基于N和G蛋白的HeV抗体间接ELISA检测方法的建立

为了建立亨德拉病毒(HeV)抗体的间接ELISA检测方法,人工合成HeV的N和G基因,并将其分别连接到原核表达载体PET-30a,经IPTG诱导、变复性处理及纯化后获得表达蛋白,免疫健康马获得阳性血清,用矩阵法对蛋白包被浓度和一抗稀释倍数进行确定,优化包被时间、封闭剂以及孵育时间等技术参数,并对建立方法的灵敏性、特异性、重复性和准确性进行评估。经SDS-PAGE和Western blot验证,N和G两个蛋白均实现高效表达,间接ELISA方法中二者的最佳包被浓度分别为10μg/mL和8μg/mL,一抗血清的稀释倍数为1∶800,优化后的最佳反应条件为:N蛋白4℃包被过夜,5%脱脂奶粉37℃封闭2 h,一抗孵育时间30 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用60 min;G蛋白4℃包被过夜,2%BSA 37℃封闭2 h,一抗孵育时间80 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用80 min。结果表明,所建方法N蛋白的灵敏性大于1∶12800,G蛋白大于1∶6400,二者的临界值分别为0.235和0.267,特异性良好,批内、批间变异系数均小于10%,重复性良好,二者ROC曲线下面积分别为0.91和0.93,准确性高。试验结果可为海关、口岸以及出入境检验检疫等部门HeV临床血清学诊断提供技术支撑。

三七与西洋参种间杂交F1代无性系SSR分子标记及倍性鉴定

目的:通过SSR分子标记技术及流式细胞术对三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen与西洋参Panax quinquefolium L.杂交F1代杂种进行真实性鉴定。方法:设计、筛选引物,对随机选取的60份杂交F1代无性系幼苗进行SSR分子鉴定;裂解样品细胞,利用流式细胞仪对60份样品进行倍性分析。结果:筛选出Q2、Q5两条引物可用于三七与西洋参杂交F1代的鉴定,在60份样品中,共有39份具有双亲互补条带;利用流式细胞仪对相同的60份样品进行检测,三倍体样品数为39份,表现为双亲互补条带的样品倍性检测结果均为三倍体,可认定为真杂种。结论:杂交F1代的真实杂种率为65%,SSR分析与倍性检测结果相互印证,证实了鉴定结果的可靠性。

交流电弧直读原子发射光谱法在矿石中定量和半定量分析的应用

采用内标法以对数坐标进行拟合曲线,光谱可定量的元素是标准曲线线性较好的,可计算矿石中元素的准确含量,光谱不可定量的元素,在摄谱时获得了这些元素的谱线强度(即为黑度),用目视法与一起摄谱的标样比较谱线的黑度,确定这些元素大致质量分数范围,实现了矿石中定量和半定量元素的分析检测,一次摄谱可以同时测定31个元素,满足客户需求,同时也是试验室对于矿石盲样分析不可缺少的分析手段之一。

槐耳发酵液乙酸乙酯部位化学成分的研究

目的探究槐耳Trames robiniophila Murrll.发酵液乙酸乙酯部位的化学成分。方法槐耳发酵液乙酸乙酯部位采用硅胶、ODS、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为尿嘧啶(1)、3,4-二羟基苯甲酸甲酯(2)、3,4-二羟基苯甲酸(3)、1-苯基-1,2-丙二醇(4)、环(亮氨酸-脯氨酸)(5)、环(苯丙氨酸-丙氨酸)(6)、环(4-S-羟基-R-脯氨酸-R-异亮氨酸)(7)、环(苯丙氨酸-甘氨酸)(8)、环(D-羟脯氨酸-L苯丙氨酸)(9)、环(L苯丙氨酸-L羟脯氨酸)(10)、对羟基苯甲酸甲酯(11)、对羟基苯甲酸(12)、对羟基苯甲醛(13)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(14)、环(丙氨酸-异亮氨酸)(15)、环(D-亮氨酸-反-4-羟基-L-脯氨酸)(16)。结论所有化合物均为首次从该真菌发酵液中分离得到。

山药柠檬复合果酱的研制

研究了以山药、柠檬两种药食同源材料为原料,制成低糖风味果酱。通过单因素试验和正交试验探究山药浆与柠檬汁比例、柠檬皮添加量,复合糖添加量及煮制时间等对果酱品质的影响,并挑选最佳工艺。结果表明:当山药浆与柠檬汁比为17∶3,糖的添加量为混合果蔬汁的45%,果皮添加量为混合果蔬汁的21%,煮制时间为17 min时,山药柠檬复合果酱的品质最好。该果酱呈浅黄色,质地细腻,柠檬果皮颗粒均匀分散于其中,有浓郁的柠檬香气。

糖基化亚硝基血红蛋白色素特性的研究

文章以猪新鲜血液为基本材料,经离心得到亚硝基血红蛋白,糖基化形成糖基化亚硝基血红蛋白色素,增强其溶解能力和稳定性,且赋予产品一定的香味。结果表明,糖基化亚硝基血红蛋白色素在真空冷冻干燥和60℃下溶解性能良好。并且在-18℃贮藏条件下糖基化亚硝基血红蛋白色素稳定性较好,此外,光照、氧化剂及金属离子也是影响糖基化稳定性的重要因素。文章为糖化蛋白在食品加工中的研究奠定了理论依据。

酮咯酸氨丁三醇在老年人全髋关节置换术术后的作用

目的评价酮咯酸氨丁三醇在老年人全髋关节置换手术术后镇痛中的应用价值及对体液免疫及细胞免疫的影响。方法随机选取2015年2月至2019年5月我院收治的连续硬膜外麻醉行全髋关节置换术的老年患者62例,以计算机随机数法分为观察组及对照组,每组31例,观察组术后给予酮咯酸氨丁三醇90 mg+舒芬太尼150μg+雷莫司琼300 mg进行患者自控镇痛,对照组给予舒芬太尼150μg+雷莫司琼300 mg进行自控镇痛,比较术后不同时点患者NRS评分,术后关节功能恢复时间,髋关节功能Harris评分及生活质量SF-36评分。以全自动生化仪及流式细胞术检测术后体液免疫及细胞免疫变化。结果术后不同时点NRS评分观察组均低于对照组,观察组与对照组在术后16 h、20 h、36 h、48 h、60 h、72 h的NRS评分差异有统计学意义(P<0.05)。麻醉消除后,观察组髋关节外展45°时间及直腿抬高30°短于对照组(P<0.01),Harris评分高于对照组(P<0.05),近期生活质量SF-36评分高于对照组(P<0.05)。与术前比较,术后24 h、48 h、72 h两组体液免疫指标(IgM、IgA、IgG)及细胞免疫指标(CD3^+、CD4^+/CD8^+)比较差异有统计学意义(P<0.05);术后48 h,观察组IgM、CD3^+、CD4^+/CD8^+高于对照组(P<0.05);术后72 h,观察组IgM、IgA、CD3^+、CD4^+/CD8^+高于对照组(P<0.05)。结论酮咯酸氨丁三醇在老年人全髋关节置换术术后应用可提高镇痛效果,促进患者免疫功能恢复。

人参中人参总皂苷测定方法研究

建立了一种人参中人参总皂苷的测定方法。采用氨水将丙二酰基人参皂苷转化为相应的中性皂苷,超高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1、Re、Rf、Ro、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd的量,9种人参皂苷总量可代表人参中主要皂苷含量。生晒参片中人参总皂苷含量较低,生晒参须中人参总皂苷含量较高,光支生晒参和全须生晒参总人参皂苷含量在2.11%～6.01%之间。该方法准确,重复性好,完善了人参质量评价体系。

虾仁干贝香菇复合型海鲜拌饭酱的研究

以虾仁、干贝、鲜香菇、干辣椒、花生油为主要原料研制一种营养、美味的复合型海鲜拌饭酱。利用单因素实验和正交实验确定了原料配比,以100g总量计算,即花生油和甜面酱之比为1∶1,干辣椒为5%,虾仁和干贝之比为1∶5,鲜香菇为6%,加热的最佳温度为85℃。所得到的海鲜拌饭酱具有独特的风味,填补了目前市场上该类型拌饭酱的空缺。

鲜人参贮存过程中淀粉和果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量变化分析

为探明贮存时间对鲜人参中淀粉和小分子糖含量的影响,采用双波长比色法和超高效液相色谱法,分别测定了贮存0、10、20、30、40、50 d鲜人参中淀粉和果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的含量。结果表明,鲜人参贮存过程中淀粉逐渐向蔗糖转化,在4℃条件下贮存20 d,淀粉含量降低了44%,生产中应根据需要严格控制贮存时间。

植物人工种子包埋基质研究进展

人工种子是细胞工程中最年轻的一项新兴技术,在农林业中具有很大的应用前景。本文综述了人工种子包埋基质在国内、外的研究进展及其在贮藏防腐中的应用,包括人工种子的概念和特点、人工胚乳成分的筛选、人工种皮的研制以及不同的包埋基质在贮藏和防腐研究中的进展。

水煮薇菜中食品添加剂的检测

以水煮薇菜为原料,经破碎提取,使用高效液相色谱的方法同时检测5种食品添加剂含量,包括安赛蜜、糖精钠、山梨酸、苯甲酸、脱氢醋酸钠。结果表明:使用Waters SymmetryShield C_(18)(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱进行分离,流动相为0.02mol/L乙酸铵-甲醇(100+5)缓冲溶液,检测波长为220mm,一次直接进样,同时测定。此法分离效果好,回收率高,操作简便,适合大批量同时检测。

四倍体人参组培苗与其同源八倍体叶片超微结构特征

为分析不同倍性人参组培苗的叶片结构特征,本研究采用透射电镜法和流式细胞倍性检测法,以人参组培苗四倍体与经秋水仙素加倍后离体培养得到的同源八倍体组培苗为材料,比较2种倍性的组培苗外部形态、倍性检测分析和叶片超微结构。结果表明,经流式细胞仪检测,加倍后得到的人参组培苗的G1期稳定峰值是四倍体的2倍,由此推断加倍后的人参组培苗为八倍体;与四倍体相比,同源八倍体在植株数、幼芽数、株高3个性状方面显著降低(P<0.05),但在叶宽和叶长方面显著增加(P<0.05);人参组培苗四倍体与其同源八倍体叶片细胞层数分别为5层和7层,组培条件下2种材料的叶片栅栏组织和海绵组织分化均不明显,八倍体较四倍体组培苗的叶片厚度,栅栏组织和海绵组织总厚度分别增加了39.30%和51.02%,表皮细胞厚度增加,叶绿体内的基粒垛叠减少。本研究提示,不同倍性人参组培苗在5种表型性状和超微结构上表现出显著差异。

响应面法优化超高压提取人参花总皂苷工艺研究

研究响应面法优化超高压提取人参花总皂苷的最佳工艺。采用单因素试验法考察样品乙醇浓度、提取压力、料液比和保压时间对超高压提取人参花总皂苷含量影响较大的因素与水平,以紫外-可见分光光度法测定人参花总皂苷含量为考察指标,利用Designexpert软件通过Box-Behnken设计的响应面法对提取工艺参数进行优化。最佳提取工艺参数为乙醇浓度72%、提取压力423MPa、料液比1∶50(g∶mL)和保压时间4min。在此条件下,测得人参花总皂苷含量的实际值为36.57mg/g,与理论值相比误差为0.012%,说明该模型可靠。该方法科学、合理、可行,且可在常温下进行,绿色环保。研究结果对于人参花资源的精深开发与应用具有一定的借鉴意义。

人参中精氨酸双糖苷和单糖苷的研究进展

人参作为我国传统的一种药食同源植物,已被广泛应用于流行性功能性食品和膳食补充剂中。在其加工过程中(蒸制和烘烤等),很容易就会发生美拉德反应。精氨酸双糖苷(arginyl-fructosyl-glucose,AFG)和精氨酸单糖苷(arginyl-fructose,AF)就是通过美拉德反应生成的一类比较典型的化合物,分别是精氨酸和麦芽糖或葡萄糖在美拉德反应早期形成的主要阿马里多(Amadori)重排化合物,既可通过蒸制和烘烤人参进行制备,又可通过精氨酸和糖反应进行人工合成。由于目前关于AFG和AF的研究相对较少,且常规的药理活性尚未综合报道,因此本文通过对人参中AFG和AF的理化性质、制备方法、含量测定以及药理活性进行综述,以期为今后改进制备工艺、研究和产品开发提供理论依据。

不同采收时期五味子叶中无机元素含量分析及有害元素安全性评价

目的:研究不同采收时期五味子叶中无机元素含量之间的相似性和差异性,对所含有害金属进行安全性评价,并确定最佳采收期。方法:采用湿法消解-电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定不同采收时期(5月上旬至8月下旬)五味子叶中25个无机元素的含量。结果:不同采收时期五味子叶中Mg、Ca、Al、Mn、Fe元素含量丰富,且有害元素均在安全阈值内,若仅以无机元素含量为评价指标,最佳采收期在7月下旬到8月下旬。若从安全性和植物生长状态方面考虑,7月下旬五味子叶的品质最好。结论:该研究讨论了五味子叶的最佳采收期,可为五味子的进一步开发利用提供基础。

人参免疫调节作用研究进展

人参是我国传统中药,具有多种生物活性,现已有大量文献报道人参在癌症、心血管疾病、神经系统疾病的治疗和机体免疫调节系统中发挥着重要作用。人参作为免疫调节剂被应用于调节机体免疫系统,其免疫调节作用及其作用机制已成为研究热点。本文综述了有关人参对固有性免疫应答和适应性免疫应答调节作用方面的研究进展,详述了人参对巨噬细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞等几种免疫细胞的调节作用,为进一步对人参及其产品的开发提供一定的科学理论依据。

尾随半挂车队列行进的轿车燃油经济性研究

为了精确研究队列中汽车的燃油消耗情况,以一辆轿车尾随一辆半挂车为例,对轿车队列尾随过程进行数值模拟,得到尾随过程中轿车的气动阻力系数.建立轿车散热器-风扇一维散热模型,得到轿车风扇的功率,利用汽车行驶方程,推导得到基于气动阻力系数及风扇功率的车辆净燃油节省率公式,研究队列中尾随轿车的燃油经济性.结果表明:发动机舱散热对尾随轿车的燃油消耗有一定影响,且间距越大影响越大;轿车的净燃油节省率随车间距的增大而减小,在间距为0.5至1.0倍轿车车长内时,轿车的净燃油节省率对间距变化最敏感.

西洋参地上部分化学成分研究进展

西洋参是五加科人参属植物,在我国使用已经有200多年的历史,现已被国家卫生健康委员会和国家市场监督管理总局列为药物和食品同源产品。经过近年来学者的研究表明,其地上部位也同样具有药用价值,因此本文从中草药书籍和包括SciFinder、爱思唯尔数据库、文献服务检索系统、科学指引数据库、百度学术、中国知网以及其他不同的网站在内的科学数据库中收集有关西洋参地上部位(茎叶、花蕾、果实和芦头)的信息,对西洋参地上部位的化学成分和药理学进展进行总结,为深入研究该药用植物地上部位的化学成分、药理活性以及实现资源综合利用提供参考。

细辛化学成分提取方法和药理活性研究进展

细辛为我国传统上品中药,被历代古籍药典所收载,具有多样的化学成分和广泛的药理活性。该文就近年细辛有效活性成分、提取工艺及药理活性进行综述,为其实际应用与产品开发提供理论依据。