3—甲基胆蒽对原代培养大鼠肝细胞细胞色素P4501A1／2的诱导作用

目的：研究3—甲基胆蒽(3—methylcholanthrene，3—MC)对原代培养大鼠肝细胞细胞色素P4501A1／2的诱导作用，并探讨其时间—效应和剂量—效应关系。方法：原位两步胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞，无血清条件下培养细胞，并用不同剂量的3—MC诱导肝细胞24h或48h。乙氧基试卤灵(ethoxyresomn，EOR)为CYP1A酶活性探针药，高效液相色谱法(HPLC)测定试卤灵(resomfin，RSF)浓度。Taqman RT—PCR法测定CYP1A1基因表达，Westem bolt法分析CYP1A酶蛋白表达。结果：实验条件下对照组和3—MC诱导组的CYP1A1基因和酶蛋白，CYP1A1／2酶活性均可被检测。3—MC对原代培养大鼠肝细胞CYP1A1／2基因及蛋白表达、酶活性的诱导作用呈明显的剂量依赖性。结论：3—MC对大鼠原代培养肝细胞的CYP1A1／2有明显的诱导作用。