基于TGR5/cAMP/PKA信号通路探讨疏肝、健脾疗法对肝损伤大鼠的作用及机制

目的 探讨疏肝疗法与健脾疗法对肝郁叠加肝损伤大鼠的作用及机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、双环醇组、四逆散组、六君子汤组,每组6只。除正常组外,其余组大鼠均采用束缚叠加四氯化碳橄榄油溶液皮下注射的方法制备肝郁叠加肝损伤模型,造模同时模型组给予去离子水灌胃,双环醇组给予0.2 g/kg双环醇灌胃,四逆散组给予4.32 g/kg四逆散灌胃,六君子汤组给予六君子汤9.26 g/kg灌胃,连续灌胃42 d。末次灌胃结束后,全自动生化分析仪检测血清肝功能生化指标[碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)]水平,RT-PCR法检测肝脏组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)mRNA表达情况,免疫组化法检测肝脏、结肠组织中G蛋白偶联受体5(TGR5)阳性表达情况,AB-PAS染色观察结肠组织中杯状细胞数量。结果 与正常组比较,模型组血清ALP、ALT、AST、TBil、DBil水平和肝脏组织中IL-6 mRNA相对表达量、结肠组织中TGR5阳性表达平均光密度值均明显升高(P均<0.05),肝脏组织中cAMP、PKA mRNA相对表达量和肝脏组织中TGR5阳性表达平均光密度值均明显降低(P均<0.05),结肠组织中杯状细胞数量明显减少(P<0.05);与模型组比较,双环醇组、四逆散组血清ALP、ALT、AST、TBil、DBil水平及六君子汤组血清ALP、ALT、TBil、DBil水平,双环醇组、四逆散组肝脏组织中TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量和各药物组结肠组织中TGR5阳性表达平均光密度值均明显降低(P均<0.05),四逆散组肝脏组织中cAMP、PKA mRNA相对表达量和双环醇组PKA mRNA相对表达量、六君子汤组cAMP mRNA相对表达量、各药物组肝脏组织中TGR5阳性表达平均光密度值均明显升高(P均<0.05),各药物组杯状细胞数量均明显增多(P均<0.05);与六君子汤组比较,四逆散组TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量均更低(P均<0.05),PKA mRNA相对表达量明显更高(P<0.05)。结论 四逆散疏肝可能通过激活TGR5/cAMP/PKA信号通路,上调肝脏中cAMP、PKA、TGR5表达,下调肝脏中炎症因子表达,从而改善肝郁叠加肝损伤大鼠的肝功能。

构建载基因多功能高分子微泡靶向乳腺癌细胞

背景:高分子微泡的稳定性好,具有更长的体内存留时间。目的:构建载基因靶向高分子微泡,评估其体外靶向结合受体的能力。方法:以高分子聚合物单甲氧基聚乙二醇左旋聚乳酸共聚物、聚乳酸-羟基乙酸-聚乙二醇-COOH及胆固醇3β-N-(二甲基-氨基-乙基)氨基甲酸叔丁酯盐酸盐作为微泡外壳材料,全氟戊烷气体为内核,单乳化法制备高分子微泡,利用电荷的静电作用将质粒DNA连接到微泡上,碳二亚胺法靶向修饰微泡,形成载基因靶向高分子微泡,显微镜观察微泡形貌、大小、粒径及分布,荧光显微镜及流式细胞术鉴定微泡与质粒DNA及抗体的连接率。观察人类表皮生长因子受体2(+)乳腺癌细胞生长至融合度约80%时,分2组干预:一组加入高分子微泡孵育1 h;另一组预先加入曲妥珠单抗孵育1 h,再加入高分子微泡孵育1 h,显微镜下观察微泡体外靶向结合人类表皮生长因子受体2(+)乳腺癌细胞的能力。结果与结论:①载基因靶向高分子微泡呈圆形,分散良好,平均粒径(3.0±1.5)μm,大小分布较均匀,浓度为8.8×1010 L-1;②荧光显微镜下可见载基因靶向高分子微泡表面曲妥珠单抗-IgG-FITC发出绿色荧光、质粒DNA-PI发出红色荧光,流式细胞术测得高分子微泡同时连接质粒DNA与曲妥珠单抗的比率为96.28%;③载基因靶向高分子微泡与乳腺癌细胞孵育1 h后,显微镜下观察可见细胞表面结合了大量微泡,而曲妥珠单抗阻断后,高分子微泡与细胞结合量显著减少;④结果表明单乳化法制备的高分子微泡,可有效携带质粒DNA及抗体药物,并且具有良好的靶向功能。

子宫内膜间质肉瘤的临床与彩色多普勒超声特征

目的探讨子宫内膜间质肉瘤(ESS)的临床及超声表现。方法回顾性纳入2013年1月—2020年12月27例经病理证实为ESS的患者的临床和超声影像资料,以60例子宫肌瘤(UF)患者为对照组,分析两组患者的临床及超声特征。结果单因素分析显示:ESS组和UF组患者的年龄分别为(48.5±9.9)岁和(41.1±9.5)岁,绝经率分别为48.1%和20.0%,异常阴道出血率分别为59.3%和13.3%;超声表现上,ESS组和UF组患者的瘤体最大径分别为(8.04±4.56)cm和(4.91±1.83)cm,边界不清概率分别为61.5%和12.2%,囊实性回声概率分别为44.4%和15.0%,血流分级Ⅱ~Ⅲ级分别占77.8%和30.0%,血流阻力指数(RI)分别为(0.46±0.09)和(0.61±0.05),以上差别均有统计学意义(P<0.05)。logistic多因素分析结果提示,年龄(OR=1.194)、阴道出血(OR=20.262)为ESS的危险因素(P<0.05),RI(OR=0.000)为ESS的保护因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果提示,年龄、阴道出血、RI三者联合检查可鉴别ESS和UF。结论ESS临床易被误诊,恶性程度较高,充分认识其临床表现和超声特征,有助于提高鉴别诊断能力。

《金匮要略》“当先实脾”对肝损伤大鼠肝细胞凋亡的干预作用

目的寻求“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学依据;探讨其对肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型肝细胞凋亡的影响。方法将48只大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常组、模型组、双环醇组、柴芍六君子汤甲组、柴芍六君子汤乙组、柴芍六君子汤丙组,每组8只。模型组及各给药组采用束缚法叠加四氯化碳皮下注射法造模(5 mL/kg,体重,2次/7天),同时灌胃给药,连续42天。于光镜下观察肝组织病理切片;采用全自动生化分析仪检测血清肝功能生化指标;采用比色法检测5h-尿木糖排泄率;采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(apoptotic index,AI);采用RT-PCR法及Western blot法分别检测肝组织B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)基因及蛋白的表达。结果模型大鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)显著升高,白蛋白(albumin,ALB)显著降低,肝组织存在较严重病理损伤;模型大鼠AI、Bax及Bax/Bcl-2均显著高于正常组,Bcl-2及5h-尿木糖排泄率对比正常组显著降低,“知肝传脾”有其生物学依据且与肝细胞凋亡相关。各干预方式均可不同程度减轻模型大鼠上述指标变化。“当先实脾”之柴芍六君子汤丙组对该模型各指标的调节作用优于其它干预方式。结论“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”有其生物学依据,肝细胞凋亡为“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制之一。

“当先实脾”治法对慢性肝损伤模型大鼠脑肠肽的影响

目的探讨“当先实脾”治法对肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型脑肠肽的影响。方法采用随机数字表法将36只清洁级雄性SD大鼠分为正常组、模型组、双环醇组、疏肝健脾组、当先治肝组、当先实脾组,每组6只。除正常组外,其余组均采用慢性束缚和皮下注射四氯化碳的方法建立肝郁叠加慢性肝损伤模型。造模同时,双环醇组给予双环醇灌胃42 d,疏肝健脾组给予柴芍六君子汤灌胃42 d,当先治肝组给予四逆散灌胃21 d+柴芍六君子汤灌胃21 d,当先实脾组给予六君子汤灌胃21 d+柴芍六君子汤灌胃21d,正常组和模型组给予等容量蒸馏水灌胃42 d。观察各组大鼠实验过程中一般状态,实验结束后测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、二胺氧化酶(DAO)、胃泌素(GAS)、P物质(SP)水平。取肝组织,HE染色观察肝组织病理变化,RT-PCR法检测大鼠结肠和下丘脑中血管活性肠肽(VIP)、胃饥饿素(Ghrelin)mRNA表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、TBil、DAO水平和结肠、下丘脑中VIP mRNA表达量均明显升高(P均<0.05),血清GAS、SP水平和结肠、下丘脑中Ghrelin mRNA表达量均明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,双环醇组、当先实脾组大鼠血清ALT、AST、TBil、DAO水平和结肠、下丘脑中VIP mRNA表达量均明显降低(P均<0.05),血清GAS、SP水平和结肠、下丘脑中Ghrelin mRNA表达量均明显升高(P均<0.05)。结论“当先实脾”治法可明显改善肝郁叠加慢性肝损伤,机制可能与调节脑肠肽表达有关。

基于交互分析的同伴教育模式应用于AMI伴心律失常患者药物治疗期间的干预效果

目的:探讨基于交互分析的同伴教育模式对急性心肌梗死(AMI)伴心律失常患者用药依从性的影响。方法:按照随机数字表法将本院于2021年6月—2023年3月收治的110例AMI伴心律失常患者分为两组,每组55例,所有患者均在入院后由具有丰富临床经验的医生进行PCI术治疗,并在术后予其常规治疗,抗血小板、调脂稳定斑块、抗心律失常,待其体征趋向稳定后,在此基础上,常规组采用常规健康教育,优化组采用基于交互分析的同伴教育模式,并对两组自我管理能力、自我感受负担、用药依从性以及不良心血管事件发生情况进行比较。结果:优化组干预2、4、8周后自我管理能力问卷得分均高于常规组(P<0.05);优化组干预2、4、8周后自我感受负担量表(SPBS)均低于常规组(P<0.05);优化组总依从率高于常规组(P<0.05);优化组不良心血管事件发生率低于常规组(P<0.05)。结论:将基于交互分析的同伴教育模式用于AMI伴心律失常患者中具有良好的干预效果,能够减轻患者自我管理负担,提高自我管理能力和用药依从性,有效避免不良心血管事件发生风险。

Electrostatic interaction mechanism on the separation of phenols by non-aqueous capillary electrophoresis

The electrostatic interaction between additive and analyte is of great importance to non-aqueous cap- illary electrophoresis(NACE)separation.Three tetraalkylammonium bromides and acetonitrile were applied as additives and running solvent respectively.The effect of alkyl chain length and concentra- tion of additive on electrostatic interactions was investigated by the separation of phenols.The sepa- ration ability was found to increase with decreasing alkyl chain length of the additive,and the resolu- tion values were increased with increasing additive concentration.The separation was seriously dete- riorated after a little amount of water was added in the running solution.Furthermore,the electrostatic interaction is strong under the conditions of low electron cloud density,weak steric hindrance and multi-interaction sites.Thus,the separation result can be predicted by theoretical analysis,which is helpful for the separation of other substances in NACE based on electrostatic interaction.