2种HPLC-柱后衍生化-荧光检测法测定陈皮中黄曲霉毒素的比较

目的:对陈皮中黄曲霉毒素测定的2种柱后衍生化方法(碘衍生化和电化学衍生化)进行比较。方法:样品经过免疫亲和柱净化,HPLC-柱后衍生化-荧光检测器检测。采用Diamonsil ODS C18(5μm,4.6 mm×200 mm)色谱柱,荧光检测,激发波长360 nm,发射波长450 nm。柱后衍生化系统(1)碘衍生化:以甲醇-乙腈-水(25∶18∶57)为流动相,流速0.8 mL.min-1;衍生化溶液为0.05%碘溶液,流速0.3 mL.min-1,衍生化反应温度70℃;(2)电化学衍生化:以甲醇-乙腈-水(20∶20∶60)为流动相(每1 L流动相中加入溴化钾120 mg和4 mol.L-1硝酸350μL),流速1.0 mL.min-1。结果:碘衍生化,黄曲霉毒素G2、B2在2～36 pg,黄曲霉毒素G1、B1在2～120 pg范围内线性关系良好;电化学衍生化,黄曲霉毒素G2、B2在1.2～36 pg,黄曲霉毒素G1、B1在2～120 pg范围内线性关系良好,r>0.9997;回收率在60%～101%之间。结论:2种衍生化方法的测定结果比较接近,且电化学衍生化方法较灵敏,操作简单、分析速度快,也适用于陈皮中黄曲霉毒素的测定。