32株麻风菌rpoT基因和SNP基因分型

目的:了解中国麻风菌株rpoT和SNP基因型特征及地理分布。方法:从32例中国麻风病患者皮损组织中提取DNA。rpoT基因分型采用PCR-直接测序;SNP分型采用PCR-直接测序和PCR-限制性片段长度多态性分析。结果:32份中国菌株的SNP均为3型。32份菌株中,来自我国东南部和藏族地区的12份菌株rpoT基因为4个拷贝;来自云贵川的20份菌株rpoT基因为3个拷贝。结论:32份菌株均为SNP3型,但我国不同地区rpoT基因型不一致,有待进一步研究。

云南省丘北县麻风菌株基因分型研究

目的:验证云南省丘北县麻风菌株与流行病学间的关联性。方法:对2003-2007年发现的106例新麻风患者菌株进行了6个VNTR位点分型,以系统发育树分析与流行病学的关联性。结果:丘北菌株依据(GTA)9等位基因型可分为两大菌群。第一枝由(GTA)9位点从9到13个重复数组成的A、B和C聚集株,主要分布在该县北部和西北部;第二枝由(GTA)9重复数高达20以上的D、E菌株组成,主要分布在中部和东南部。A至F聚集株内,至少有两个或以上有多个患者的家庭。第一菌群内患者间有明显的流行病学关联,但第二菌群内患者则缺乏关联性。结论:(GTA)9等位基因高度多态菌群来源与异质性的原因不清楚。以家庭和邻居关联的麻风病传播在丘北县很常见,有多个患者的家庭,感染菌株可能来自相同的传播链。

MDT治疗期间麻风菌VNTR位点的稳定性

目的:评价MDT化疗前和皮肤组织液中麻风菌VNTR位点的稳定性。方法:分别从12例MB新发患者的皮损组织、皮肤切刮组织液中提取麻风菌DNA。4例患者的DNA标本采用多重PCR扩增17个VNTR位点,8例患者扩增5个VNTR位点,同时常规PCR扩增2个VNTR位点。经直接测序确定VNTR位点重复拷贝数,用Genemapper软件进行片段长度分析。结果:4例患者的皮损和组织液DNA标本的17个VNTR位点,不仅在MDT治疗前,等位基因型,即拷贝数没有差异,而且治疗期间每2个月连续取材的DNA标本的17个位点也高度相似。另8例患者,4例患者的麻风菌在这5个VNTR位点上无等位基因的变化。结论:药物治疗对VNTR位点的稳定性无大影响,可能由于MDT后大部分麻风菌停止繁殖,DNA终止复制。

云南省丘北县麻风持续传播影响因素的研究

目的探讨云南省丘北县多种药物联合化疔实施25年后麻风仍持续传播的影响因素。方法分别采用ELISA、PCR检测高流行区患者与家庭内接触者、普通人群血清中麻风菌特异性PGL-1抗体以及鼻分泌物中的麻风菌，采用PCR方法检测疫村环境水中的麻风菌。采用数目可变的串联重复序列基因分型方法探讨麻风菌传播途径及传播链等。结果在2001年以前从麻风患者家庭成员中检测到的比例低，而延迟期〉2年患者的检出比例高。2001年后防治工作加强使这两个指标改进，但麻风发现率仍一直维持在4／10万至5／10万。疫村人群PGL-1抗体阳性率为20％～30％，主要感染人群为青少年；不仅从患者、家内接触者的鼻分泌物与环境水中检出麻风菌，且与未经治疗患者的皮肤组织和鼻分泌物中麻风菌基因型一致。菌株分型证实该县北部地区不仅有多个高发家庭聚集，而且家庭内患者的菌株基因型一致。在北部地区基因型匹配菌株的比例高于南部地区。结论丘北县麻风在家庭内和疫村中的传播严重，疫村环境水中存在麻风菌等是影响该病持续传播的重要因素。