新西兰白兔BMP 15基因的真核表达载体构建、表达模式及其在卵巢组织的表达

旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化的Pmcherry-N1和pCMV-Myc空载体,构建真核表达载体,利用生物信息学分析其编码蛋白的性质及结构。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术与Western blotting技术检测pCMV-Myc-BMP 15过表达情况。接下来,使用qRT-PCR检测BMP 15基因在不同组织中的表达水平。激光共聚焦方法检测BMP 15基因的亚细胞定位。利用免疫荧光技术检测内源BMP15在新西兰白兔卵巢组织定位情况。结果表明:克隆得到新西兰白兔BMP 15基因CDS区序列长1182 bp,PCR及测序结果表明pCMV-Myc-BMP 15和Pmcherry-N1-BMP 15真核表达载体构建成功。生物信息学分析显示,BMP 15基因编码393个氨基酸;BMP15蛋白不稳定系数为55.32,等电点大小为9.69,是一种稳定的碱性蛋白质。BMP15蛋白共有26个磷酸化位点,15个糖基化位点,存在信号肽,不存在跨膜结构域。系统进化树表明,新西兰白兔与猪亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。二级结构和三级结构分析结果表明,BMP15蛋白主要由α-螺旋(38.68%)、无规则卷曲(37.4%)、延伸链(15.52%)、β-转角(8.40%)组成,为混合型蛋白。蛋白互作关系预测发现,BMP15蛋白与FSHR、FIGLA、BMPR1B、AMHR2、NOBOX等卵巢生长发育的相关蛋白之间存在相互作用。不同组织表达分析显示,BMP 15基因在卵巢组织中特异性表达;激光共聚焦结果显示,BMP15主要存在于在细胞质中。将pCMV-Myc-BMP 15转染至HEK293T细胞内,BMP15的mRNA水平和蛋白水平均显著上调。卵巢组织免疫荧光检测结果显示,BMP15主要定位在卵巢颗粒细胞的细胞质中。本研究成功构建了BMP15的真核表达载体,对BMP 15基因及其编码的蛋白的理化性质和生物学特性进行了预测分析,在HEK293T细胞内成功过表达,并得到了该基因的亚细胞定位情况、组织表达情况及在卵巢组织的分布情况。为后续开展BMP 15基因在卵巢生长发育中的功能及机制研究提供了理论依据。

秸秆还田方式对土壤理化性质和玉米产量的影响

高强度集约化农业生产导致耕地质量下降、农田土壤退化,而秸秆还田是改善土壤环境、提高土壤有机质的重要途径。目前的秸秆还田方式主要针对表层土壤,忽略了对底土质量的改善效果。本研究设置了秸秆富集深层还田、秸秆覆盖还田、秸秆浅旋还田、秸秆深翻还田、秸秆不还田5种秸秆还田方式,以探究不同秸秆还田方式对不同土层土壤理化性质和玉米产量的影响,为高效利用秸秆资源、提高土壤质量和作物产量提供科学依据。本研究结果表明:秸秆覆盖还田提高了0~20 cm土层土壤含水量、有机碳含量、氮循环酶活性;深翻还田提高了表层土壤水分含量与磷循环酶活性;秸秆富集深层还田显著降低了20~40 cm土层土壤容重、增加了土壤含水量、有机碳含量、全氮含量、矿质氮含量以及胞外酶活性。与不还田相比,秸秆还田处理下玉米产量显著提高13.4%~21.0%。因此,秸秆还田是秸秆资源有效利用的重要方式,有利于改善农田土壤环境,提高土壤养分含量,减少化肥使用,促进作物增产,对农业可持续发展具有重要意义。秸秆富集深层还田对于改善底土质量,扩大土壤碳库,提高耕地质量和土地生产力具有重要作用,可以作为构建深厚肥沃耕层的有效措施。

海绵城市理念下山地城市蓝绿格局优化研究——以远安县中心城区为例

蓝绿设施建设是“海绵城市”建设的重要部分,以远安县中心城区为研究对象,“以水定绿”为规划方法,因地制宜地提升新老城区蓝绿服务功能,对未来海绵城市建设具有重要意义。根据城市降雨、地形、土地类型现状等构建远安县SCS雨洪淹没模型,结合城市绿地斑块、绿地点、路网等,分析了城区景观格局和绿地可达性,结果表明:(1)远安县被淹没区域多集中在水系附近及地形坡度平缓的区域;(2)老城区蓝绿建设较新城区更为合理,新城区蓝绿设施连接度还需加强;(3)老城区出行优势明显,游憩绿地空间上分布不均。并提出了研究对象蓝绿空间优化策略:完善滨河绿带,构建三重防洪体系;加强城市边缘地带的生态网络建设;提高老城区绿量。以科学、生态的蓝绿格局优化方法,实现可持续发展,并为其他山地县提供借鉴和指导。

低压采用箔式绕组的变压器优化设计

在配变及干变中低压常采用箔式绕组,本文通过具体的分析计算,在不增加材料成本的情况下,合理优化设计,有效地降低了箔式绕组的杂散损耗,有效地控制了绕组的局部热点,提高了变压器的安全运行及效率。

健康中国战略下医务人员健康素养胜任力现状及影响因素研究

目的探讨健康中国战略下医务人员健康素养胜任力现状及影响因素。方法2023年3—6月,采用健康素养胜任力量表对便利选取的428名医务人员进行调查。结果医务人员健康素养胜任力量表总分为(134.16±22.75)分,文化程度、工作年限、职称、执业类别、自评健康状况是其健康胜任力的主要影响因素。结论医务人员健康素养胜任力处于中等偏上水平,有待进一步提高。管理者应根据医务人员的特点,采取相应的干预措施,提升其健康素养胜任力,以更好地传播健康知识。

德阳市某医院医务人员营养午餐需求及影响因素的横断面研究

目的调查德阳市某医院医务人员对营养午餐的需求及其影响因素,为营养午餐的推广提供参考。方法通过网络在线调查系统对德阳市某医院医务人员进行横断面调查。调查问卷内容包括一般人口学特征、健康相关因素和营养午餐需求3个方面。同时构建了多元Logistic回归模型,以确定营养午餐需求的影响因素。结果调查对象共458人,其中男性58人,女性400人;年龄20-56岁,平均(30.84±6.92)岁;14.1%的调查对象体型为超质量或肥胖。336名(73.4%)调查对象表示,如果提供营养午餐,他们会选择营养午餐。单因素分析结果显示:已婚者比单身者(未婚或离异)更有可能选择营养午餐(77.8%vs.65.2%),差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,每天进餐次数及午餐地点不同的调查对象对营养午餐需求的差异均有统计学意义(P<0.05),其中每天进餐次数为3次的调查对象及午餐地点在单位食堂的调查对象表示会选择营养午餐的人数比例最高。相较于体型正常的调查对象,超质量或肥胖的调查对象更倾向于选择高纤低脂的营养午餐,并愿意为营养午餐支付更多的费用,同时也更倾向于参考营养标签(P<0.05)。多元Logistic回归分析表明,所在科室、每日进餐次数、午餐地点和运动频率是调查对象对营养午餐需求的影响因素(P<0.05)。结论医务人员常面临着大量的加班,普遍存在不健康的饮食行为。且本研究数据也显示,德阳市某医院的医务人员表现出对营养午餐有着强烈需求。因此,迫切需要为该院的医务人员提供营养午餐,以促进他们的健康。

不同品种鹅肉理化特性及其风味物质的比较分析

选取广东主产区五个品种鹅(狮头鹅、马岗鹅、乌鬃鹅、白鹅和阳江鹅),分别对其蛋白质、脂肪、水分、蒸煮损失率、质构等理化特性进行测定,并采用固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)法对挥发性风味物质进行测定分析。结果表明,5种鹅肉的各理化特性指标间均存在显著差异(P<0.05),74%的数据绝对值大于0.30,适宜采用主成分分析进行综合评价,通过理化特性的主成分分析提取了2个主成分表征原变量的88.48%的信息,综合排名由高到低为马岗鹅、狮头鹅、阳江鹅、白鹅、乌鬃鹅。5种蒸煮鹅肉共检出61种挥发性物质,其中醛类13种,醇类11种,烷烯烃类27种,酮类5种,芳香烃2种,酯类1种,其他类化合物2种,共有的挥发性风味物质11种。狮头鹅和乌鬃鹅的风味物质最为丰富,含量百分比分别为80.6%和73.77%;尤其己醛、壬醛、庚醛这三种风味物质分别达到46.67%和45.52%,醛类对广东品种鹅肉风味具有较大贡献。通过对不同品种鹅肉综合得分评价分析,为不同品种鹅肉深加工提供理论依据。

消胀方联合恩替卡韦治疗乙肝肝纤维化/肝硬化疗效观察

目的观察消胀方联合恩替卡韦治疗乙肝肝纤维化/肝硬化肝郁脾虚型患者的临床疗效。方法选择2016年1月-2020年1月上海中医药大学附属曙光医院治疗的乙肝肝纤维化/肝硬化肝郁脾虚型患者100例,采用随机对照方法将其分为治疗组和对照组,每组50例。治疗组予消胀方联合恩替卡韦治疗,对照组予恩替卡韦治疗,2组疗程均为12个月。比较2组治疗前及治疗12个月后中医证候积分及治疗12个月后中医证候疗效,观察比较2组患者治疗前后肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)]、HBV-DNA定量、细胞免疫功能指标、肝硬化程度(肝脏Fibroscan弹性值,APRI评分,FIB-4评分),肝纤维化指标[血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)]、肝脏B超积分、肝脏CT分级。结果治疗组47例、对照组46例完成研究。治疗12个月后,治疗组中医证候总有效率为78.72%(13/47),明显高于对照组的56.52%(26/46),差异有统计学意义(P<0.05);2组患者ALT、AST水平及HBV-DNA定量均明显下降(P均<0.05),且治疗组均明显低于对照组(P均<0.05);2组患者NK细胞、CD8+均明显升高(P均<0.05),CD4+与CD4+/CD8+均明显下降(P均<0.05),且治疗组NK细胞、CD8+均明显高于对照组(P均<0.05);2组患者Fibroscan弹性值、APRI评分、FIB-4评分均明显下降(P均<0.05),且治疗组均明显低于对照组(P均<0.05);2组Ⅳ-C和HA水平均明显下降(P均<0.05),且治疗组均明显低于对照组(P均<0.05);2组PCⅢ、LN、B超积分和肝脏CT分级与治疗前比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论消胀方联合恩替卡韦能够促进乙肝肝纤维化/肝硬化患者肝功能的恢复,提高机体免疫力,有利于病毒清除,减轻肝纤维化/肝硬化程度,疗效优于单独应用恩替卡韦抗病毒治疗。

土壤增温和秸秆还田对土壤养分和胞外酶活性的影响

气候变暖和秸秆还田是影响农田生态系统碳氮循环和土壤养分周转的重要因子,然而两者的交互作用尚缺乏系统研究。通过大田模拟试验,设置土壤正常温度+秸秆不还田、土壤正常温度+秸秆还田、土壤增温+秸秆不还田和土壤增温+秸秆还田四个处理,探讨土壤增温与秸秆还田对土壤养分循环及胞外酶活性的影响。结果显示,土壤增温使硝态氮含量、土壤可溶性有机碳含量和氧化酶活性分别增加了40.4%,25.8%和6.0%,但也使土壤水分、铵态氮含量与土壤微生物量碳分别损失了10.6%,33.4%和29.9%。秸秆还田则使土壤含水量、全氮、铵态氮、有效磷与可溶性有机碳的含量分别增加了7.5%,7.2%,44.1%,32.3%和18.4%,同时也使土壤碳氮磷循环酶的活性分别增加了46.2%,22.9%和20.6%。因此研究表明,土壤增温提高了氧化酶的活性,加速了土壤碳的转化,也使土壤氮矿化与硝化反应速率提高。秸秆还田通过增加外源有机物质,丰富了土壤的碳、氮源,使土壤养分含量提高,一定程度上弥补了增温带来的养分损失。

木瓜蛋白酶嫩化鹅胸肉的工艺优化

为改善鹅肉品质,该研究采用木瓜蛋白酶嫩化技术旨在分析不同处理条件对鹅肉的影响。在单因素试验的基础上,采用响应面分析进行四因素三水平工艺优化试验。分别以酶的质量分数(A)、温度(B)、pH值(C)、时间(D)四个因素作为自变量,以感官特征作为响应面指标,通过回归分析确定了获得最佳感官的加工条件为酶的质量分数0.076%,温度60℃,pH值7.6,时间55 min。此条件下的感官评价可以达到82.5分,于鹅肉处理前(59.7)有显著提高,剪切力为26.47 N,相比于嫩化前下降了38.83%,整体品质有明显的改善。实际感官品质结果与模型值接近,说明该模型具有良好的预测效果。为建立酶法嫩化技术提供了一定的数据和理论基础。

新西兰白兔CTSB、CTSS基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究

【目的】克隆新西兰白兔组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)与CTSS基因CDS区序列并进行生物信息学分析,探究其在新西兰白兔不同组织中的表达规律。【方法】采用PCR法扩增并克隆CTSB、CTSS基因CDS区序列,使用Mega 7.0软件构建系统进化树并分析氨基酸序列相似性;利用生物信息学软件分析CTSB、CTSS蛋白理化性质、跨膜结构、信号肽位点及亚细胞定位情况;用实时荧光定量PCR检测CTSB、CTSS基因在新西兰白兔不同组织中的表达量。【结果】新西兰白兔CTSB、CTSS基因CDS区序列长分别为1020、1023 bp,共编码339、340个氨基酸,蛋白分子质量分别为37.627、38.253 ku,理论等电点为5.53、8.40,不稳定系数为30.76、32.38,分别为酸性及碱性蛋白。新西兰白兔CTSB、CTSS基因氨基酸序列分别与猪、马的亲缘关系最近,与鸡亲缘关系较远。CTSB、CTSS蛋白二级结构均主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,二者三级结构预测结果与二级结构一致,均为亲水性蛋白;CTSB蛋白信号肽剪切位点位于第17—18位氨基酸处,含有1个N-端Propeptide-C1结构域与1个Peptidase-C1A-C结构域;CTSS蛋白信号肽剪切位点位于第25—26位氨基酸处,含有1个Inhibitor-129结构域与1个Peptidase-C1结构域。亚细胞定位结果表明,CTSB、CTSS蛋白均主要分布于细胞质(包括细胞壁)内。实时荧光定量PCR结果显示,CTSB基因在腹脂和肝脏组织中表达量较高,CTSS基因在脾脏组织中表达量最高,均显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】成功克隆新西兰白兔CTSB、CTSS基因CDS全长序列,揭示了CTSB、CTSS基因在新西兰白兔不同组织中的表达水平并初步分析了其生物学功能,为进一步研究家兔CTSB、CTSS基因功能及调控机制提供了基础和参考。

基于大数据平台下E-coach管理模式在下肢动脉硬化闭塞症患者运动康复中的构建及应用研究

构建基于大数据平台的E-coach下肢动脉硬化闭塞症运动康复管理模式,并分析其可行性。研究表明,基于大数据平台的E-coach下肢动脉硬化闭塞症运动康复管理模式能够提高患者下肢运动康复的依从性,改善患者的步行能力和运动耐力,促进其血管康复,提高患者生活质量。

Rural Landscape Promotion Strategy from the Perspective of All-for-one Tourism:A Case Study of Luyuan Village,Yuan'an County

Al-for-one tourism plays an increasingly important role in the development of national tourism,and rural landscape is endowed with multiple functions in all-for-one tourism pattern.After Yuan'an County was listed as the second batch of national all-in-one tourism demonstration zones,the establishment of al-in-one tourism puts forward higher requirements for the planning and promotion of rural landscape in Yuan'an County.By analyzing the status quo of rural landscape construction through landscape cultural characteristics,landscape differentiation and landscape management mechanism,combined with the current style of Luyuan Village in Yuan'an County,the paper discusses the promotion strategy and implementation approach of rural landscape in the perspective of all-region tourism from natural ecological landscape,settlement life landscape and economic production landscape,in order to bring new thinking for the improvement of rural landscape in China.

基于振兴乡村旅游模式的甘肃省村镇土坯民居建筑质量的调查研究

为了促进乡村经济发展,加强乡村旅游业建设,传承土坯房屋文化,通过对甘肃省高湾镇部分村社实地调查,对现有土坯房屋进行分析研究,对建造和使用过程中存在的缺陷和暴露的质量问题进行剖析,对地基、基础、墙体、屋面、装饰和生物等因素可能导致的质量问题进行梳理,为后续土坯房屋的改良和加固提供基础。

补中益气汤6个成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的考察补中益气汤中6种成分在大鼠血浆中的药动学行为。方法大鼠灌胃给予该药物稀释液(9.47 g/kg)后取血,LC-MS/MS法测定血药浓度,DAS3.1.1软件计算药动学参数。结果黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、甘草酸、甘草次酸、柴胡皂苷D和阿魏酸的Tmax分别为(1.70±0.27)h,(0.35±0.24)h,(1.86±1.53)h,(8.40±2.19)h,(0.63±0.49)h和(0.233±0.09)h;T1/2分别为(6.21±2.28)h,(5.28±2.32)h,(4.25±1.25)h,(8.33±2.18)h,(10.11±2.40)h和(3.49±1.53)h;Cmax分别为(8.57±4.90)ng/mL,(130.16±39.00)ng/mL,(172.60±94.69)ng/mL,(956.8±523.03)ng/mL,(13.85±9.23)ng/mL,(334.00±192.10)ng/mL;AUC0-t分别为(42.81±17.30)h·ng/mL,(321.93±140.69)h·ng/mL,(508.25±136.90)h·ng/mL,(18250.17±15081.38)h·ng/mL,(18.62±11.81)h·ng/mL,(320.09±119.30)h·ng/mL。结论补中益气汤的上述6个成分中毛蕊异黄酮、柴胡皂苷D和阿魏酸的吸收较快,所建方法快速、精确、可靠,适用于补中益气汤的药代动力学研究。

运变电站金属铠装柜中的二次安全防护装置设计

阐述金属铠装柜的基础构造和现场工作实际情况,变电站运行金属铠装柜中的二次安全防护装置的设计方案,并实现该装置的有效运用,探讨将活门挡板隔离车推入开关室,通过绝缘挡板将上下静触头与工作地点有效隔离,规避了安全风险,提出实践优化的建议。

不同入路甲状腺腔镜手术方式对甲状腺良性结节患者的影响

目的研究不同入路甲状腺腔镜手术方式对甲状腺良性结节患者围术期指标、并发症及预后的影响。方法选取2015年6月至2021年6月德阳市人民医院收治的105例甲状腺良性结节患者作为研究对象,根据手术方式分为对照组(n=52)和试验组(n=53),对照组采用锁骨下入路腔镜手术,试验组采用经乳晕入路腔镜手术,观察两组患者围术期指标、并发症及预后。结果两组手术时间、并发症比较,差异无统计学意义(P>0.05),试验组术中出血量及住院时间较对照组少(P<0.05);术后两组患者肾上腺素(E)、皮质醇(COR)较术前略有上升,白细介素(IL-6)指标较术前降低,且试验组优于对照组(P<0.05);术后两组患者VAS评分与术前相比均降低,且试验组优于对照组(P<0.05)。术后试验组美容评分优于对照组(P<0.05)。结论与锁骨下入路腔镜手术相比,乳晕入路腔镜手术具有创面小、出血少、术后疼痛轻等优势,有利于患者早日恢复。

CETU法在经方治急症教学中的应用

目的评价CETU教学法应用于经方治急症教学中的效果。方法选择2018年10月至2021年6月期间,在上海中医药大学附属曙光医院急诊科参加住院医师规范化培训成员作为研究对象。所有对象系统接受CETU教学法。研究对象分别于教学前及教学后完成问卷调查。教学前主要调查内容为经方治急症的信心、学习经方的兴趣等。教学后主要调查内容为教学对条文熟练程度、核心病机的理解、类证鉴别等方面。结果共127人次参与教学并接受问卷调查,仅有不足10%的规培医师有经方治急症的经历或经验,96.06%的年轻医师没有接受过经方治急症的教学。CETU教学结束后,77.17%规培医师认为教学显著提高了对核心条文的掌握,显著提高了对核心病机的理解(74.80%)。对重点难点的类证鉴别有82.68%的调查者认为有显著提高,92.91%规培医师认为对经方方义分析有了更深入的认识和掌握。结论CETU教学法应用于经方治急症教学能显著提高规培医师经方治急症信心,提高对核心条文及经方的理解和掌握。

“中共革命的行动机制”学术会议综述

20世纪上半叶的中共革命深刻改变了中国社会性质及其发展走向,其间革命的理念、理论和行动互为支持,密不可分。2019年8月,30多位专家学者齐聚兰州大学,从不同角度切入、通过不同议题探讨了钱粮、组织、行动、思想观念与革命之间的关系,并就怎样理解和如何观察中共革命的行动机制展开了深入对话,认为中国共产党是很有计划性和趋势性的政党,中共革命的行动机制存在于变动之中,绝非静态的和结构化的。

基层医院临时整合的普通病区应对新型冠状病毒肺炎的护理管理策略

本院是新型冠状病毒肺炎的基层定点救治医院。因疫情原因,本院需要对部分病区进行临时整合,通过人力资源管理应急响应、防控和多专业知识培训、防护物资管理、病区消毒和隔离及护士心理健康管理等措施,全面保障了病区的安全运作。现将本院临时整合的普通病区应对新型冠状病毒肺炎疫情的护理管理策略进行总结,以期为应对疫情和需要整合的病区管理提供参考。