24小时快速眼动睡眠剥夺对青少年期C57BL/6J小鼠空间学习记忆能力和海马一氧化氮水平的影响研究

目的探讨24 h快速眼动睡眠剥夺（REMSD）对青少年期C57BL/6J小鼠空间学习记忆能力和海马一氧化氮（NO）水平的影响。方法 2014年1月—2015年1月选取45只青少年期（3~4周龄）SPF级雄性C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组、宽平台组和REMSD组,各15只。将REMSD组小鼠置于水平台睡眠剥夺箱建立REMSD模型,宽平台组小鼠置于假水平台睡眠剥夺箱建立快速眼动睡眠假剥夺模型。通过3轮Morris水迷宫定位航行实验测试小鼠学习能力,记录逃避潜伏期;Morris水迷宫空间搜索实验测试小鼠记忆能力,记录小鼠穿台次数,在靶象限停留时间以及在靶象限游动距离。颈椎脱臼处死小鼠,分离海马,采用NO检测试剂盒检测NO水平。结果REMSD组小鼠出现多动,毛发潮湿凌乱且光泽度差,四肢充血,烦躁不安,易激惹,兴奋性增强。各组小鼠3轮Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中,REMSD组逃避潜伏期均较对照组、宽平台组缩短（P〈0.05）。各组小鼠穿台次数比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中,REMSD组小鼠穿台次数多于对照组和宽平台组（P〈0.05）。对照组、宽平台组、REMSD组海马NO水平分别为（43.6±8.5）、（45.8±9.1）、（54.2±5.8）μmol/L,差异有统计学意义（F=7.460,P=0.002）;其中,REMSD组小鼠海马NO水平高于对照组和宽平台组（P〈0.05）。结论青少年期小鼠REMSD 24 h后,学习记忆能力提高,可能与海马NO水平升高有关。

三阴性乳腺癌组织DJ-1和PTEN及AR表达与预后相关性分析

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中帕金森相关蛋白(DJ-1)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)和雄激素受体(AR)的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法:免疫组织化学SP法检测DJ-1、PTEN和AR蛋白在68例TNBC组织和30例正常乳腺组织中的表达,并分析其与TNBC临床病理因素的关系,及其对预后的影响。结果:TNBC组织中DJ-1阳性表达率为70.6%(48/68),AR阳性表达率为36.8%(25/68)。正常乳腺组织中DJ-1阳性表达率为6.7%(2/30),无AR表达。TNBC组织中DJ-1、AR阳性表达率明显高于正常乳腺组织,χ2值分别为7.09和6.72,P值分别为0.002和0.005。TNBC组织中PTEN阳性表达率为27.9%(19/68),正常乳腺组织中为100.0%。TNBC组织中PTEN阳性表达率显著低于正常乳腺组织,χ2=5.94,P=0.008。DJ-1、PTEN和AR表达在TNBC组织中的表达与腋窝淋巴结转移、组织学分化和TNM分期密切相关,P<0.01。TNBC组织中DJ-1和AR的表达均与PTEN蛋白的表达呈负相关,r=-0.529,P=0.009;而两者之间呈正相关,r=0.496,P=0.011。在5年无瘤生存率和5年总生存率方面,DJ-1和AR表达阴性者明显高于阳性者,P<0.01;PTEN表达阳性者高于阴性者,P<0.01。Cox回归多因素分析结果表明,腋窝淋巴结转移、DJ-1、PTEN及AR表达是影响TNBC患者5年无瘤生存率的独立预后因素,P<0.05。结论:TNBC组织中DJ-1和AR过表达,而PTEN表达下调,三者均为TNBC患者预后的独立危险因素,参与调控TNBC的发生与预后。

DJ-1基因siRNA对三阴性乳腺癌细胞侵袭和迁移影响的研究

目的:探讨DJ-1基因siRNA对三阴性乳腺癌细胞体外侵袭和迁移能力的影响。方法:设计DJ-1基因的小分子干扰RNA(siRNA)片段,脂质体介导转染入三阴性乳腺癌细胞株MAD-MB-23l,转染分3个组:A组(空白对照control组)、B组(转染非特异性对照Scramble组)、C组(转染si DJ-1组)。应用Western blotting免疫印迹法检测转染前后DJ-1表达水平;运用细胞迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:C组DJ-1蛋白的表达强度弱于A组和B组(t=9.831,P<0.05),而A组与B组比较,DJ-1蛋白表达水平则无明显差异(t=1.629,P>0.05)。细胞迁移实验中,A组细胞为(218.37±12.75);B组的细胞为(214.46±11.38);C组的细胞为(129.65±8.59),C组细胞明显少于A组和B组(t=10.927,9.984,P<0.05),而A组与B组之间,差异无统计学意义(t=0.512,P>0.05)。细胞侵袭实验中,A组细胞为(127.28±12.65);B组的细胞为(123.06±13.08);C组的细胞为(52.85±9.58),C组穿过人工基底膜的细胞明显少于A组和B组(t=7.927,8.643,P<0.05),而A组与B组之间,差异无统计学意义(t=0.627,P>0.05)。结论:DJ-1基因siRNA可抑制三阴性乳腺癌细胞侵袭和迁移。