妇出院后应对困难情况。方法 2022年3—5月,采用目的抽样法选取桂林医学院附属医院的23名产妇为研究对象。采用现象学研究方法对其进行面对面半结构式访谈。采用内容分析法分析资料,提炼主题。结果提炼出... 目的基于社会生态系统理论探讨产妇出院后应对困难情况。方法 2022年3—5月,采用目的抽样法选取桂林医学院附属医院的23名产妇为研究对象。采用现象学研究方法对其进行面对面半结构式访谈。采用内容分析法分析资料,提炼主题。结果提炼出3个主题和11个亚主题,微观层面:照护压力和自身机体恢复问题并存(母乳喂养困难、育儿无力感、焦虑、产妇机体恢复困扰、睡眠剥夺感凸显、照护婴儿及自身康复知识不足);中观层面:生活氛围变化(照顾人员关系冲突、获得家庭支持感和联结感缺乏);宏观层面:社会环境交互作用(居住环境未达到期望、经济负担感、期望实时性的专业指导)。结论产妇出院后应对困难复杂多样。医护人员应借助信息技术、家庭同步赋能、社会工作者介入等方法满足产妇的需求,减轻其出院后应对困难程度。 展开更多
关键词 产妇 应对困难 社会生态系统理论 质性研究 内容分析法
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镉胁迫下草果实时荧光定量PCR内参基因筛选 被引量:1
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作者 姚李祥 潘春柳 +3 位作者 余丽莹 乔柱 唐美琼 韦范 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第11期3681-3687,共7页
为筛选镉胁迫下草果不同组织中稳定表达的内参基因,采用实时荧光定量PCR法,以50μmol/L镉溶液培养的草果幼苗为试验材料,对GAPDH、tubulin、60S、actin、EIF、EIF2α、UBC、UBCE2、UBQ共9个看家基因在草果根、茎、叶中的表达情况进行检... 为筛选镉胁迫下草果不同组织中稳定表达的内参基因,采用实时荧光定量PCR法,以50μmol/L镉溶液培养的草果幼苗为试验材料,对GAPDH、tubulin、60S、actin、EIF、EIF2α、UBC、UBCE2、UBQ共9个看家基因在草果根、茎、叶中的表达情况进行检测,并采用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件及在线工具RefFinder,对9个候选内参基因的表达稳定性进行分析。结果表明,各候选内参基因在草果根、茎、叶中的表达丰度存在较大差异,Ct值为15~28,其中UBQ的Ct值最小,其基因表达丰度较高。geNorm、NormFinder和BestKeeper 3个软件的分析结果略有不同,RefFinder综合分析结果显示EIF是最稳定表达的内参基因。本研究确定镉胁迫下草果RT-qPCR分析的最适内参基因为EIF,对今后镉胁迫下草果相关基因的表达分析奠定基础。 展开更多
关键词 草果(Amomum tsaoko) 内参基因 实时荧光定量PCR 镉胁迫
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茉莉酸甲酯对罗汉果SQS、CS和CAS基因表达的影响 被引量:3
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作者 韦荣昌 覃芳 +3 位作者 唐美琼 闫志刚 韦莹 施力军 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第2期42-47,共6页
以人工授粉后50d的罗汉果果实为试材,喷施不同浓度的茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA),诱导不同时间后取样并提取RNA,采用实时荧光定量PCR测定罗汉果甜苷V代谢途径3个关键酶(角鲨烯合酶:squalene synthase,SQS;葫芦二烯醇合酶:cucurbi... 以人工授粉后50d的罗汉果果实为试材,喷施不同浓度的茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA),诱导不同时间后取样并提取RNA,采用实时荧光定量PCR测定罗汉果甜苷V代谢途径3个关键酶(角鲨烯合酶:squalene synthase,SQS;葫芦二烯醇合酶:cucurbitadienol synthase,CS;环阿乔醇合酶:cycloartenol synthase,CAS)基因的相对表达量,以期为掌握SQS、CS和CAS的表达规律,进而为提高罗汉果甜苷V的代谢提供参考依据。结果表明:MeJA对SQS和CS的表达均有促进作用,在200μmol·L^(-1)的MeJA诱导后12h和24h,SQS和CS的相对表达量最高,分别为处理前的11.12倍和9.82倍;MeJA能抑制CAS的表达,在100μmol·L^(-1)的MeJA处理后6h,CAS相对表达量降至最低,仅为对照的0.13倍。 展开更多
关键词 罗汉果 茉莉酸甲酯 角鲨烯合酶 葫芦二烯醇合酶 环阿乔醇合酶
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草果AtNCED基因克隆、表达和植物表达载体构建 被引量:2
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作者 潘春柳 姚绍嫦 +4 位作者 黄燕芬 唐美琼 朱艳霞 董青松 余丽莹 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1520-1528,共9页
9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)是ABA生物合成的限速酶。诸多研究表明NCED基因表达量的变化与ABA含量显著相关,在种子休眠过程中发挥重要作用。为探究草果AtNCED基因的序列特征和功能,本研究... 9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)是ABA生物合成的限速酶。诸多研究表明NCED基因表达量的变化与ABA含量显著相关,在种子休眠过程中发挥重要作用。为探究草果AtNCED基因的序列特征和功能,本研究以草果(Amomum tsaoko Crevost et Lemarie)种子转录组为基础,采用RT-PCR技术克隆了一个AtNCED基因。该基因全长2 372 bp,包含一个1 830 bp的开放阅读框(open reading frame, ORF),编码610个氨基酸。生物信息学分析显示,AtNCED基因编码的蛋白在N-末端包含典型的叶绿体转运肽序列,在催化结构域含有4个高度保守的组氨酸残基。AtNCED蛋白与芭蕉科马来西亚蕉同源性较高,与其他单子叶植物处在同一进化分支。实时荧光定量PCR分析结果表明,AtNCED基因表达量随着层积时间的增加逐渐下降,该基因可能正向调控种子休眠,在草果种子休眠诱导与维持中发挥重要作用。进一步地,利用同源重组方法,成功构建了pBI121-AtNCED过表达载体,并转化至农杆菌EHA105。该研究结果为弄清ABA激素信号在种子休眠中的调控作用提供了帮助。 展开更多
关键词 草果 AtNCED基因 克隆 表达载体构建
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罗汉果生长素响应因子SgARF8基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 郝庆林 郑珊 +6 位作者 李刚 李正文 唐美琼 周琼 胡姗姗 宁弋珍 裴艳艳 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1784-1791,共8页
基于转录组Unigene序列信息,结合RACE技术,克隆罗汉果生长素响应因子基因Sg ARF8的全长。采用同源克隆法获取罗汉果Sg ACTIN基因,以该基因为内参,通过实时荧光定量PCR检测Sg ARF8在罗汉果不同器官组织中的时空表达。结果表明:获得Sg ARF... 基于转录组Unigene序列信息,结合RACE技术,克隆罗汉果生长素响应因子基因Sg ARF8的全长。采用同源克隆法获取罗汉果Sg ACTIN基因,以该基因为内参,通过实时荧光定量PCR检测Sg ARF8在罗汉果不同器官组织中的时空表达。结果表明:获得Sg ARF8基因c DNA全长序列3 266 bp,Gen Bank登录号KU949383,最长ORF为2 547 bp,编码848 aa的蛋白质,预期分子量94.42 k D,等电点5.67,该编码蛋白具有DBD、CTD和MR等转录因子ARF特征性结构域,其5'端和3'端区域比较保守;克隆得到罗汉果内参基因Actin基因部分序列,命名为Sg ACTIN,Gen Bank登录号为KU949382;实时荧光定量分析表明,罗汉果Sg ARF8在茎、叶、芽、雌蕊、雄蕊、幼果中普遍表达,并且在雌蕊和15 d幼果中表达量较高。可见Sg ARF8广泛参与罗汉果生长发育调节过程,尤其与雌蕊和幼果的器官形态建成密切相关,也暗示该基因在罗汉果性别调控和单性结实遗传改良中具有重要应用价值。 展开更多
关键词 罗汉果 生长素响应因子 SgARF8 克隆 基因表达
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