人腺病毒分子生物学常用检测技术

腺病毒是引起人类呼吸道疾病的主要病毒之一,了解目前最有效、快捷的腺病毒检测方法有助于加强腺病毒感染的监测,及时发现疫情并掌握病毒流行趋势,为迅速采取有效措施提供保障。本文对目前实验室、临床常用的人腺病毒分子生物学检测方法的原理、特点和应用等进行了综述。

人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白的克隆表达和纯化

目的克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础。方法以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至p QE32质粒,在大肠杆菌表达系统中表达带有组氨酸标签的重组蛋白片段,利用镍亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果构建出重组表达质粒,通过测序验证了克隆结果的正确性;在大肠杆菌表达体系中获得了高效表达。结论成功表达并获得了纯化的人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白片段。