不同产地甘草中核苷和碱基类成分分析与评价

为揭示不同产地甘草物质基础不同,本研究采用UPLC-TQ/MS测定153批不同产地甘草样品中12种核苷、碱基类成分含量,并利用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)进行不同产地质量特征分析。研究结果显示,不同产地总核苷、碱基类成分含量宁夏>甘肃>内蒙古>新疆,产地之间存在显著差异(P<0.05)。甘草核苷类成分以胞苷和鸟苷含量较高,二者占总核苷和碱基含量的26.2%~47.8%;碱基类成分以腺嘌呤和鸟嘌呤较高,二者占总核苷和碱基含量的19.3%~38.7%。基于测定的12种核苷、碱基类成分,PLS-DA判别分析可以将不同产地的甘草分为两组,一组为宁夏和内蒙古产甘草,另外一组为甘肃和新疆产甘草,主要差异成分为鸟嘌呤、腺嘌呤、尿苷、胞苷和鸟苷。进一步采用PLS-DA分别分析两个组内不同产地的甘草质量特征显示,甘肃和新疆产甘草可以明确区分,宁夏和内蒙古产甘草不能准确区分。以上研究结果表明,不同产地甘草中核苷、碱基类成分存在差异,进而影响其质量特征。基于核苷、碱基类成分分析,宁夏和内蒙古产甘草质量一致度较高。本研究为揭示不同产地甘草质量存在差异提供了理论支持,为其合理开发利用奠定了基础。

基于心脏磁共振特征追踪技术的心肌应变评估心肌淀粉样变性患者的预后

目的:探讨基于心脏磁共振特征追踪(CMR?FT)技术的左心室心肌应变评估心肌淀粉样变性(CA)患者预后的可行性。方法:回顾性分析我院确诊并行CMR检查的33例轻链型CA患者,使用CVI42软件测量左心室整体和各节段(基底段、中间段、心尖段)水平的3D径向应变(RS)、周向应变(CS)、纵向应变(LS),通过随访生存时间,比较两组患者的预后结果。结果:Kaplan-Meier生存曲线表明RS_(Basal)、RS_(Mid)、CS_(Basal)绝对值降低,患者预后较差(χ^(2)=8.177,8.386,8.386;P=0.004,0.004,0.003)。结论:CMR-FT技术用于左心室的心肌应变,特别是RS_(Basal)、RS_(Mid)、CS_(Basal)对于评估CA患者的预后存在临床价值。

冷冻保存技术在蜜蜂精液保存中的研究与应用

蜜蜂精液冷冻保存对蜜蜂种质资源保护和品种改良具有重要意义,有利于蜜蜂育种中的后裔测定和基因组选择,加快育种进程。蜜蜂精子结构特殊,冷冻保存对其活力和受精率有较大影响,目前该技术尚未广泛应用。该文综述了蜜蜂精液冷冻保存的研究简况、蜜蜂精子的结构、冷冻损伤机理和精液冷冻技术的研究进展,以期为今后进一步优化改进蜜蜂精液冷冻保存技术提供参考。

污泥脱水技术研究进展及碳排放比较分析

本文综述了几种常规污泥脱水技术(污泥浓缩、机械脱水和深度脱水)和几种新兴的污泥低能耗深度脱水技术(低温干化、生物干化和超临界CO_(2)脱水)的原理及特点,并重点对重力浓缩、机械脱水、预处理脱水、热干化、太阳能干化、热泵干化、生物干化、超临界CO_(2)脱水这几种技术进行了碳排放核算和对比分析.结果表明,常规脱水技术相对较为成熟,应用较广,但存在能耗高、药耗高、碳排放高的“三高”问题.其中,污泥热干化技术的碳排放量最大(2070.21kgCO_(2)/t DS),使用化学药剂产生的碳排放占机械脱水和预处理脱水技术碳排放的75%以上.新兴的太阳能干化、热泵干化、生物干化和超临界CO_(2)脱水技术的碳排放量分别为32.67,1074.36,58.78,490.16kgCO_(2)/t DS,表现出较好的碳减排潜力,通过推进优化工艺技术,降低运行成本,有望替代常规脱水技术.本研究结果可为污泥低碳脱水技术的开发和选择提供重要的参考依据.

树枝状聚合物对聚乳酸熔体微分电纺纤维膜的增韧改性研究

采用树枝状聚合物CYD-T151为增塑剂,通过熔融共混方式对聚乳酸(PLA)进行改性,探究了CYD-T151含量、纺丝温度和纺丝电压对熔体微分电纺PLA及PLA/CYD-T151纤维平均直径、直径分布和纤维膜拉伸力学性能的影响。结果表明,树枝状聚合物CYD-T151的加入可有效提高PLA的熔体流动性,降低纤维细度,当CYD-T151含量(质量分数,下同)为1.25%、纺丝温度为240℃、纺丝电压为55 kV时,熔体电纺纤维的纤维平均直径为1.360μm,较纯PLA减小了49.72%;树枝状聚合物CYD-T151作为增塑剂,可有效提高PLA熔体电纺纤维膜的韧性,当CYD-T151含量为1.25%,纺丝温度为240℃,纺丝电压为55 kV时,PLA/CYD-T151纤维膜的抗拉强度和断裂伸长率分别为11.50 MPa和92.33%,较纯PLA提高了4.07%和13.99%。

月面原位水资源获取技术与发展趋势

随着深空探测活动的持续推进,月球探测已成为开展行星际探测的重要部分.月球原位资源利用是保障载人月球探测及月面长期驻留的关键技术途径,中国已将月面原位水获取方法列为月球探测的关键技术之一.月面原位水获取方法主要分为极区水冰勘探开采和月壤氢还原制水两种技术途径.现有勘探到的水冰资源主要位于月球极区,分布不均匀,开采难度大.目前研究提出了多种不同类型的极区水冰勘探开采方法,但实际效果有待月面原位试验验证.月壤加氢还原制水技术方法工作条件不受区域限制,应用范围较广,但仍存在反应条件要求高、能耗大等技术限制,未来需在节能和有效矿物成分富集等方面有所突破.

高速水洞中超空泡稳定性与通气率定量试验研究

超空泡航行体通气规律对空泡形态控制具有重要意义。本文描述了在高速水洞中建立水下航行体通气率对超空泡形态及稳定性影响的一种试验研究方法。基于不同空化器和模型攻角条件下的空泡形态及通气率测量试验结果,总结得到无量纲通气率计算的经验表达式。通过对有、无尾翼条件下的通气率试验进行比较,初步获得尾翼对超空泡泄气的影响规律。研究结果表明,通气率需要保持在一定范围内方可获得形状稳定、边界清晰的通气超空泡。依据试验结果给出了超空泡稳定性的判别方法。

山姜素调节VEGF/SphK1/S1P信号通路对膝骨关节炎大鼠血管生成的影响

目的探讨山姜素(APT)调节血管内皮生长因子/鞘氨醇激酶1/1磷酸鞘氨醇(VEGF/SphK1/S1P)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠血管生成的影响。方法采用改良的Videman法构建KOA大鼠模型,将90只大鼠分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、山姜素低剂量组(L-APT组)、山姜素高剂量组(H-APT组)、山姜素高剂量组+慢病毒阴性对照组(APT+NC组)、山姜素高剂量组+过表达SphK1慢病毒组(APT+SphK1组),每组15只。HE染色观察大鼠软骨组织病理变化;酶联免疫吸附试验测定软骨组织白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)水平;TUNEL检测软骨组织细胞凋亡情况;免疫组化检测血管内皮生长因子(VEGF)、CD31蛋白表达情况;Western blot检测血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、磷酸化VEGFR2(p-VEGFR2)、SphK1、S1P蛋白水平。结果与Control组比较,Model组大鼠出现病理损伤,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-13、VEGF阳性表达、CD31阳性表达和p-VEGFR2、SphK1、S1P蛋白表达水平增加(P<0.05);与Model组比较,L-APT组、H-APT组病理损伤明显减轻,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-13、VEGF阳性表达、CD31阳性表达和pVEGFR2、SphK1、S1P蛋白表达水平降低(P<0.05);与APT+NC组比较,APT+SphK1组软骨组织病理损伤加重,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-13、VEGF阳性表达、CD31阳性表达和p-VEGFR2、SphK1、S1P蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论APT通过抑制VEGF/SphK1/S1P信号通路抑制KOA大鼠血管生成。

金雀异黄素通过调控TGF-β1/Smad3信号通路对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的 探讨金雀异黄素减轻糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及潜在机制。方法 通过高脂饮食结合腹腔注射链脲菌素(STZ)法建立大鼠2型糖尿病(T2DM)模型,并随机分为模型组、二甲双胍组(100 mg/kg)及金雀异黄素低、高剂量组(50、100 mg/kg),另设正常组给予常规饮食,每组10只。各给药组灌胃给药8周,检测体质量、心功能、心脏质量及心脏指数,血清CK-MB、AST及LDH活性,观察心肌纤维化程度,心肌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad同源物3(Smad3)mRNA和蛋白表达,心肌组织Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)蛋白分布及表达。结果 与模型组比较,金雀异黄素各剂量组大鼠体质量、每搏输出量(SV)及射血分数(EF)升高(P<0.01),心脏指数、左心室收缩末期内径(LVIDs)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性降低(P<0.05,P<0.01),心肌组织胶原相对面积及CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01),心肌组织TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),金雀异黄素高剂量组左心室舒张末期内径(LVIDd)降低(P<0.05)。结论 金雀异黄素可通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减轻2型糖尿病大鼠心肌纤维化作用,进而发挥保护心脏效应。

小麦耐盐基因TaHKT1的新单倍型及其耐盐性评价

本研究利用0.5%盐胁迫对275份小麦品种(系)进行芽期耐盐性鉴定,测定发芽率、芽长、根长、根数、芽鲜质量、根鲜质量及根冠比等指标。利用主成分分析法将7个指标转化为3个主成分,累积贡献率为74.35%。通过主成分贡献率和隶属函数分析进一步将3个主成分简化为综合评价值(D)。根据D值的大小,利用聚类分析法将275份小麦品种(系)划分为高耐盐、中耐盐、耐盐、盐敏感和盐高敏感共5个等级,筛选出高耐盐种质11份、中耐盐107份、耐盐60份,累计占比64.7%。通过对13个小麦品种(系)进行TaHKT1基因序列分析,发现T∶T新单倍型与耐盐性相关。利用KASP标记对275份小麦品种(系)进行检测,有98份小麦品种(系)为新单倍型,占35.64%;新单倍型小麦品种(系)在各省份中所占比例不同。将小麦品种(系)的TaHKT1基因T∶T单倍型与耐盐性D值进行关联分析,结果表明,TaHKT1基因T∶T单倍型与小麦芽期耐盐性差异达极显著水平(p<0.01)。

毛蕊花糖苷对腺嘌呤所致不育症大鼠的影响

目的 探讨毛蕊花糖苷对腺嘌呤诱导的不育症大鼠的作用及其机制。方法 大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(100 mg/kg复方玄驹胶囊)和毛蕊花糖苷低、高剂量组(50、100 mg/kg)。除空白组外,其余各组每天灌胃150 mg/kg腺嘌呤,连续14 d,建立不育症大鼠模型。造模结束后,各组灌胃给予相应剂量药物,连续给药28 d。观察各组大鼠一般活动情况,计算脏器(肝脏、肾脏、睾丸、附睾)指数,于显微镜下观察精子情况,HE染色观察大鼠肝脏、肾脏及睾丸组织病理形态,并进行精子发生评估(Johnsen评分法),ELISA法检测血清T、LH、FSH、GnRH水平,RT-qPCR和Western blot法检测大鼠睾丸组织mTOR、LC3B、ULK1 mRNA和蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠肾脏指数升高(P<0.05),精子计数、精子活动率及精子指数降低(P<0.05),血清T、GnRH水平降低(P<0.05),LH、FSH水平升高(P<0.05),肾脏和睾丸组织病理损伤明显,睾丸组织mTOR mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),LC3B、ULK1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,毛蕊花糖苷高剂量组肾脏指数降低(P<0.05),精子计数、精子活动率升高(P<0.05),血清T水平升高(P<0.05),LH、FSH水平降低(P<0.05),肾脏和睾丸组织病理损伤有不同程度改善,睾丸组织mTOR mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),LC3B、ULK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05),且毛蕊花糖苷高剂量作用与阳性对照药复方玄驹胶囊相当。结论 毛蕊花糖苷能有效提高不育症大鼠的精子质量,改善性激素紊乱、生殖功能及肾脏、睾丸组织病理性损伤,其作用机制可能与增强正性调控自噬,调节下丘脑-垂体-睾丸轴紊乱有关。

UPLC-MS/MS法测定毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠的睾酮水平

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量评价干预效果。方法大鼠含药血浆以睾酮-C3为内标,用液液萃取法,以12000 r·min^(-1)离心10 min,取上清液,5μL进样分析。以Acquity UPLCⅢBEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱;以甲醇为流动相A、5 mL·L^(-1)甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,洗脱程序:流速为0.2 mL∙min^(-1);柱温为35℃;样品室温度为4℃;运行时间为10 min;质量检测器使用ESI离子源,正模式检测,睾酮及内标睾酮-C3用于定量的母→子离子对分别为m/z 289.2→97.0、m/z 291.4→101.1。借助药动学软件分析,获取空白组和毛蕊花糖苷干预组大鼠体内24 h睾酮曲线下面积(area under the curve,AUC)数据。结果睾酮质量浓度在1~1000 ng·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系。该方法日内、日间精密度RSD值均<10.84%,日内、日间准确度RE均<10.03%,样品提取回收率为95.82%~99.17%,置于进样器于4℃冰箱及长期冷冻稳定性RSD值均<10.63%。测定结果显示,毛蕊花糖苷干预组药峰浓度(peak concentration,C_(max))为7.92 ng·mL^(-1),空白组C_(max)为10.26 ng·mL^(-1)。与空白组比较,毛蕊花糖苷干预组大鼠体内睾酮24 h总AUC相对平稳。结论建立了UPLC-MS/MS测定不育症模型大鼠血浆睾酮含量的方法。从PK/PD角度比较分析推测出,给予毛蕊花糖苷干预后,不育症模型大鼠的24 h总体睾酮可基本恢复正常水平,从而发挥改善大鼠雄性生殖功能的作用。

蜜蜂资源形态测定的采样与保存方法研究

形态测定是蜜蜂种质资源评价必不可少的技术手段,本研究旨在优化采样与保存方法来提高蜜蜂形态测定工作的效率。通过各试验组不同采样与保存方法对比蜜蜂样品的伸吻率、组织损坏数量、色度及韧性的变化。结果表明,试验组B毙杀20 s、30s的伸吻率差异不显著(P>0.05),但均显著高于其他试验组(P<0.05);试验组D的蜜蜂组织损坏数量显著低于试验组E、F、G和对照组(P<0.05);在4℃环境中保存1~3个月对蜜蜂样本的色度和样本的韧性均没有影响。蜜蜂资源形态测定的样品建议使用2L/min流速的CO_(2)毙杀20 s,浸泡在75%酒精和0.5%甘油的保存液中,保存3个月内完成形态测定工作。

强冲击载荷下单向加筋板拉伸撕裂的临界条件

针对固支单向加筋板在冲击载荷下的拉伸撕裂临界条件开展研究,首先将均布冲击载荷下的固支单向加筋板简化为带板梁模型,基于固支梁冲击变形理论解给出了加筋板最大永久变形理论解,之后基于复合运动场模型,修正了固支梁端点拉伸应变与最大永久变形关系式,并以等效应变达到失效应变作为拉伸撕裂条件,建立了加筋板在冲击载荷下的拉伸撕裂临界条件。经过数值模拟验证,该最大永久变形理论解和拉伸撕裂临界条件具有适用性,理论与数值误差小于15%。

减税降费对企业投资效率的影响研究

减税降费政策是促进企业发展、提高市场活力的重要举措,对提高企业投资效率、推进供给侧改革具有重要意义。本文通过我国沪深A股上市公司2012-2020年的数据,对减税降费对企业投资效率的影响进行研究。研究结果表明:减税降费能够有效提升企业的投资效率;机制检验表明,减税降费可以通过缓解融资约束,减少企业投资不足的行为,通过降低信息不对称程度抑制过度投资的行为。通过进一步研究发现,减税降费对提高民营企业、低自由现金流企业投资效率的效果更为显著;政策对不同成长机会的企业影响效应有所区别;政策对市场化程度较高地区的企业投资不足的作用更加明显,而对市场化程度较低地区的企业过度投资的作用更为明显。本文还提出了推进减税降费政策,从而提高企业投资效率、促进企业高质量发展的政策建议。

3~17岁儿童屈光参数分布与等效球镜的相关性

目的分析3~17岁儿童屈光参数分布情况与等效球镜相关性。方法选择湖南省妇幼保健院2022年3月至2023年4月间在幼儿园及高中小学就读的3~17儿童作为研究对象,采用多阶段分层抽样法选择待调查对象;检测受试儿童屈光状态、角膜曲率半径(curvatureradius,CR)、眼轴长度(axial length,AL),并计算AL/CR。采用线性回归模型分析AL、CR、AL/CR与球镜度数(sphere equivalent,SE)的相关性,采用Forwardlogistics回归模型分析屈光参数联合应用预测SE模型,绘制ROC曲线分析屈光参数单独及联合应用预测SE的价值。结果本组研究共实际入组儿童791例,其中屈光不正检出率共674例,占比85.21%,其中近视104例(13.15%),远视570例(72.06%)。13~17岁组近视发生率最高(25.00%),8~12岁组次之(15.70%)3~7岁组最低(8.99%)。3~7岁组正视发生率最高(16.85%),8~12岁组次之(12.40%),13~17岁组最低(11.54%)。不同年龄组屈光状态检测结果、近视发生率差异有统计学意义(Χ^(2)=20.917,P<0.05);不同年龄组正视发生率差异无统计学意义(Χ^(2)=3.476,P>0.05);不同年龄组远视发生率差异无统计学意义(Χ^(2)=4.794,P>0.05)。随着年龄增长,研究对象SE数值逐渐变小,而AL和AL/CR数值则逐渐增大。不同年龄组SE、AL和AL/CR的差异均有统计学意义(P<0.05)。并且,3~7岁组SE值高于8~12岁组和13~17岁组(P<0.05),8~12岁组SE值高于13~17岁组(P<0.05);3~7岁组AL和AL/CR值低于8~12岁组和13~17岁组(P<0.05),8~12岁组AL和AL/CR值低于13~17岁组(P<0.05)。依照屈光度分组,不同组别儿童AL及AL/CR差异有统计学意义(P<0.05),各组CR水平差异无统计学意义(P>0.05)。AL与SE及AL/CR与SE呈显著线性相关关系,其相关模型分别为SE=-1.6893×AL+39.835及SE=-6.0592×AL/CR+17.823,但CR与SE无显著相关关系。采用屈光参数联合应用预测等效球镜模型为Log(P)=3.851-0.726×AL-0.602×AL/CR,且差异有统计学意义(P<0.05);采用屈光参数联合应用预测等效球镜模型预测儿童近视及远视的价值显著高于各指标单独应用,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论本地区3~17岁85.21%儿童存在屈光不正问题,且屈光参数分布与等效球镜呈显著相关相关性,屈光参数联合应用可显著提高单参数预测屈光不正的价值。

冷却剂泵试验台冷态调试性能分析

本文对某新建冷却剂泵试验台架冷态运行性能调试进行了概述,并进一步对台架测量误差和试验泵容差分别分析。结果表明:新建试验台架测量额定点与基准额定点误差为1.08%,其余试验结果与基准值误差均在1.6%以内,满足泵精度要求;以不同基准曲线额定点为试验泵性能要求,试验泵流量和扬程数据均在允许容差范围内。

混合所有制改革能促进国有企业绿色技术创新吗?

基于我国混合所有制改革背景,以2007—2021年A股上市公司为样本,从混合所有制改革的量与质两个层面分析混合所有制改革对国有企业绿色技术创新的影响。研究结果表明,股权多元化(量)和股权融合度(质)对国有企业绿色技术创新质量具有显著的正向促进作用;机制检验表明,高管薪酬激励和高管股权激励均具有中介效应,其中作用更为显著的是高管股权激励;进一步检验发现,股权多元化和股权融合度对国有企业绿色技术创新质量的促进作用在中央企业和商业竞争类国有企业更加显著。研究结论从提高国有企业绿色技术创新质量的视角为深化我国混合所有制改革提供了经验证据。

清醒开颅术:麻醉医师的挑战

清醒开颅术结合皮层电刺激、神经导航、电生理技术,使得神经外科能够最大程度安全地切除脑肿瘤,提高功能区病灶手术的效果、患者的总生存率和无进展生存率。在各种大脑功能区定位的方法中,术中唤醒的麻醉技术是一项极其重要的手段,实施充分的头皮神经阻滞、制定恰当合适的麻醉策略、充分掌握气管管理技术以及严密防范术中、术后并发症都是至关重要的关键步骤。清醒开术属于高风险手术范畴,术中需要多方协作,麻醉医师必须充分了解手术过程以及术中可能出现的各种情况,进行预防、处理,同时与患者、外科医师、电生理监测医师保持积极沟通配合,以确保手术安全有效的进行。

越冬初期和中期西方蜜蜂四个亚种的miRNA及其靶mRNA的比较分析

【目的】明确西方蜜蜂Apis mellifera微小RNA(microRNA,miRNA)在越冬期间的表达量变化,揭示miRNA及其靶mRNA与抗寒性的潜在关系,在miRNA组学层面进一步揭示西方蜜蜂抗寒性的分子机理。【方法】利用sRNA-seq技术鉴定西方蜜蜂4个亚种意大利蜜蜂A.m.ligustica、欧洲黑蜂A.m.mellifera、高加索蜂A.m.caucasica和卡尼鄂拉蜂A.m.carnica在越冬期初期和越冬中期的miRNA;根据P≤0.05且|log 2fold change|≥1标准筛选4个亚种在越冬不同时期的差异表达miRNA(differentially expressed miRNAs,DEmiRNAs)。利用相关生物信息学软件对筛选出的miRNA的靶mRNA进行预测,并对靶mRNA进行GO及KEGG数据库注释。根据靶向结合关系构建DEmiRNA和靶mRNA的调控网络,并利用Cytoscape进行可视化。随机选取ame-miR-263a-5p,ame-miR-184-3p,ame-miR-263b-5p,ame-miR-190-5p,ame-miR-6052-5p,ame-miR-9a-5p,ame-miR-100-5p和ame-miR-306-5p等8个DEmiRNA进行RT-qPCR验证。【结果】鉴定获得越冬期西方蜜蜂4个亚种210个miRNA,包括178个保守的miRNA和32个新的miRNA,长度介于18~30 nt,分布数量最多的长度为22和23 nt,首位碱基为U的miRNA数量最多。西方蜜蜂4个亚种在越冬初期和越冬中期表达量最高的DEmiRNAs为ame-miR-1-3p,ame-miR-276-3p和ame-miR-184-3p。意大利蜜蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出22个DEmiRNA,可靶向调控394条mRNA,这些mRNA分别注释到161个GO功能条目和16条KEGG通路上;欧洲黑蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出28个DEmiRNA,可靶向调控415条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和15条KEGG通路上;高加索蜂越冬初期vs越冬中期共筛选67个DEmiRNA,可靶向调控1021条mRNA,这些mRNA分别注释到171个GO功能条目和21条KEGG通路上;卡尼鄂拉蜂越冬初期vs越冬中期共筛选18个DEmiRNA,可靶向调控330条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和13条KEGG通路上。西方蜜蜂4个亚种DEmiRNA与靶mRNA之间形成较为复杂的调控网络。RT-qPCR结果显示8个DEmiRNA的表达趋势与测序数据一致,证实了本研究中测序数据的可靠性。【结论】本研究明确西方蜜蜂4个亚种越冬不同时期的miRNA表达量变化,筛选出多个潜在调控西方蜜蜂越冬期抗寒性的分子候选靶标miRNA,其中ame-miR-14-3p和ame-miR-3786-5p在欧洲黑蜂、高加索蜂和卡尼鄂拉蜂中负调控多个mRNA的表达,在意大利蜜蜂中并没有参与;miRNA通过调控靶基因的表达参与甘油磷酸脂代谢、MAPK信号通路和mTOR等关键信号通路参与西方蜜蜂的抗寒性。