毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的原核表达与分析

旨在研究毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的反应原性及其在虫体内的亚细胞定位。提取毒害艾美耳球虫(扬州株)配子体总RNA,RT-PCR扩增En GPX的ORF编码序列,构建原核表达质粒pET-28a(+)-En GPX,转化至BL21(DE3)进行体外诱导表达,同时制备鼠抗rEnGPX多克隆抗体,对重组蛋白进行Western blot反应原性分析和激光共聚焦免疫荧光定位分析。结果表明,En GPX ORF序列全长753 bp,编码250个氨基酸,体外重组表达蛋白大小约30 ku,主要以包涵体形式存在。该重组蛋白能被6×HIS标签单克隆抗体,鼠抗rEnGPX多克隆抗体,毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫病鸡康复血清所识别,表明其具有较好的反应原性和交叉反应原性。在天然配子体蛋白中检测出EnGPX,其编码蛋白主要分布于配子体内的Ⅱ型成壁体(WFBII)及卵囊壁上。本研究成功克隆表达了毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX,验证其具有良好的反应原性,并定位于配子体及卵囊壁上。以期为研究En GPX参与卵囊壁形成的分子机制提供新的线索,也为研制新型球虫亚单位疫苗提供新的靶标。

新农科背景下作物育种学教学模式探索

随着农业现代化进程的加快,新农科逐渐成为农业发展的主流模式。作物育种学作为新农科建设中的重要环节,肩负着培养高素质农业人才的重要使命。然而,传统的作物育种学教学模式已经不能满足新农科需求,亟需进行教学模式的创新。本文以新农科建设为导向,探索新型作物育种学教学模式的构建,通过分析课程中的痛点问题、新农科背景下作物育种学教学模式的特点以及教学模式的实践应用,旨在探索新农科背景下作物育种学教学模式,以期提高教学质量,培养适应新农科需求的人才。

连续性血液净化在严重多发伤并发急性肾损伤早期的应用效果

目的 探讨连续性血液净化在严重多发伤并发急性肾损伤(AKI)早期的应用效果。方法 选择2018年7月—2021年5月上海市第六人民医院收治的98例严重多发伤并发AKI患者,以随机数字表法分为研究组(49例)与对照组(49例)。对照组于AKI后RIFLE分级为F期实施连续性血液净化,研究组于AKI后RIFLE分级为I期实施连续性血液净化。对比两组治疗前后血清尿素氮(BUN)水平、微血管流动指数、灌注血管密度、CD3^(+)、CD4^(+)细胞水平、血清白细胞介素-6(IL-6)与C反应蛋白(CRP)水平,对比两组预后情况。结果 治疗前,两组血清BUN、IL-6、CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组血清BUN、IL-6、CRP水平均降低(P<0.05),且研究组更低(P<0.05)。治疗前,两组微血管流动指数、灌注血管密度、CD3^(+)、CD4^(+)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组微血管流动指数、灌注血管密度、CD3^(+)、CD4^(+)水平均升高(P<0.05),且研究组更高(P<0.05)。治疗后14 d内,研究组多器官功能障碍综合征发生率(57.14%)比对照组(77.55%)低(P<0.05),研究组多器官功能障碍综合征死亡率(8.16%)低于对照组(26.53%)(P<0.05),研究组肾功能完全恢复例数占比高于对照组(P<0.05),研究组再次行连续性血液净化例数占比低于对照组(P<0.05)。结论 连续性血液净化早期应用能够改善严重多发伤并发AKI的肾功能、免疫功能,可减轻机体炎症反应,调节微循环,改善患者的预后。

粉防己碱调节Nrf2/HO⁃1/NLRP3信号通路对抑郁症大鼠神经元损伤的影响

目的探讨粉防己碱(Tet)调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO⁃1)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对抑郁症大鼠神经元损伤的影响。方法2022年3—7月在电子科技大学脑科学学院附属临床医院基础医学实验室进行实验。选用SD大鼠72只,随机数字表法分为6组(12只/组):空白组、模型组、Tet低剂量组(10 mg/kg)、Tet中剂量组(20 mg/kg)、Tet高剂量组(40 mg/kg)、抑制剂组(Tet 40 mg/kg+Nrf2/HO⁃1/NLRP3通路抑制剂ML385,30 mg/kg);除空白组外其他大鼠采用皮下注射皮质酮构建抑郁症模型,建模成功后,空白组和模型组大鼠灌胃并腹腔注射等量生理盐水,其余大鼠灌胃和腹腔注射相应药物,每天1次,持续21 d。用糖水偏好试验、强迫游泳试验和旷场试验对大鼠进行抑郁评估;苏木素—伊红(HE)及尼氏(Nissl)染色评估各组大鼠海马组织及神经元损伤情况;透射电镜观察海马突触超微结构;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠海马组织白介素(IL)⁃6、IL⁃β、肿瘤坏死因子(TNF)⁃α水平及过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平;Western⁃blot检测各组大鼠海马组织中Nrf2/HO⁃1/NLRP3信号通路蛋白及凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶⁃1(Caspase⁃1)的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠抑郁样行为显著、海马神经元损伤严重,大鼠体质量、糖水偏好率、自主活动评分、神经元数目、活性带长度、致密区厚度,海马组织中CAT活性、Nrf2、HO⁃1蛋白表达水平均显著降低,不动时间、突触间隙、海马组织中IL⁃6、IL⁃β、TNF⁃α、MDA、ROS水平、NLRP3、ASC、Caspase⁃1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量Tet可改善大鼠抑郁行为,减轻海马神经元损伤(P<0.05);抑制剂可逆转高剂量Tet对抑郁症大鼠的改善作用(P<0.05)。结论Tet可能通过激活Nrf2/HO⁃1/NLRP3信号通路,减轻海马组织炎性反应和氧化应激损伤,从而起到缓解大鼠抑郁的作用。

中青年血液透析患者病耻感现状及影响因素分析

目的了解中青年血液透析(hemodialysis,HD)患者病耻感现状并分析影响因素。方法选取2022年4–7月在温州市中医院血液净化室HD中青年患者184例,采用一般资料调查表、社会影响量表、领悟社会支持量表和自我感受负担量表对其进行调查。结果中青年HD患者病耻感现状得分为(67.07±8.42)分,处于中等偏上水平。领悟社会支持能力与病耻感呈负相关(–1<r<0),自我感受负担与病耻感呈正相关(0<r<1);中青年HD患者年龄、工作状况、透析年限、领悟社会支持能力及自我感受负担是病耻感的主要影响因素(P<0.05)。结论中青年HD患者病耻感呈中等偏上水平,年龄、工作状况、透析年限、领悟社会支持能力及自我感受负担为其主要影响因素。

小球藻藻渣生物炭对孔雀石绿的吸附研究

本文采用热解法制备小球藻藻渣生物炭,研究在控制氮气流速处理下的藻渣生物炭对孔雀石绿的吸附效果及机理。结果表明,小球藻藻渣生物炭对孔雀石绿的吸附随氮气流速的增加而增加,在氮气流速达到100 mL·min-1时吸附量达到最大值1505.6503 mg·g-1,比表面积达到1189.350 m2·g-1。吸附动力学实验中,小球藻藻渣生物炭对孔雀石绿的吸附更符合伪二阶模型,表明,吸附过程主要为物理吸附和化学吸附共同作用。因此以小球藻藻渣为原料制备的生物炭对于孔雀石绿具有较高吸附性能,有望成为去除水溶液中有机染料的一种有效的吸附剂。

可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型的构建研究

目的建立小鼠股骨缺损模型并探索甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)对缺损后骨再生的影响。方法将40只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分成4组:骨缺损组(n=10),5%GelMA组(n=10),10%GelMA组(n=10),15%GelMA组(n=10)。造模2周后,使用HE染色观察股骨组织结构;使用Masson染色观察股骨胶原纤维形态;使用OCN免疫组化染色分析骨特异性蛋白表达水平。结果GelMA具有良好的可注射性,可经PCR Pipettes移液器注入骨缺损区。HE染色结果表明10%GelMA组相较于骨缺损组、5%GelMA组和15%GelMA组具有更好的骨修复效果,缺损部位组织结构更加完整;Masson染色结果表明10%GelMA组有更多成骨相关的胶原纤维形成;RT-qPCR分析显示,10%GelMA组小鼠骨缺损部位OCN表达显著高于骨缺损组(P<0.001)、5%GelMA组(P<0.01)和15%GelMA组(P<0.01)。10%GelMA组小鼠骨缺损部位Osterix表达显著高于骨缺损组(P<0.001)、5%GelMA组(P<0.001)和15%GelMA组(P<0.01);OCN免疫组化染色结果表明10%GelMA组的修复区骨特异性蛋白表达显著高于骨缺损组(P<0.01)、5%GelMA组(P<0.01)和15%GelMA组(P<0.05)。结论构建了可评价注射式再生支架修复效果的小鼠骨缺损模型,并应用于基于GelMA的可注射再生支架筛选和治疗效果评价,为开展相关领域工作提供实验基础。

宏基因组测序技术检测血流感染样本去宿主干扰效应四种预处理方法的比较

目的探讨不同去宿主方法对血流感染样本中病原微生物检测的影响。方法以浓度分别为10^(5),10^(3),10^(2)和10CFU/ml的模拟金黄色葡萄球菌血流感染样本为研究对象,将检测分为全血组和血浆组,使用宏基因组测序(metagenomic next generation sequencing,mNGS)比较Saponin法、Wash法、CD45法和MolYsis法四种预处理方法的病原微生物reads检出数和占比,以评估不同方法的去宿主效率。结果血流感染病原微生物初始浓度在10^(3)CFU/ml以下的微生物检出占比小于0.15%。四种去宿主方法中,Saponin法reads检出数最多,病原微生物检出占比最高,血浆组检测结果占比可提升至18%以上;Wash法及CD45法相比直接提取法病原微生物reads检出数均未显著增加,MolYsis法的reads检出数水平有明显增高。血浆组病原微生物reads检出数多于全血组,去宿主方法可明显提高病原微生物的丰度。结论对比四种去宿主方法的mNGS检测结果,Saponin法可明显去除宿主核酸,提高病原微生物的reads检出数,尤其血浆组去宿主效果最好。

802例感染性心内膜炎主要基础病因及病原学分析

目的:探讨感染性心内膜炎(IE)患者的主要基础病因及病原菌分布的特点。方法:针对中国医学科学院阜外医院2011年1月至2018年12月住院治疗的802例IE患者的基础病因和致病病原体进行回顾性分析,并分析IE患者的平均年龄、血培养和赘生物培养的阳性率及其变化趋势。结果:近8年IE患者平均年龄由2011年的40.3岁增至2018年的46.8岁,总平均年龄为42.8岁,男女患者比为3.18:1。其中,非风湿性心脏瓣膜病基础上发生的IE共410例(51.12%);在先天性心脏病基础上发生的IE共208例(25.94%);风湿性心脏瓣膜病基础上发生的IE共101例(12.59%);在心脏外科手术及介入治疗术后发生的IE共70例(8.73%)。802例IE患者共送检了535例血培养,阳性156例(29.16%);共送检576份瓣膜赘生物培养,102例(17.71%)培养阳性。156例IE患者血培养的主要分离菌为链球菌,共98例(62.82%);其次为葡萄球菌38例(24.36%)和肠球菌10例(6.41%)。IE患者瓣膜赘生物培养的主要分离菌为链球菌和葡萄球菌,分别有34例(33.33%)和33例(32.35%)。血培养中链球菌对青霉素的耐药率为3.10%,对万古霉素的耐药率为0%。结论:近8年IE患者的平均年龄增高。IE的基础心脏疾病中,风湿性心脏病减少,先天性心脏病相对增加,非风湿性心脏瓣膜病已成为IE最常见的基础心脏疾病。其主要病原菌仍以草绿色链球菌为主。

非小细胞肺癌患者血清IL-17、VEGF水平与临床分期和预后的相关性研究

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清IL-17、血管内皮生长因子(VEGF)水平与临床分期和生存预后的相关性。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测103例NSCLC患者和50例正常对照者血清IL-17、VEGF水平。分析NSCLC患者血清IL-17和VEGF水平两者之间的关系,分析IL-17、VEGF水平与TNM分期和预后的关系,采用Cox比例风险回归模型进行多因素预后分析。结果 NSCLC患者血清IL-17和VEGF水平较正常对照组显著增高(均P<0.01)。Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期患者血清VEGF水平两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05);血清IL-17水平Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),而Ⅲ、Ⅳ期之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。NSCLC患者血清IL-17与VEGF水平呈正相关(r2=0.745,P<0.01)。血清IL-17、VEGF水平高的患者中位生存时间较短,差异有统计学意义(均P<0.01)。多因素分析显示,血清IL-17、VEGF水平和TNM分期是独立的预后影响因素(均P<0.05)。结论 NSCLC患者血清IL-17、VEGF水平与NSCLC的TNM分期及生存预后密切相关,两者可作为NSCLC诊断和判断预后的检测指标。

血栓弹力图与常规凝血指标对老年创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓形成的预测价值分析

目的探讨血栓弹力图与常规凝血指标对老年创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)的预测价值。方法选取2020年1月至2021年2月上海交通大学附属第六人民医院收治的139例老年创伤性骨折患者为研究对象,根据患者术后静脉彩色多普勒超声结果将其分为DVT组与非DVT组,评估术前血栓弹力图参数[凝血反应时间(reaction time,R)、血液凝固时间(clotting time,K)、凝固角(α角)、最大振幅(maximum amplitude,MA)]与常规凝血指标[凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原(fibrinogen,Fib)、D-二聚体]对老年创伤性骨折患者术后下肢DVT的预测效能。结果全部患者中共有28例术后发生DVT,总发生率为20.1%,血栓发生于术后3~9 d,其中21例(75.0%)患者无明显不适,全部DVT患者均痊愈。DVT组患者术前R、PT、APTT、TT均显著短于非DVT组(均P<0.05),K显著长于非DVT组(P<0.05),α角、MA和年龄均显著大于非DVT组(均P<0.05),D-二聚体水平显著高于非DVT组(P<0.05)。两组患者性别、体质量指数、骨折部位、Fib水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。针对患者术后有无发生DVT绘制受试者操作特征曲线,结果表明术前K、α角、MA、PT、D-二聚体对DVT的发生具有中等预测价值[曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.7~0.9],R、APTT、TT、Fib的预测价值均较低(均AUC<0.7)。结论老年创伤性骨折患者术后DVT发生率较高,K、α角、MA这3项血栓弹力图参数与PT、D-二聚体能有效筛查DVT高危人群。

浅谈水电站钢闸门的腐蚀原因及防腐处理技术

近年来,随着社会经济的不断发展,水质类型也呈现多样化和复杂化,因此在不同环境下的钢闸门制作材料也略有不同,防腐处理技术更是差别巨大。许多水利工程在设计时未考虑到钢闸门在不同的恶劣条件中运行,对水质分析不够深入,没有针对不同水质选用相应材质的钢闸门,从而经常出现钢闸门被腐蚀的情况,导致工程质量大幅降低。结合近年来水电站工程钢闸门维护经验及现状,对水电站钢闸门的腐蚀原理进一步剖析,介绍了如何选择防腐蚀的方法,从而为水电站钢闸门防腐工程提供参考。表1个。

leptin和HIF-1α对慢性阻塞性肺疾病患者预后影响的研究

目的探讨血清瘦素(leptin)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者预后的影响。方法选取2013年8月至2016年8月在浙江省人民医院诊治的稳定期COPD患者83例(COPD组),同期本院体检中心的健康体检者45例作为正常对照组。COPD患者检测肺功能,进行改良版英国医学研究委员会(mMRC)呼吸困难问卷评分及统计上一年急性加重次数。采用ELISA法检测两组受试者的血清leptin和HIF-1α水平并进行比较,将COPD组患者血清leptin/BMI和HIF-1α水平与其GOLD分级、mMRC呼吸困难问卷评分及上一年急性加重次数进行统计分析,对30个月随访期内的患者进行生存分析及预后多因素Cox比例风险回归模型分析。结果COPD组患者leptin/BMI和HIF-1α水平均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。COPD组患者中GOLD分级高、mMRC呼吸困难问卷评分高、上一年急性加重次数≥2次、病情严重程度重的患者leptin/BMI和HIF-1α水平较高,血清leptin/BMI水平和HIF-1α水平呈正相关(r=0.64,P<0.01)。COPD组患者血清leptin/BMI、HIF-1α水平和第一秒用力呼气容积(FEV1)%均呈负相关(r=-0.59和-0.45,均P<0.01),与mMRC呼吸困难问卷评分均呈正相关(r=0.40和0.22,均P<0.05),与上一年急性加重次数均呈正相关(r=0.75和0.53,均P<0.01)。COPD组患者血清leptin/BMI、HIF-1α水平与病情严重程度均呈正相关(r=0.48和0.73,均P<0.01)。Cox比例风险回归模型显示,血清leptin/BMI及FEV1%是影响COPD组患者预后的因素(均P<0.05)。结论血清leptin/BMI和HIF-1α的水平与COPD的病情发展有关,leptin/BMI水平高的COPD患者预后较差。

创伤后肘关节僵硬诊治进展

创伤后肘关节僵硬是一种发生率较高的致残性疾病,其发病机制包括软组织挛缩、异位骨化、关节外和关节内骨折畸形愈合、骨不连和关节软骨缺失等。目前创伤后肘关节僵硬诊断主要应用Mayo肘关节功能评分(MEPS),近年新提出的上海肘关节功能障碍评分(SHEDS)从肘关节活动能力、肘关节相关症状和患者满意度3个方面对肘关节功能进行评分,能更有效地评价创伤后僵硬肘关节功能。创伤后肘关节僵硬治疗包括手术治疗和非手术治疗。常见手术方式包括开放性松解术、关节镜下松解术、关节间置成形术、全肘关节置换术、部分肘关节置换术等。近年利用肘管支持带联合锚钉重建肘关节内侧副韧带、改良铰链式肘关节外固定支架等方法及异位骨化放疗联合药物治疗在创伤后肘关节僵硬治疗中得到应用。该文就创伤后肘关节僵硬诊治进展作一综述。

女职工劳动保护和社会保障对策研究

在企事业单位的生产劳动和日常工作中,需要对女性进行全方位的、系统性的保护。从女职工劳动保护的重要意义出发,分析女性劳动保护的原因,总结目前国内女职工劳动保护存在的问题并提出相应的社会保障对策,以期促进女性职工的身心健康和社会、企业的和谐有序发展。

开心果壳活性炭对含Cr(Ⅵ)废水吸附性能及其吸附热动力学研究

对开心果壳制备的生物质活性炭吸附剂,采用ZnCl2活化,研究其对Cr(Ⅵ)吸附效果。通过批次实验,研究了活性炭对废水中Cr(Ⅵ)吸附的影响因素,如溶液pH、吸附剂用量、接触时间和溶液的初始浓度、吸附热动力学等。结果表明:开心果壳活性炭的BET的比表面积达1677.61 m2·g-1,孔径约为29.73 nm的介孔结构,活化能约为4.39 kJ·mol-1;室温下,开心果壳活性炭投入量为1.25 g·L-1、吸附90 min、模拟含Cr(Ⅵ)溶液初始浓度0.8 mmol·L-1、pH值=2时,吸附效果最佳,Cr(Ⅵ)去除率在80%以上。采用微量热法研究了在最佳吸附条件下,开心果壳活性炭吸附Cr(Ⅵ)离子的热动力学性质,得到了该过程活化能为Ea=4.39 kJomol-1,吸附温度308.15K时,速率常数k=3.269×10-3/s。

基于新零售的农产品营销模式创新

在互联网浪潮的推动下,零售业不断洗牌。这种以互联网为依托,线上服务、线下体验以及与现代物流相结合的新零售模式为我国农产品的营销模式创新带来了新契机。我国传统农产品的营销模式的局限性越发明显,借由新零售理念构建我国农产品营销新模式。

“四三二四”共育学徒制工匠两栖双线孵化新零售人才——以安徽工商职业学院为例

顺应教育部“现代学徒制”、人力资源与社会保障部和财政部“企业新型学徒制”的要求,安徽工商职业学院连锁专业依托中国连锁百强企业——永辉超市,创新性地将“现代学徒制”与“企业新型学徒制”同时推进,通过构建“四三二四”两栖双线的学徒制工匠型人才培养模式,取得一定成效,为高职院校孵化适应经济社会发展需要的工匠型新零售人才提供参考。

意面腕损伤的诊断与治疗

意面腕损伤是一类前臂远段及腕部掌侧深开放伤的总称,患者以中青年男性居多,主要累及惯用手,但其定义尚存争议。有学者建议根据损伤结构数量、损伤机制和接受修复手术的时间等因素对意面腕损伤加以分型。患者多于急诊就诊,一期手术治疗常不可避免。规律而持续的术后康复训练能够促进患肢功能恢复,但伴有神经损伤时功能恢复较差。接诊此类患者,应当详细告知疾病严重性和手术治疗、规律随访的必要性。

“互联网+”环境下安徽省服务型企业电子商务就绪发展策略研究

在"互联网+"时代下,服务型企业只有利用互联网及电子商务的集成优势,做好电子商务就绪工作,才能适应不断发展的全球信息化浪潮。文章从安徽省服务型企业及其电子商务就绪工作现状入手,分析了服务型企业电子商务就绪发展的策略,以期促进服务业的迅速健康发展。