公石松多糖的提取、结构表征及生物活性研究

以公石松为原料,通过水提醇沉法获得公石松多糖。利用高效凝胶渗透色谱、柱前衍生化HPLC法、紫外、红外光谱、刚果红实验等对公石松多糖的结构进行了表征,通过抗氧化实验评估公石松多糖的体外抗氧化活性,采用MTT法初步探讨了其对肝癌细胞HepG2、肝细胞LO2的抑制效果。结果表明,公石松多糖的相对分子量分布于50325~115144 Da,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,具有三螺旋结构。体外抗氧化活性测定显示,公石松多糖对DPPH、ABTS、羟基自由基表现出较强的清除能力。抗肿瘤实验表明,公石松多糖具有抑制HepG2增殖的能力。

虾青素油皂化的单因素及正交实验研究

以二氯甲烷为溶剂,通过单因素和正交实验设计,优化得到虾青素油粗品皂化的最佳条件为:皂化液3 mg/mL NaOH-甲醇溶液,温度10℃,时间60 min,溶剂与皂化液体积比为1:2。皂化物经硅胶柱层析纯化可得游离虾青素,纯度达96%,利用红外、核磁、质谱等对产品进行了表征。

隔五苓散药饼艾灸治疗硬膜外阻滞麻醉后急性尿潴留疗效观察

目的观察隔五苓散药饼艾灸治疗硬膜外阻滞麻醉术后急性尿潴留的疗效。方法选择2020年7月—2022年7月就诊于北京中医药大学第三附属医院诊断为硬膜外阻滞麻醉术后急性尿潴留患者62例,采用随机分组数字表将患者分为2组。2组均给予心理疏导、流水声诱导作为基础治疗,对照组给予甲硫酸新斯的明注射治疗,试验组采用隔五苓散药饼灸治疗。对比2组首次自主排尿时间、首次排尿后膀胱残余尿量及尿管留置情况;首次排尿情况评价及尿潴留分级;记录泌尿系感染发生情况。结果治疗后试验组总有效率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);试验组首次自主排尿时间短于对照组(P<0.05),2组膀胱残余尿量、留置尿管比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组各项症状评分及证候总积分均低于对照组(P<0.05);2组尿潴留分级比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组治疗后均未发生泌尿系感染及其他安全性问题。结论隔五苓散药饼艾灸治疗硬膜外阻滞麻醉术后急性尿潴留安全有效。

聚四氟乙烯对温带臭虫爬行能力的影响

温带臭虫Cimex lectularius L.是一种重要的卫生害虫,严重影响人们的生活和健康。目前有关该虫的防治措施主要以喷洒化学杀虫剂为主,而杀虫剂的使用不当极易导致该虫抗药性的产生或进一步加重,还将对人身安全构成极大的威胁。因此,探索高效、安全的防治方法成为当前温带臭虫防治过程中亟待解决的问题。本研究在实验室条件下采用行为观察法评估了高分子聚合物-聚四氟乙烯对温带臭虫垂直和水平爬行能力的影响。结果表明,随着聚四氟乙烯涂层宽度的增加,温带臭虫的垂直攀爬能力逐渐降低,当涂层宽度为6 cm时可100%阻隔温带臭虫垂直攀爬,且涂层的持效期可达112 d以上。而聚四氟乙烯涂层无法阻止温带臭虫的水平扩散。研究结果可为温带臭虫的高效、安全物理预防提供理论依据和技术支持。

臭虫击倒抗性基因突变检测及抗性测定

近20多年,臭虫(Cimex spp.)在世界范围内成为常见的卫生害虫,其防治主要采用化学防治,但很多种群发现击倒抗性(Knockdown resistance gene,kdr)基因突变的存在以及抗药性。监测kdr的发生频率以及不同种群对农药的抗性对臭虫有效防治很重要,但我国对臭虫种群的抗药性报道很少。本试验采用点滴法测定了1个温带臭虫Cimex lectularius野外种群对氯虫苯甲酰胺、呋虫胺、吡虫啉、噻虫嗪和高效氯氰菊酯等5种药剂的毒性及抗性水平,使用区分剂量快速鉴定抗性方法对2个温带臭虫和2个热带臭虫Cimex hemipterus种群对高效氯氰菊酯的抗性水平进行了检测,此外用PCR方法检测8个臭虫地理种群(1个温带臭虫实验室种群,1个温带臭虫野外种群和6个热带臭虫野外种群)174个个体的kdr突变频率。点滴法结果表明,5种杀虫剂对温带臭虫的毒性是吡虫啉和呋虫胺>噻虫嗪>氯虫苯甲酰胺和高效氯氰菊酯,测试的野外温带臭虫种群仅对噻虫嗪无明显抗性。热带臭虫2个野外种群对高效氯氰菊酯的抗性均远高于温带臭虫。在温带臭虫的实验室种群中未检测到突变,在野外种群中检测到了V419L和L925I突变,可分为2种基因型类型(A:无突变位点;B:同时有L925I和V419L),而在热带臭虫的6个种群检测到M918I和L1014F突变,只有1种基因型类型,即M918I和L1014F双位点突变。温带臭虫1个野外种群及热带臭虫6个野外种群kdr突变的存在与臭虫对高效氯氰菊酯敏感密切关联。基于kdr基因突变检测结果推测我国臭虫种群广泛存在对拟除虫菊酯的抗性。

公石松与金线莲中黄酮类化合物成分对比研究

采用反相高效液相色谱法以梯度洗脱对公石松、金线莲醇提成分进行分析,并与11种黄酮类化合物标准品(芦丁、水仙苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、杜鹃黄素、黄芩素、异山奈素、鼠李素、鼠李柠檬素、山奈素)对比,结果表明:两者均含有芦丁、水仙苷、槲皮素,金线莲中含有山奈酚、异鼠李素,公石松中则不含。公石松中芦丁、水仙苷、槲皮素含量分别为0.059 mg·g^(-1)、2.004mg·g^(-1)、0.018 mg·g^(-1);金线莲中芦丁、水仙苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量分别为0.274 mg·g^(-1)、1.210 mg·g^(-1)、0.456 mg·g^(-1)、0.064 mg·g^(-1)、0.331 mg·g^(-1),公石松和金线莲中水仙苷的含量显著高于其他黄酮类成分的含量。与金线莲相比,公石松中有一保留时间为20.263 min的特有物质,含量为1.225 mg·g^(-1),结合元素分析和质谱分析,判断该化合物的分子量为786,分子式推测为C40H58N4O12。

深圳地区臭虫侵害调查研究

目的调查深圳地区臭虫危害情况,为臭虫防治工作提供参考和帮助。方法问卷调查和人工实地调查相结合。结果臭虫在工业区内职工宿舍危害最重,阳性率平均为52.1%,其次为老居民住宅区,阳性率在28.1%以上,学校学生宿舍较少,阳性率为6.2%。臭虫在床板栖息率高达89.3%,其次为棉被28%,墙面栖息率达21.4%,蚊帐四角为3.8%,桌椅为2.2%,其他可寄生的地方为13.2%;近1年内发现有臭虫叮咬达63.2%,近1～2年内有臭虫叮咬达26.1%,3～5年臭虫危害情况较少,臭虫叮咬仅为6%,6年以上仅为4.7%,有35.7%的居民被大面积叮咬,出现红疹,少数有过敏现象,有48.4%多出咬伤,出现红疹,仅有15.9%叮咬较轻,很快自愈。结论深圳地区臭虫危害近一两年内较严重,且有不断上升趋势。

光谱法和分子对接研究红斑红曲胺与牛血清白蛋白相互作用

近年来,随着对红曲色素的深入研究,其越来越多的功能活性被发现,但其某些致毒作用也使红曲色素的安全性受到了质疑。因此,阐明红曲色素在人体中与大分子的相互作用对深入研究其转运代谢及毒副作用具有重要作用。光谱法是研究溶液中小分子与蛋白质相互作用的一种有效方法,其具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简单等优点,在研究中得到越来越广泛的应用。为探究红曲色素在体内的转运机制和血液中与转运蛋白的相互作用,本研究首次用红斑红曲胺(Rubropunctamine,Rub)作为红曲色素的典型代表与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用。利用内源荧光光谱、同步荧光光谱探究不同浓度的Rub对BSA的荧光猝灭作用,采用Stern-Volmer方程、Lineweaver-Burk函数和Van’t-Hoff方程对不同温度下BSA与Rub作用后在λEX/λEM(280.0 nm/340.0 nm)(λEX/λEM表示荧光的激发波长和发射波长)的内源荧光强度值确定二者作用类型、结合位点数及相互作用机理,进一步利用圆二色谱定量测定了Rub的结合对BSA二级结构影响,最后运用软件Discovery Studio2.5对Rub与BSA的相互结合进行分子对接模拟。结果显示:(1)Rub对BSA具有较强的内源荧光猝灭效果,在λEX/λEM(280.0 nm/340.0 nm)的荧光强度下降306.1,发射波长由338.6 nm蓝移到331.8 nm,同步荧光显示荧光猝灭主要发生在色氨酸残基上。(2)Stern-Volmer方程计算得到动态猝灭速率常数K q为2.335×10^12 L·(mol·s)^-1,远大于此类型允许的最大扩散碰撞常数2.0×10^10 L·(mol·s)^-1,判定该猝灭是单纯的静态猝灭过程。利用Lineweaver-Burk函数计算得到静态猝灭速率常数K q随温度升高而减小,即该复合物在温度升高时变得不稳定。(3)利用等式lg[(F 0-F)/F]=lg K 0+n lg c Q得到两者结合常数可达10 3 L·mol^-1以上,结合位点数近似为1,且随着温度增加表观结合常数变小。(4)不同温度下Van’t-Hoff方程计算得到ΔH,ΔS,ΔG都小于0,则该相互作用能自发进行且氢键和范德华力是其主要的相互作用力。(5)圆二色谱测得BSA与Rub结合后二级结构中α-螺旋含量由29.4%降至20.2%;β-折叠由39.9%上升到50.7%;β-转角由6.5%下降到3.5%;无规则卷曲由24.2%上升到25.6%。(6)分子对接发现Rub结合点位于BSA中由Arg458,Asp108,Glu424和Ser428等氨基酸形成的口袋内,与Arg458有范德华力作用,与Arg144形成分子内氢键,影响到Trp213微环境。

牡丹花水提物对肾素和ACE的双重抑制作用

研究了牡丹花水提物对肾素-血管紧张素系统中两种关键酶肾素和血管紧张素转化酶(ACE)的抑制作用,选取典型的牡丹花色品种,并与芍药进行比较,考察了样品水提物的肾素和ACE抑制活性及抗氧化能力,并分析酚类及黄酮类物质的含量与其功能活性的相关性。结果表明,红色系的牡丹和芍药花水提物具有优良的肾素和ACE抑制活性,而白色系的牡丹花水提物抑制肾素和ACE活性的能力则很弱。其中活性最高的样品水提物抑制肾素的IC50值为0.08 mg/mL,抑制ACE的IC50值为0.23 mg/mL;此外,红色系的牡丹和芍药花水提物的ABTS自由基清除能力为115.89~121.75mgTE/gDW,DPPH自由基清除能力为192.67~200.46mg TE/g DW,铁离子还原能力为119.86~208.94 mg TE/g DW,总酚含量为99.29~122.45 mg GAE/g DW,白色牡丹花水提物的抗氧化能力及总酚含量均远低于红色系样品水提物。相关性分析表明,不同样品水提物的肾素和ACE抑制活性及DPPH、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力与总酚含量显著正相关(p<0.01),相关系数分别为0.99、0.91、0.99、0.99和0.98。本研究指出深色系的牡丹花水提物倾向于表现出更强的肾素和ACE抑制活性,其中酚类化合物是潜在的重要活性物质,这可为探讨新型血压调控因子及实现不同品系牡丹花的高值化利用提供更丰富的基础理论支撑。

基于响应面的红曲色素液态发酵培养基优化

该研究以6种红曲经典色素及生物量为指标,对红曲霉M-7发酵培养基进行了优化。首先采用Plackett-Burman实验从2种碳源、5种氮源中筛选对各个目标变量具有显著影响的培养基组分,再通过最陡爬坡实验确定中心水平并进行中心组合实验优化培养基配方。最后通过Minitab响应面优化器,以主要6种色素含量为指标进行优化,采用Minitab进行多值优化,获得红曲色素综合产量最高的培养基配方为:葡萄糖35 g/L,淀粉16 g/L,尿素0.8 g/L,氯化铵1.6 g/L,硝酸钠1 g/L,硫酸铵1 g/L,硝酸铵1 g/L,磷酸二氢钾4 g/L,硫酸镁0.5 g/L,硫酸锰0.03 g/L,硫酸锌0.01 g/L,硫酸铁0.01 g/L。最终6种色素总产量达到949.04 mg/L,较初始培养基红曲色素总产量提高了31%。

斜入射时抗电磁辐射材料电磁参数匹配的研究

给出了当电磁波斜入射时抗电磁辐射材料反射系数的公式,运用三维网格法讨论了斜入射的角度、材料电磁参数、材料厚度等因素对其的影响,并用计算机辅助设计了给定具体角度、具体电磁参数或具体厚度的抗电磁辐射材料。优化设计之后的结果可以对实际材料的设计和应用有具体的理论指导意义。

放射性^(125)I粒子植入治疗胸腺肿瘤胸膜复发的短期临床疗效

目的探讨放射性^(125)I粒子植入治疗胸腺肿瘤复发患者的短期临床疗效。方法收集2016年9月至2017年6月于复旦大学附属华东医院行放射性^(125)I粒子植入的胸腺肿瘤患者资料。纳入标准:局部胸膜复发病灶;不能耐受系统化学治疗,或既往化学治疗失败;先前接受过胸部高剂量放射治疗;凝血功能正常。术前行胸部计算机断层扫描(CT)、超声、正电子发射断层显像-计算机断层扫描(PET-CT)等检查,依据放射治疗计划系统(TPS)制定治疗计划,在CT或超声引导下于穿刺点进针,插植粒子针,间距一般为0.5 cm。观察2个月后治疗病灶的临床疗效和不良反应,并随访3～9个月。结果全组共13例患者行放射性^(125)I粒子植入术,男7例、女6例,年龄30～78岁。植入粒子数中位数为30粒,范围为20～58粒;总剂量中位数为1.9×107Bq,范围为(1.5～2.6)×107 Bq。随访2个月后发现客观缓解率达到100%(7例完全缓解,6例部分缓解),伴有胸壁疼痛的4例患者症状均得到缓解。1例患者在粒子植入过程中发生气胸。在3～9个月的随访过程中,没有患者出现粒子植入部位的疾病进展。结论放射性^(125)I粒子植入治疗胸腺肿瘤患者胸膜复发安全、有效,可作为传统放射治疗和化学治疗失败后的挽救性治疗,但其长期疗效有待进一步观察。

双酶活性铜掺杂碳量子点的水热法合成及应用

以β-环糊精、尿素、氯化亚铜为原料,通过水热法一步制备了铜掺杂碳量子点Cu-CDs。该碳点同时显示出过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性,可催化H_(2)O_(2)氧化四甲基联苯胺产生显色反应,基于此模拟过氧化物酶活性可比色检测H_(2)O_(2),线性范围为0-30μmol/L,检出限可达42.7 nmol/L。Cu-CDs歧化超氧阴离子自由基的半抑制浓度IC_(50)为28.11μg/mL。

大功率海水循环水泵立式齿轮箱装配工艺分析

针对大功率海水循环水泵立式齿轮箱装配难度大的问题,提出了核电齿轮箱装配工艺。重点介绍了核电齿轮箱结构及工作原理,分析了核电齿轮箱的装配工艺。阐述了100 kW样机运行调试过程和结果,验证了装配工艺的可行性,为核电齿轮箱的精密装配提供了技术支撑。

叶酸对H型高血压大鼠的影响及其机制研究

目的研究叶酸对内皮细胞和大鼠中细胞外信号蛋白激酶(Erk1/2)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶亚型(Nox4)和内皮型一氧化氮合酶(e Nos)表达量的影响。方法(1)细胞实验:将人动脉内皮细胞分成5组:有氧组和短、中、长3个时间(缺氧2,4,6 h)缺氧组和叶酸组(叶酸:20μmol·L^-1,缺氧4h)。CCK-8检测细胞活力,Hoechst法检测细胞凋亡率,试剂盒法测定一氧化氮(NO)含量。(2)动物实验:按照体重将SHR大鼠随机分成3组:正常组、模型组和实验组,每组12只。模型组给予含2%蛋氨酸颗粒的饲料喂养,建立H型高血压模型;实验组给予含2%蛋氨酸颗粒的饲料喂养,同时给予马来酸依那普利叶酸片粉剂20 mg·kg^-1·d^-1。记录平均动脉压(MAP),用酶联免疫吸附法测定Erk1/2、Nox4和e Nox的含量。结果(1)有氧组和短、中、长3个时间缺氧组与叶酸组的细胞活力分别为(100.00±0.00)%,(79.61±1.76)%,(60.81±2.91)%,(27.59±3.17)%和(89.92±4.89)%;这5组的细胞凋亡率分别为(2.94±0.16)%,(19.56±0.77)%,(33.93±1.29)%,(42.67±6.43)%和(15.49±1.04)%,这5组的NO浓度分别为(58.65±2.05),(15.20±1.82),(8.45±2.55),(8.15±1.57)和(53.19±3.14)mol·L^-1,3个时间缺氧组与有氧组相比、或叶酸组与3个时间缺氧组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(2)正常组、模型组和实验组的MAP分别为(171.30±5.03),(177.73±8.69)和(132.12±4.09)mm Hg;这3组的Erk1/2含量分别为(28.56±2.44),(41.99±1.75)和(34.48±1.33)μg·m L^-1;这3组的Nox4含量分别为(0.17±0.02),(0.32±0.01)和(0.20±0.03)μg·m L^-1;这3组的e Nos含量分别为(6.40±0.95),(12.07±0.63),(12.58±0.64)μg·m L^-1,上述指标:模型组与正常组比较(MAP除外)、或实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01;或均P<0.01)。结论补充叶酸后,Erk1/2、Nox4含量降低而e Nos含量升高,细胞存活率提高,表明叶酸能抑制氧化应激,改善内皮功能,参与H型高血压发展进程。

杀蟑胶饵室内药效及德国小蠊对氟虫腈抗药性研究

【目的】本文通过测定杀蟑胶饵对德国小蠊Blattellagermanica(L.)和美洲大蠊Periplaneta americana (L.)的致死效果,以及德国小蠊对杀虫剂氟虫腈的抗性,从而为胶饵选择和蟑螂的化学防治提供参考。【方法】用饲喂法在实验室测定了7种国产杀蟑胶饵及5种美国产杀蟑胶饵或毒饵站对德国小蠊的致死效果,5种国产蟑螂胶饵对美洲大蠊的致死效果,以及对5种国产蟑螂胶饵陈化1个月后对德国小蠊的致死效果。并采用点滴法测定了两个德国小蠊野外品系对氟虫腈的抗性。【结果】7种中国产胶饵中,5种对德国小蠊抗性和非抗性品系在第7天的校正死亡率高于91%。其中韩世和克贝特对德国小蠊的药效显著慢于绿叶、宏宇洁和优士。绿叶、宏宇洁和优士对美洲大蠊在第7天的校正死亡率均高于89%。陈化1个月后的胶饵只有克贝特对蟑螂的致死率有较大降低。美国产胶饵或毒饵站对德国小蠊的致死率均大于82%。点滴法抗性测定结果显示德国小蠊的两个野外品系(Cincy,Irvington)对氟虫腈生理抗性指数分别是4.3和115.1。【结论】不同胶饵对德国小蠊和美洲大蠊的致死效果有明显差异。尽管德国小蠊Irvington品系对氟虫腈表现为高抗性,含0.05%氟虫腈的胶饵仍然对它有效。

我国臭虫防治中存在的问题及解决对策

臭虫(温带臭虫和热带臭虫)以吸食人和动物的血液为生,严重影响人们的生活和健康。第二次世界大战后,随着化学药剂的应用,臭虫在世界多数地区逐渐销声匿迹。然而,从20世纪90年代后期开始,臭虫在世界范围内(除南极洲)出现了再暴发。由于其善于躲藏和夜间活动的特点,以及日益严重的抗药性问题,使得臭虫成为当前一种最难防治的城市害虫。2017-2019年在对广东省部分地区进行的臭虫危害及防治调查中,发现该虫的危害程度正日益加重,且防治过程中存在诸多不足。因此,如何有效地控制/抑制臭虫的再暴发,并采取合理的防治措施成为当前亟待解决的问题。该文在分析有关臭虫防治研究文献的基础上,针对当前我国臭虫防治工作中存在的问题提出相应的解决对策,以期为我国臭虫防治策略的制定提供参考。

冠状动脉内心电图ST段改变对不稳定型心绞痛临界病变判断价值

目的:以血流储备分数(FFR)作为标准,评估冠脉内心电图在检测不稳定心绞痛患者临界血管病变中的诊断价值。方法:连续纳入57名诊断为不稳定型冠心病患者,冠状动脉造影(CAG)显示血管直径狭窄50~90%的血管71根,在病变近端和远端使用常规工作导丝记录单极冠脉内心电图,以ST段偏离(抬高或压低)基线≥1mm为阳性。冠状动脉造影后,2天内进行FFR指导下的冠脉介入治疗(PCI),以FFR值>0.8为阴性组,FFR值≤0.8为阳性组,评估冠脉内心电图的诊断价值。结果:71根血管中,FFR阳性43例(61%),FFR阴性28例(39%),ICECG检测结果中,真阳性31例,假阴性12例,真阴性22例,假阳性6例,以FFR为金标准,IC-ECG的敏感性为72%,特异性为78%。阳性预测值为83%,阴性预测值为64%,总体准确率为74%。以IC-ECG ST段改变幅度和FFR值两个连续变量进行线性回归分析显示,IC-ECG ST段改变与FFR值呈显著负相关。结论:对于不稳定心绞痛的临界血管病变,冠脉内心电图是一种良好的评估手段,可以为临床决策提供可靠的证据支持。

热带臭虫转录组分析

目的获得热带臭虫转录组数据,为后续基因功能研究奠定基础。方法基于Illumina NovaSeq 6000高通量测序平台,对热带臭虫混合样本进行测序,采用Trinity软件组装有效测序数据获得unigenes。将unigenes分别与非冗余蛋白数据库(NR)、基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)、直系同源蛋白分组比对数据库(eggNOG)和注释蛋白数据库(Swiss-Prot)进行比对和功能注释,利用MISA软件对热带臭虫的unigenes进行简单重复序列位点分析,使用Samtools和GATK软件检测热带臭虫单核苷酸多态性(SNP)。结果转录组测序数据质控后获得5.49 Gb高质量数据,组装后获得21619个unigenes,总长度为29322540 bp,平均长度为1356 bp。将unigenes序列与5个公共数据库进行比对和功能注释,得到45362个有功能注释的unigenes,预测发现10906条编码区序列,检测到7754个简单重复序列(SSR)位点信息和33144个SNP位点信息。结论报道并构建了热带臭虫转录组数据库,并对21619个unigenes进行组装和功能注释分析,该数据的获得可为后期热带臭虫的功能基因研究、SSR和SNP分子标记开发、遗传多样性分析以及遗传图谱构建等奠定基础。

The polysaccharide isolated from Pleurotus nebrodensis(PN-S) shows immune-stimulating activity in RAW264.7 macrophages

A novel Pleurotus nebrodensis polysaccharide(PN-S) was purified andcharacterized,and its immune-stimulating activity was evaluated in RAW264.7 macrophages.PN-S induced the proliferation of RAW264.7 cells in a dose-dependent manner,as determined by the MTT assay.After exposure to PN-S,the phagocytosis of the macrophages was significantly improved,with remarkable changes in morphology being observed.Flow cytometric analysis demonstrated that PN-S promoted RAW264.7 cells to progress through S and G2/M phases.PN-S treatment enhanced the productions of interleukin-6(IL-6),nitric oxide(NO),interferon gamma(INF-γ),and tumor necrosis factor-α(TNF-α) in the macrophages,with up-regulation of m RNA expressions of interleukin-6(IL-6),inducible nitric oxide synthase(i NOS),interferon gamma(INF-γ) and tumor necrosis factor-α(TNF-α) being observed in a dose-dependent manner,as measured by q RT-PCR.In conclusion,these results suggest that the purified PN-S can improve immunity by activating macrophages.