牛血清白蛋白作为生物医用材料产品体液免疫评价阳性对照物的研究

目的本文旨在对生物医用材料免疫原性评价方法进行初步探索,寻找有效的生物医用材料产品体液免疫评价所需阳性对照物,并对其使用剂量,免疫方法和免疫效果进行探索,为生物医用材料产品免疫原性评价实现标准化积累数据。方法选取雌性8周Balb/c小鼠,随机分组,分别不同剂量免疫3次,每次间隔两周。分别摘眼球取血,分离血清,并进行血清抗体总Ig G浓度检测,实验结果利用统计学方法进行分析。结果牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)单独免疫小鼠均无显著的体液免疫刺激作用;BSA混合佐剂免疫小鼠中剂量组和高剂量组的淋巴细胞增值能力明显强于阴性对照组,高剂量组强于中剂量组;二次免疫后两周取材与3次免疫后两周取材BSA混合佐剂组细胞增殖能力均与阴性对照组有显著性差异,3次免疫后两周强于二次免疫后两周,佐剂对照组与阴性对照组淋巴细胞增值能力无显著性差异。结论实验证明,BSA可以作为生物医用材料产品体液免疫检测的阳性对照物,免疫刺激强度适中。

淡水鱼中3种吸虫囊蚴多重PCR检测方法的建立

为建立同时检测淡水鱼中华支睾吸虫、东方次睾吸虫和日本全冠吸虫的三重PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的各吸虫参考序列中保守区域设计3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了3种吸虫囊蚴的多重PCR检测方法,并利用该方法对52尾淡水鱼样品中吸虫囊蚴的感染情况进行检测。结果显示,本研究所建立的方法对东方次睾吸虫、华支睾吸虫、日本棘隙吸虫能分别扩增到508 bp、311 bp和208 bp的目的条带,对鸭对体吸虫、舟形嗜气管吸虫、横川后殖吸虫和卷棘口吸虫的基因扩增结果均为阴性,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对3种吸虫囊蚴重组质粒标准品检测下限均为104拷贝/μL。利用该三重PCR方法对淡水鱼临床样品进行检测,结果显示该方法与形态学检测方法结果一致。本研究在国内首次建立了淡水鱼3种吸虫囊蚴多重PCR检测方法,为鱼源性吸虫病的快速检测及鉴别诊断提供了技术手段,为鱼源性寄生虫病的防控奠定了基础。

片形吸虫病的危害与防制

片形吸虫病是一种重要的危害严重的人兽共患寄生虫病,主要由肝片吸虫和大片吸虫感染反刍动物及人体,造成急慢性肝炎和胆管炎、营养吸收障碍,给畜牧业经济和人类健康造成巨大的影响。本文主要从病原生物学、临床症状、病理变化、临床和实验室检查及防制措施进行阐述,介绍片形吸虫病的发生、发展、流行规律、防制原则及片形吸虫感染与致病分子机制的研究展望,为可持续防控片形吸虫病提供参考。

丹顶鹤源东方次睾吸虫ITS序列分析

为了准确鉴定黑龙江省丹顶鹤体内的次睾吸虫并确定其分类地位,本试验采用形态学观察与PCR扩增ITS序列进行虫种鉴定。结果显示:试验中次睾吸虫与东方次睾吸虫形态学特点基本一致;该吸虫的ITS序列长度为1077 bp,其中ITS1、5.8S rDNA、ITS2的长度分别是629、160 bp和288 bp,与NCBI中东方次睾吸虫(序列号:MK482054)的同源性达到99.8%,与其他次睾吸虫的同源性最高可达到98.2%;进化分析显示,试验中的次睾吸虫与已发表的东方次睾处于1个小分支,与其他次睾属吸虫形成了1个大分支,表明了其亲缘关系较近。基于形态学和分子生物学的鉴定结果,本试验中的次睾吸虫为东方次睾吸虫,所获得的ITS序列可作为后睾科寄生虫分类的基因标记。

黑龙江省林蛙肺线虫的鉴定及感染情况调查

为了解黑龙江省林蛙肺部寄生线虫的种类和感染情况,2019年-2020年在黑龙江省采集黑龙江林蛙778只和东北林蛙174只,从其肺脏内检获线虫进行形态学鉴定后,提取虫体DNA,用通用引物对其核糖体DNA的内转录间隔区(ITS)序列进行PCR扩增,并进行克隆和测序,经Blast进行同源性分析,并应用MEGA 6.0软件构建系统发生树;同时分析林蛙肺线虫的感染情况。结果表明,黑龙江林蛙和东北林蛙检出的肺线虫形态一致,初步鉴定为蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)。获得的ITS序列长度为711 bp,与GenBank中已公布的蟾蜍棒线虫(KF999593)序列的相似性为99.43%,与蟾蜍棒线虫(KF999593)处于同一分支中。依据形态学与分子生物学鉴定结果该虫体为蟾蜍棒线虫。2种林蛙肺脏线虫总感染率为90.97%,平均感染强度为13.45条。东北林蛙肺线虫的感染率和平均感染强度分别为89.66%和18.19条;黑龙江林蛙感染率和平均感染强度分别为91.26%和12.41条,2种林蛙的感染率和感染强度差异均不显著(P>0.05)。研究结果可为黑龙江省林蛙肺线虫病的防控提供科学依据。

基于聚乳酸及其共聚物的生物可吸收支架研究进展

由于冠状动脉疾病的发病率越来越高,心血管支架的应用正不断增加。生物可吸收支架(BRS)代表了30年介入心脏病史中的一种新型范例。BRS有生物相容性好,植入人体后异物反应、血栓形成、新生内膜增生少,内皮化更完全等优点,这项技术克服了金属支架的局限性,并处于迅速发展阶段。文章就几种基于聚乳酸及其共聚物的新型生物可吸收支架的特点、临床试验、应用情况、未来发展方向作一简要综述。

大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究

通过克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白2(FgCaBP2)基因,旨在探索其作为诊断抗原的可行性。在分析大片吸虫蛋白组数据的基础上,根据肝片吸虫CaBP2基因组序列和转录组数据,设计以NdeⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物。以大片吸虫总RNA为模板,通过RT-PCR获得FgCaBP2基因,对其进行测序、生物信息学分析。构建pET-30a-FgCaBP2重组表达载体,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析,并用目的蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。结果表明,FgCaBP2基因的开放阅读框长570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测显示,FgCaBP2主要以α螺旋为主,β折叠较少,有7个β转角、4个较长的无规则卷曲、含有4个亲水区、具有较多的B细胞抗原表位。SDS-PAGE分析表明,FgCaBP2呈现出可溶性表达。Western-blot分析表明,25 ku大小的特异性目的蛋白条带能够很好地被大片吸虫感染的阳性水牛血清识别,具有良好的免疫反应性。本研究成功克隆了FgCaBP2基因,并获得了可溶性重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。

Medical Devices Standardization System in China

The standardization system is imperfect since the complexity of the medical devices and the specialty of the medical device industry in China. This paper describes the present situation of medical devices standardization system in China,reviews and discusses the advantages and problems of the medical devices standardizatiom. It also presents some comments and suggestions to perfect the medical devices standardization system for enhancing the quality control of medical devices and for promoting the development of medical devices industry.