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Latest assessment methods for mitochondrial homeostasis in cognitive diseases 被引量:2
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作者 wei you Yue Li +4 位作者 Kaixi Liu Xinning Mi Yitong Li Xiangyang Guo Zhengqian Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期754-768,共15页
Mitochondria play an essential role in neural function,such as supporting normal energy metabolism,regulating reactive oxygen species,buffering physiological calcium loads,and maintaining the balance of morphology,sub... Mitochondria play an essential role in neural function,such as supporting normal energy metabolism,regulating reactive oxygen species,buffering physiological calcium loads,and maintaining the balance of morphology,subcellular distribution,and overall health through mitochondrial dynamics.Given the recent technological advances in the assessment of mitochondrial structure and functions,mitochondrial dysfunction has been regarded as the early and key pathophysiological mechanism of cognitive disorders such as Alzheimer’s disease,Parkinson’s disease,Huntington’s disease,mild cognitive impairment,and postoperative cognitive dysfunction.This review will focus on the recent advances in mitochondrial medicine and research methodology in the field of cognitive sciences,from the perspectives of energy metabolism,oxidative stress,calcium homeostasis,and mitochondrial dynamics(including fission-fusion,transport,and mitophagy). 展开更多
关键词 cognitive disorders mitochondrial dysfunction mitochondrial energy metabolism mitochondrial dynamics mitochondrial transport MITOPHAGY mitochondrial biogenesis oxidative stress calcium homeostasis
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苹婆种质果实性状多样性分析与综合评价
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作者 罗培四 黄丽君 +6 位作者 卢美瑛 李文砚 蒋娟娟 韦优 颜桢灵 赵静 周婧 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1118-1128,共11页
苹婆又名凤眼果、九层皮等,是药食两用坚果类植物。为有效保护和利用苹婆种质资源,本研究采用多样性分析、聚类分析、相关分析、主成分分析和逐步回归分析等方法对70份苹婆种质进行遗传多样性分析和综合评价。结果表明:13个性状变异系... 苹婆又名凤眼果、九层皮等,是药食两用坚果类植物。为有效保护和利用苹婆种质资源,本研究采用多样性分析、聚类分析、相关分析、主成分分析和逐步回归分析等方法对70份苹婆种质进行遗传多样性分析和综合评价。结果表明:13个性状变异系数介于7.80%~42.94%,单果重、单果种子总重、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和淀粉含量变异程度较大。遗传多样性指数介于1.57~2.04,其中种形指数(2.04)、淀粉含量(2.02)、种子纵径(2.01)、果实种子数(2.00)的多样性指数较高。聚类分析把供试材料划分为4个类群,其中类群Ⅱ的15份资源属于果实偏大、外观品质较好的种质类型,符合市场及选育需求。相关性分析表明,种子重量分别与果实纵径、单果重、单果种子总重、种子纵径、种子横径呈极显著正相关,出种率与果实横径呈极显著负相关,可溶性蛋白含量与可溶性糖含量呈极显著正相关。主成分分析表明,前4个主成分能代表13个果实性状的大部分信息,累计贡献率为74.46%。果实性状综合评价得分(F)介于-2.95~3.35,S009、S021、S011、S036、S028等种质位居前列,综合性状优良。逐步回归分析筛选出单果种子总重、种子重量、可溶性糖含量、种子横径4个性状指标,可作为综合评价苹婆果实性状的关键性指标。通过鉴定评价,筛选出果形大、淀粉含量高、可溶性糖和可溶性蛋白含量丰富的优异种质资源6份。 展开更多
关键词 苹婆 种质资源 果实性状 遗传多样性 综合评价
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不同成熟度木奶果果实品质及耐贮性
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作者 孔方南 颜桢灵 +6 位作者 周之珞 周彩霞 卢美瑛 卓福昌 韦优 罗培四 赵静 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期294-300,共7页
以木奶果果实为试材,研究了不同成熟度对果实品质及耐贮性的影响,为确定最佳采收成熟度提供理论依据。结果表明,随着成熟度的提高,果皮颜色由浅红色转粉色至黄粉色,纵径、横径、单果质量、可食率、可溶性固形物含量和固酸比分别上升了7.... 以木奶果果实为试材,研究了不同成熟度对果实品质及耐贮性的影响,为确定最佳采收成熟度提供理论依据。结果表明,随着成熟度的提高,果皮颜色由浅红色转粉色至黄粉色,纵径、横径、单果质量、可食率、可溶性固形物含量和固酸比分别上升了7.67%、6.83%、20.05%、8.09%、13.23%和18.51%;色泽指数、硬度和总酚含量分别下降了76.84%、5.94%和18.97%;可滴定酸含量、维生素C含量和总黄酮含量先上升后下降,均在成熟度II时最高,分别为1.39%、3.93 mg/100 g和3.48 mg/g;果形指数和果皮相对电导率较稳定。随着贮藏时间的延长,成熟度III的木奶果果实能够保持较高的硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、固酸比、维生素C含量和总酚含量,失重率和果皮相对电导率较稳定。主成分分析及果实品质指数分析表明,成熟度III的木奶果果实品质综合得分最高,且在贮藏过程中综合品质最佳。综上,木奶果果实采收标准为成熟度II~III(花后91~98 d),成熟度III(花后98 d)的果实鲜食品质佳及耐贮性高。 展开更多
关键词 成熟度 木奶果 果实品质 耐贮性
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A Cloud-Fog Enabled and Privacy-Preserving IoT Data Market Platform Based on Blockchain
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作者 Yurong Luo wei you +3 位作者 Chao Shang Xiongpeng Ren Jin Cao Hui Li 《Computer Modeling in Engineering & Sciences》 SCIE EI 2024年第5期2237-2260,共24页
The dynamic landscape of the Internet of Things(IoT)is set to revolutionize the pace of interaction among entities,ushering in a proliferation of applications characterized by heightened quality and diversity.Among th... The dynamic landscape of the Internet of Things(IoT)is set to revolutionize the pace of interaction among entities,ushering in a proliferation of applications characterized by heightened quality and diversity.Among the pivotal applications within the realm of IoT,as a significant example,the Smart Grid(SG)evolves into intricate networks of energy deployment marked by data integration.This evolution concurrently entails data interchange with other IoT entities.However,there are also several challenges including data-sharing overheads and the intricate establishment of trusted centers in the IoT ecosystem.In this paper,we introduce a hierarchical secure data-sharing platform empowered by cloud-fog integration.Furthermore,we propose a novel non-interactive zero-knowledge proof-based group authentication and key agreement protocol that supports one-to-many sharing sets of IoT data,especially SG data.The security formal verification tool shows that the proposed scheme can achieve mutual authentication and secure data sharing while protecting the privacy of data providers.Compared with previous IoT data sharing schemes,the proposed scheme has advantages in both computational and transmission efficiency,and has more superiority with the increasing volume of shared data or increasing number of participants. 展开更多
关键词 IoT data sharing zero-knowledge proof authentication privacy preserving blockchain
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Clinical Value of the Quantitative Flow Ratio to Predict Long-term Target Vessel Failure in Patients with In-stent Restenosis after Drug-coated Balloon Angioplasty
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作者 Xiang-qi WU Long-bo LI +6 位作者 wei you Zhi-ming WU Lei ZHAO Zhi-hui WANG Pei-na MENG Bin LIU Fei YE 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第3期561-567,共7页
Objective The study sought to investigate the clinical predictive value of quantitative flow ratio(QFR)for the long-term target vessel failure(TVF)outcome in patients with in-stent restenosis(ISR)by using drug-coated ... Objective The study sought to investigate the clinical predictive value of quantitative flow ratio(QFR)for the long-term target vessel failure(TVF)outcome in patients with in-stent restenosis(ISR)by using drug-coated balloon(DCB)treatment after a long-term follow-up.Methods This was a retrospective study.A total of 186 patients who underwent DCB angioplasty for ISR in two hospitals from March 2014 to September 2019 were enrolled.The QFR of the entire target vessel was measured offline.The primary endpoint was TVF,including target vessel-cardiac death(TV-CD),target vessel-myocardial infarction(TV-MI),and clinically driven-target vessel revascularization(CD-TVR).Results The follow-up time was 3.09±1.53 years,and 50 patients had TVF.The QFR immediately after percutaneous coronary intervention(PCI)was significantly lower in the TVF group than in the no-TVF group.Multivariable Cox regression analysis indicated that the QFR immediately after PCI was an excellent predictor for TVF after the long-term follow-up[hazard ratio(HR):5.15×10−5(6.13×10−8−0.043);P<0.01].Receiver-operating characteristic(ROC)curve analysis demonstrated that the optimal cut-off value of the QFR immediately after PCI for predicting the long-term TVF was 0.925(area under the curve:0.886,95%confidence interval:0.834–0.938;sensitivity:83.40%,specificity:88.00;P<0.01).In addition,QFR≤0.925 post-PCI was strongly correlated with the TVF,including TV-MI and CD-TVR(P<0.01).Conclusion The QFR immediately after PCI showed a high predictive value of TVF after a long-term follow-up in ISR patients who underwent DCB angioplasty.A lower QFR immediately after PCI was associated with a worse TVF outcome. 展开更多
关键词 percutaneous coronary intervention in-stent restenosis target vessel failure quantitative flow ratio
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Effect of negative remodeling of the side branch ostium on the efficacy of a two-stent strategy for distal left main bifurcation lesions:an intravascular ultrasound study
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作者 Yi XU Tian XU +13 位作者 Jia-Cong NONG Xiao-Han KONG Meng-Yao ZHAO Zhi-Jing GAO Yi-Fei WANG wei you Pei-Na MENG Yu-He ZHOU Xiang-Qi WU Zhi-Ming WU Mei-En ZHAN Yan-Qing WANG De-Feng PAN Fei YE 《Journal of Geriatric Cardiology》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期506-522,共17页
OBJECTIVES To investigate whether negative remodeling(NR) detected by intravascular ultrasound(IVUS) of the side branch ostium(SBO) would affect in-stent neointimal hyperplasia(NIH) at the one-year follow-up and the c... OBJECTIVES To investigate whether negative remodeling(NR) detected by intravascular ultrasound(IVUS) of the side branch ostium(SBO) would affect in-stent neointimal hyperplasia(NIH) at the one-year follow-up and the clinical outcome of target lesion failure(TLF) at the long-term follow-up for patients with left main bifurcation(LMb) lesions treated with a two-stent strategy.METHODS A total of 328 patients with de novo true complex LMb lesions who underwent a 2-stent strategy of percutaneous coronary intervention(PCI) treatment guided by IVUS were enrolled in this study. We divided the study into two phases. Of all the patients, 48 patients who had complete IVUS detection pre-and post-PCI and at the 1-year follow-up were enrolled in phase Ⅰ analysis, which aimed to analyze the correlation between NR and in-stent NIH at SBO at the 1-year follow-up. If the correlation was confirmed, the cutoff value of the remodeling index(RI) for predicting NIH ≥ 50% was analyzed next. The phase Ⅱ analysis focused on the incidence of TLF as the primary endpoint at the 1-to 5-year follow-up for all 328 patients by grouping based on the cutoff value of RI.RESULTS In phase I: according to the results of a binary logistic regression analysis and receiver operating characteristic(ROC) analysis, the RI cutoff value predicting percent NIH ≥ 50% was 0.85 based on the ROC curve analysis, with a sensitivity of 85.7%, a specificity of 88.3%, and an AUC of 0.893(0.778, 1.000), P = 0.002. In phase Ⅱ: the TLR rate(35.8% vs. 5.3%, P < 0.0001)was significantly higher in the several NR(s NR, defined as RI ≤ 0.85) group than in the non-s NR group.CONCLUSION The NR of LCx O is associated with more in-stent NIH post-PCI for distal LMb lesions with a 2-stent strategy,and NR with RI ≤ 0.85 is linked to percent NIH area ≥ 50% at the 1-year follow-up and more TLF at the 5-year follow-up. 展开更多
关键词 LESIONS REMODELING INTRAVASCULAR
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鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立
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作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-388,共8页
旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR... 旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 微滴式数字PCR 定量检测
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H9亚型禽流感病毒M1蛋白原核表达及免疫效果初步研究
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作者 李小凤 谢芝勋 +11 位作者 阮志华 李孟 李丹 张民秀 谢志勤 罗思思 韦悠 谢丽基 曾婷婷 张艳芳 黄娇玲 王盛 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期1-6,共6页
旨在原核表达H9亚型禽流感病毒(AIV)M1蛋白,初步探究其免疫效果,为研制AIV疫苗奠定基础。通过构建重组质粒pET-32a-M1,诱导表达,Western blot验证蛋白表达情况,将重组蛋白免疫接种小鼠,通过测定血清中IgG抗体效价,脾细胞培养上清多细胞... 旨在原核表达H9亚型禽流感病毒(AIV)M1蛋白,初步探究其免疫效果,为研制AIV疫苗奠定基础。通过构建重组质粒pET-32a-M1,诱导表达,Western blot验证蛋白表达情况,将重组蛋白免疫接种小鼠,通过测定血清中IgG抗体效价,脾细胞培养上清多细胞因子分泌情况评价其免疫效果。结果显示,M1重组蛋白主要以可溶性蛋白存在,Western blot结果可见特异性条带。免疫接种小鼠后,血清产生IgG抗体,抗体效价为1∶30000。小鼠脾细胞上清液IL-2、IL-4、IL-6与对照组相比较,含量显著增加(P<0.01),而抑制IL-1β、IL-5、IL-13、IL-12p70、IL-18、GM-CMF、IFN-γ、TNF-α分泌。结果表明,M1重组蛋白免疫原性良好,刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,为禽流感疫苗深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感 M1蛋白 原核表达 免疫效果
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蛋黄果SCoT-PCR反应体系的建立与优化
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作者 周彩霞 李文砚 +6 位作者 卢美瑛 周之珞 颜桢灵 韦雪英 卓福昌 韦优 周婧 《中国南方果树》 北大核心 2024年第2期112-116,共5页
为建立和优化蛋黄果SCoT-PCR反应体系,以“仙桃1号”蛋黄果为试材,SCoT1为引物,采用L_(16)(4^(5))正交试验,对影响SCoT-PCR反应的DNA、Mg^(2+)、dNTPs、引物及Taq聚合酶等因素进行优化;并选用3份地理位置相距较远的蛋黄果种质为模板,对... 为建立和优化蛋黄果SCoT-PCR反应体系,以“仙桃1号”蛋黄果为试材,SCoT1为引物,采用L_(16)(4^(5))正交试验,对影响SCoT-PCR反应的DNA、Mg^(2+)、dNTPs、引物及Taq聚合酶等因素进行优化;并选用3份地理位置相距较远的蛋黄果种质为模板,对优化反应体系进行验证。结果表明,不同因素对蛋黄果SCoT-PCR反应体系的影响存在差异,但不显著,其中最大的影响因素是Taq聚合酶含量,其次是dNTPs浓度、模板DNA含量、引物浓度和Mg^(2+)浓度。蛋黄果SCoT-PCR最佳反应体系(20μL)为模板DNA 80 ng、3 mmol/L Mg^(2+)、0.25 mmol/L dNTPs、0.4μmol/L引物、Taq 2 U。在该体系下,3份蛋黄果种质均能稳定扩增出清晰明亮、数目丰富且稳定性高的条带,说明优化的SCoT-PCR反应体系适用于蛋黄果SCoT分子标记。 展开更多
关键词 蛋黄果 SCoT-PCR 正交试验 Taq聚合酶 dNTPs浓度
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羊奶果种质资源叶片光合特性差异分析
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作者 赵静 蒋娟娟 +3 位作者 唐景美 罗培四 韦优 孔方南 《热带农业科学》 2024年第1期45-50,共6页
为了揭示羊奶果种质资源叶片光合特性差异,并以此为依据筛选和鉴定高产羊奶果种质,以收集到的3份羊奶果种质资源L001、幸福三号(XF3)和橄榄坝一号(GLB1)的绿色叶片和新生灰色叶片为材料,对其叶绿素含量、光合活性等生理指标进行测定。... 为了揭示羊奶果种质资源叶片光合特性差异,并以此为依据筛选和鉴定高产羊奶果种质,以收集到的3份羊奶果种质资源L001、幸福三号(XF3)和橄榄坝一号(GLB1)的绿色叶片和新生灰色叶片为材料,对其叶绿素含量、光合活性等生理指标进行测定。结果表明,羊奶果新生灰色叶片和绿色叶片的色素含量存在显著差异,灰色叶片的叶绿素a(Chla)、总叶绿素(Chla+b)、叶绿素a/b比值(Chl a/b)和β-胡萝卜素(β-Car)含量均显著低于绿叶;3个种质绿色叶片光合特性和生理指标间存在显著差异,GLB1绿色叶片的Chla、Chlb和Chla+b显著高于其他种质;L001绿色叶片实际PSⅡ量子产量[Y(Ⅱ)]、光化学荧光淬灭系数(qP)、PSⅡ天线光化学荧光淬灭系数(qL)等显著高于其他种质,说明其产量潜力最优。本研究为光合作用分析技术在羊奶果种质资源筛选中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 羊奶果 光合作用 叶绿素荧光 叶绿素 种质
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X蛋白(pX)在血清4型禽腺病毒感染LMH细胞后对Toll样受体的影响 被引量:1
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作者 李小凤 韦悠 +10 位作者 罗思思 谢志勤 阮志华 张民秀 黄娇玲 李丹 万丽军 李孟 任红玉 谢丽基 谢芝勋 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2814-2821,共8页
【目的】研究X蛋白(Protein X,pX)在血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)感染LMH细胞后对Toll样受体产生的影响,为进一步阐释FAdV-4感染致病机制和免疫应答机理提供数据参考。【方法】通过PCR扩增X基因编码区序列,与pEF... 【目的】研究X蛋白(Protein X,pX)在血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)感染LMH细胞后对Toll样受体产生的影响,为进一步阐释FAdV-4感染致病机制和免疫应答机理提供数据参考。【方法】通过PCR扩增X基因编码区序列,与pEF1α-HA载体连接,构建重组表达质粒pEF1α-HA-X。将重组表达质粒pEF1α-HA-X和空质粒pEF1α-HA分别转染LMH细胞,24 h后用FAdV-4感染转染后的细胞,2个处理组分别标记为pEF1α-HA-X+和pEF1α-HA+;同时设立转染后未加病毒刺激组作对照,分别标记为pEF1α-HA-X-和pEF1α-HA-。用Western-blotting和间接免疫荧光验证重组蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测Toll样受体(chTLR1a、chTLR1b、chTLR2a、chTLR2b、chTLR3、chTLR4、chTLR5、chTLR7、chTLR15、chTLR21)和效应因子(IFN-α、IFN-β、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-15)mRNA转录水平的变化。【结果】X基因开放阅读框(ORF)全长540 bp,共编码179个氨基酸残基。Western-blotting结果显示重组X蛋白与HA标签小鼠源单克隆抗体反应,在27 kD处得到单一条带,间接免疫荧光结果可见绿色荧光。实时荧光定量PCR检测发现,与pEF1α-HA-组相比较,pEF1α-HA-X-组chTLR1a和chTLR1b的mRNA转录水平极显著上调(P<0.01,下同),分别为pEF1α-HA-组的9.76和12.34倍;chTLR2a、chTLR2b、chTLR5、chTLR7、chTLR15和chTLR21的mRNA转录水平显著上调(P<0.05,下同)。添加病毒感染后,与pEF1α-HA-X-组相比,pEF1α-HA-X+组chTLR1a和chTLR1b的mRNA转录水平极显著下调,分别下调60.0%和66.7%;chTLR2a、chTLR2b和chTLR3的mRNA转录水平显著提高,分别显著上调2.91、2.01和1.47倍,其他chTLRs的mRNA转录水平下调,但差异不显著(P>0.05);同时,pEF1α-HA-X+组效应因子IFN-α、IFN-β、IL-1β的mRNA转录水平比pEF1α-HA-X-组显著上调,IL-8的mRNA转录水平极显著下调。【结论】在LMH细胞过表达pX并被FAdV-4感染后,pX能激活宿主免疫应答系统,Toll样受体(chTLR2a、chTLR2b和chTLR3)和其效应因子(IFN-α、IFN-β和IL-1β)的mRNA转录水平显著上调以抑制病毒复制,说明pX具备激活宿主细胞天然免疫系统的功能。 展开更多
关键词 FAdV-4 PX TOLL样受体 效应因子 实时荧光定量PCR
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基于符号学的裕固族服饰图案创新解读与推演 被引量:4
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作者 魏优 李丽 雷鸣 《设计》 2023年第9期6-9,共4页
探索裕固族服饰图案元素创新组合的可能性,为裕固族传统文化元素应用提供了一种新的创新设计方法和应用形式。运用皮尔斯符号学三分法理论对裕固族服饰图案中的花草目纹、羊角纹、天鹅纹和红缨帽纹进行意义编码,由假设目标接收者对符号... 探索裕固族服饰图案元素创新组合的可能性,为裕固族传统文化元素应用提供了一种新的创新设计方法和应用形式。运用皮尔斯符号学三分法理论对裕固族服饰图案中的花草目纹、羊角纹、天鹅纹和红缨帽纹进行意义编码,由假设目标接收者对符号信息进行解码和元语言整理;对解码后的语言符号进行二次编码,在叙事学方法指导下对二次编码结果再设计。对传承保护裕固族非物质文化遗产有现实意义。为设计师提供了一条新的探寻文化艺术本质的途径,也为各民族丰富的文化元素创新设计提出了可借鉴的路径。 展开更多
关键词 符号学三分法 裕固族服饰图案 图案解读 二次编码 皮尔斯
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血清4型禽腺病毒Ⅷ蛋白真核表达及其对LMH细胞天然免疫相关基因的影响
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作者 李小凤 阮志华 +6 位作者 石勇丽 武晓倩 韦悠 万丽军 谢志勤 任红玉 谢芝勋 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第4期861-867,共7页
【目的】分析血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Ⅷ蛋白(ProteinⅧ,pⅧ)对宿主天然免疫相关基因表达的影响,为进一步研究FAdV-4的致病机理提供参考依据。【方法】通过PCR扩增FAdV-4Ⅷ基因编码区序列,与pEF1α-HA载体连接,构建重组表达质粒pEF1α-... 【目的】分析血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Ⅷ蛋白(ProteinⅧ,pⅧ)对宿主天然免疫相关基因表达的影响,为进一步研究FAdV-4的致病机理提供参考依据。【方法】通过PCR扩增FAdV-4Ⅷ基因编码区序列,与pEF1α-HA载体连接,构建重组表达质粒pEF1α-HA-Ⅷ。用pEF1α-HA-Ⅷ重组表达质粒(试验组)和pEF1α-HA空质粒(对照组)转染LMH细胞,利用Western blotting和间接免疫荧光验证Ⅷ蛋白表达情况,实时荧光定量PCR测定STING、MDA5、TBK1、MAVS、NF-κB、IRF7、IFN-α、INF-β、IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β基因的表达水平。【结果】Ⅷ基因开放阅读框(ORF)全长744 bp,共编码247个氨基酸残基,真核表达获得的Ⅷ重组蛋白与鼠源HA标签单克隆抗体产生特异性反应,在34 kD处得到单一条带;间接免疫荧光检测可见绿色荧光,说明Ⅷ重组蛋白在LMH细胞中得到良好表达。与对照组相比,Ⅷ重组蛋白在LMH细胞中表达后,模式受体STING基因的表达水平显著提高5.6倍(P<0.05,下同),MDA5基因的表达水平提高30%;接头蛋白TBK1和MAVS基因表达水平分别较对照组显著提高1.5和2.4倍;转录因子IRF7的表达水平显著提高3.4倍,而NF-κB基因被抑制表达。同时,干扰素(IFN-α和IFN-β)和白介素(IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β)的表达水平均上调,IFN-α和IFN-β分别极显著上调19.2和14.4倍(P<0.01),而IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β分别显著上调4.1、2.1、6.0和7.9倍。【结论】在LMH细胞中过表达FAdV-4 pⅧ,STING、MDA5、TBK1、MAVS、IRF7、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-8、IL-15和IL-1β等天然免疫相关基因呈上调表达,表明Ⅷ蛋白对FAdV-4激发宿主的天然免疫具有一定促进作用。 展开更多
关键词 FAdV-4 Ⅷ蛋白 真核表达 天然免疫因子 实时荧光定量PCR
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微滴式数字PCR定量检测禽偏肺病毒方法的建立 被引量:4
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作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期264-270,共7页
为建立禽偏肺病毒(aMPV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本研究以aMPV F基因为靶基因,根据其保守区域设计特异性引物和探针,通过各反应条件的优化,初步建立检测aMPV的dd PCR方法。反应条件优化结果显示,最佳引物终浓度1μmol/μL,探针终... 为建立禽偏肺病毒(aMPV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本研究以aMPV F基因为靶基因,根据其保守区域设计特异性引物和探针,通过各反应条件的优化,初步建立检测aMPV的dd PCR方法。反应条件优化结果显示,最佳引物终浓度1μmol/μL,探针终浓度0.5μmol/μL,退火温度56℃。绘制的标准曲线显示,重组质粒标准品稀释倍数的对数与相应质粒检出拷贝数的对数呈良好的线性关系(R^(2)=0.9998)。采用该方法同时检测aMPV、禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽呼肠孤病毒、禽脑脊髓炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒和禽腺病毒,结果显示,仅aMPV检测为阳性,其他病原均为阴性。特异性较强。将p MD18-aMPV重组质粒标准品10倍倍比稀释(10^(5)~10^(9),4.3×10^(3)拷贝/μL~4.3×10^(-1)拷贝/μL)后作为模板,采用该方法检测,结果显示该方法对重组质粒标准品的检测限为4.3拷贝/μL,比荧光定量PCR(qPCR)检测限(43拷贝/μL)敏感。对3个稀释度质粒标准品的批内和批间重复性试验结果显示,批内和批间试验的变异系数均小于5%。对采集的82份病鸡气管和脾组织样品同时采用dd PCR和荧光定量PCR检测,结果显示,两种方法对aMPV的阳性检出率均为4.88%(4/82),阴性样品均为78份,二者的符合率达100%,dd PCR检出的4份阳性样品中aMPV的拷贝数为78拷贝/μL~920拷贝/μL。上述结果表明,本研究建立的dd PCR方法特异性强、敏感性高和重复性好,为aMPV检测提供新的技术手段,对其早期感染的防控有重要意义。 展开更多
关键词 微滴式数字PCR 定量检测 禽偏肺病毒
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微滴式数字PCR定量检测滑液囊支原体方法的建立及应用 被引量:4
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作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《中国家禽》 北大核心 2023年第2期39-45,共7页
为绝对定量滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),试验根据已发表的MS VlhA基因序列,针对其保守区域分别设计了1对特异引物和1条探针,建立了ddPCR定量检测MS的方法,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:建立的方法最佳引... 为绝对定量滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),试验根据已发表的MS VlhA基因序列,针对其保守区域分别设计了1对特异引物和1条探针,建立了ddPCR定量检测MS的方法,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:建立的方法最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为54℃;该方法仅检测出MS毒株,不能检测出其他禽源病原,MS重组质粒标准品最低检测限为3.5拷贝/μL,3个连续稀释的MS重组质粒DNA检测的变异系数均小于5%;45份病鸡喉拭子、肺脏及关节囊样品检测结果显示,该方法的MS阳性检出率(11.1%)高于荧光定量PCR(8.9%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测MS特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量MS提供了适合的技术手段。 展开更多
关键词 微滴式数字PCR 定量检测 鸡滑液囊支原体
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血清4型禽腺病毒广西分离株单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 谢丽基 邓显文 +10 位作者 谢芝勋 韦悠 谢志勤 罗思思 李孟 黄娇玲 张民秀 范晴 王盛 曾婷婷 张艳芳 《中国兽药杂志》 2023年第10期9-15,共7页
为制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)广西分离株(FAdV-4-GX2018-005)的特异性单克隆抗体,将FAdV-4-GX2018-005作为免疫原免疫BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株。利用阳性杂交瘤细胞株制备腹水... 为制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)广西分离株(FAdV-4-GX2018-005)的特异性单克隆抗体,将FAdV-4-GX2018-005作为免疫原免疫BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株。利用阳性杂交瘤细胞株制备腹水并纯化得到单克隆抗体,利用ELISA和IFA鉴定单克隆抗体的特异性。结果表明,成功获得3株单克隆细胞株3A3、13A11和4D5。3株杂交瘤细胞株分泌的抗体,能与FAdV-4产生特异性反应,与其他血清型禽腺病毒(FAdV-1、FAdV-2、FAdV-3、FAdV-5、FAdV-6、FAdV-7、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-9、FAdV-10和FAdV-11)不发生反应。本研究成功制备FAdV-4广西分离株单克隆抗体,为FAdV-4检测方法的建立奠定了良好基础。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 广西分离株 单克隆抗体
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考虑落角约束和气动不确定性的固定时间制导控制一体化设计方法
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作者 胡诚伟 韦悠 汪学平 《弹箭与制导学报》 北大核心 2023年第4期98-104,共7页
文中研究落角约束和气动不确定性条件下的机动目标制导控制一体化设计问题。首先,将目标的加速度和气动不确定性考虑为有界的外部扰动。其次,将典型的反步法与动态曲面控制技术相结合,提出了一种固定时间滑模控制方法来解决制导控制一... 文中研究落角约束和气动不确定性条件下的机动目标制导控制一体化设计问题。首先,将目标的加速度和气动不确定性考虑为有界的外部扰动。其次,将典型的反步法与动态曲面控制技术相结合,提出了一种固定时间滑模控制方法来解决制导控制一体化设计问题,并通过引入固定时间微分器有效避免反步法中存在的“微分膨胀”问题。然后,借助于固定时间稳定性理论对闭环系统进行了稳定性分析,表明所提方法能够使所有误差信号在任意初始条件下实现半全局固定时间一致最终有界稳定。最后,通过仿真验证了所提方法的有效性。 展开更多
关键词 制导控制一体化设计 落角约束 机动目标拦截 固定时间稳定性 气动不确定性
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心包积水-肝炎综合征转归的病理学观察
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作者 韦悠 邓显文 +7 位作者 谢芝勋 阮志华 黄娇玲 曾婷婷 谢志勤 范晴 张艳芳 王盛 《中国家禽》 北大核心 2023年第1期45-50,共6页
为研究心包积水-肝炎综合征(HHS)的转归,试验采用血清4型禽腺病毒感染4周龄SPF鸡,建立发病率为90%、死亡率为20%的动物模型,观察SPF鸡大体病变并采集肝脏、心脏、脾脏、腺胃、胰腺、肺、肾脏、法氏囊、胸腺、脑、肌肉、小肠、肌胃、食... 为研究心包积水-肝炎综合征(HHS)的转归,试验采用血清4型禽腺病毒感染4周龄SPF鸡,建立发病率为90%、死亡率为20%的动物模型,观察SPF鸡大体病变并采集肝脏、心脏、脾脏、腺胃、胰腺、肺、肾脏、法氏囊、胸腺、脑、肌肉、小肠、肌胃、食管和气管制作组织病理学切片,检测组织样本中的病毒载量。结果显示:心包积液完全吸收,腺胃出血消失,脾脏轻微肿胀,肝脏仍存在部分黄染和肿胀,组织学检查发现肺脏已完全恢复,肝脏、法氏囊、胸腺、脾脏仍存在组织变性坏死及广泛的炎性细胞浸润;转归期后器官的病毒含量均显著降低(P<0.05)。结果表明HHS的转归为不完全痊愈,对肝脏及免疫器官的功能将造成长期影响。 展开更多
关键词 心包积水-肝炎综合征 血清4型禽腺病毒 病理学观察
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血清4型禽腺病毒水平感染SPF鸡的致病性研究
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作者 韦悠 邓显文 +8 位作者 谢芝勋 杨冰怡 阮志华 黄娇玲 曾婷婷 谢志勤 范晴 张艳芳 王盛 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第5期56-62,共7页
为研究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)通过水平传播途径感染SPF鸡的致病性,将3周龄SPF鸡饲养于FAdV-4不同污染程度的隔离器中以建立自然感染动物模型,每天记录疾病过程并统计发病率和死亡率,剖检并检测器官病毒载量,检测环境和鸡躯体表面的FAd... 为研究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)通过水平传播途径感染SPF鸡的致病性,将3周龄SPF鸡饲养于FAdV-4不同污染程度的隔离器中以建立自然感染动物模型,每天记录疾病过程并统计发病率和死亡率,剖检并检测器官病毒载量,检测环境和鸡躯体表面的FAdV-4病毒载量。结果显示:FAdV-4水平感染SPF鸡的第1~4天无明显临床症状,第5天起饮食量下降、排黄绿色粪便,第6~9天陆续有鸡死亡,第10天后鸡群逐渐康复至与对照组相同;FAdV-4具有广泛的组织嗜性,在肝脏中含量最高;环境中FAdV-4的污染程度对鸡群的发病率和死亡率均有影响,每25 cm^(2)地网的病毒载量为1.4×10^(5)copies、侧壁为2.3×10^(3)copies、料槽为1.2×10^(4)copies时将达到环境致病阈值,此时每25 cm^(2)鸡体表病毒载量为脚底1.2×10^(5)copies、头部1.1×10^(4)copies、背部3.7×10^(3)copies。本研究加深了对FAdV-4致病性的了解,为兽医工作者和养殖业人员采取有效的预防控制措施提供了参考数据。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 水平传播 动物模型 致病阈值
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两个羊奶果种质的果实营养成分对比分析
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作者 赵静 卢美瑛 +6 位作者 蒋娟娟 唐景美 卓福昌 罗培四 李文砚 韦优 孔方南 《南方农业》 2023年第19期16-18,共3页
为揭示羊奶果不同种质资源间的营养成分差异,以收集到的羊奶果种质YN054和自主培育的南亚三号品种的果实为材料,测定比较其果实中蛋白质、可溶性果胶等营养成分差异。结果表明,南亚三号的可溶性固形物、蛋白质、脂肪、还原糖、总酸、可... 为揭示羊奶果不同种质资源间的营养成分差异,以收集到的羊奶果种质YN054和自主培育的南亚三号品种的果实为材料,测定比较其果实中蛋白质、可溶性果胶等营养成分差异。结果表明,南亚三号的可溶性固形物、蛋白质、脂肪、还原糖、总酸、可溶性果胶、单宁、β-胡萝卜素、维生素C、磷含量和能量分别为YN054的87.72%、124.35%、50.00%、118.18%、2.93%、115.14%、74.12%、66.67%、130.90%、126.18%和90.09%;除了含水量、膳食纤维、总黄酮和钙离子含量没有显著差异外,其他11个指标种质间差异均达到显著水平(p<0.05)。综合分析,与YN054相比,南亚三号羊奶果的营养更丰富、酸度低、维生素C含量高,值得大力推广。 展开更多
关键词 羊奶果 种质 果实 营养成分
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