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乌头碱对胎鼠中脑多巴胺能神经元细胞的神经毒性作用 被引量:21
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作者 严妍 杨茂 +1 位作者 wolf-dieter rausch 王喜军 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2013年第3期212-215,共4页
目的:观察乌头碱对中脑多巴胺能神经元细胞的毒理作用,以了解和预防乌头碱及其衍生物产生的神经毒性作用。方法:从孕14 d的小鼠中取出胎鼠中脑,并分离出多巴胺能神经元细胞,于5%CO2,37℃和100%湿度条件培养,培养第10天加入不同浓度的乌... 目的:观察乌头碱对中脑多巴胺能神经元细胞的毒理作用,以了解和预防乌头碱及其衍生物产生的神经毒性作用。方法:从孕14 d的小鼠中取出胎鼠中脑,并分离出多巴胺能神经元细胞,于5%CO2,37℃和100%湿度条件培养,培养第10天加入不同浓度的乌头碱(0.1,0.5,1,5,10,50和100μmol/L)作用48 h,于第12天免疫组化染色。选取神经元细胞数、神经元树突的长度和数量作为观察指标,并进行分析。结果:乌头碱作用48 h后,不同浓度的乌头碱(0.5~100μmol/L)对神经细胞生长均有明显的抑制作用,并表现出浓度依赖性神经毒性作用,高浓度乌头碱(10~100μmol/L)的抑制强度高于低浓度组(0.5~5μmol/L)。结论:体外实验证实了乌头碱对中脑多巴胺能神经元有神经毒性作用。 展开更多
关键词 乌头碱 多巴胺能神经元 神经毒性 细胞培养
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帕金森病体外实验细胞模型的建立 被引量:3
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作者 贾晓晶 张志良 +4 位作者 曲雅勤 翟成伟 杨太权 wolf-dieter rausch 龚守良 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期778-781,F0002,共5页
目的:探讨1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子(MPP+)对小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元的毒性作用及其机制。在体外建立帕金森病(PD)实验研究的细胞模型。方法:采用小鼠胚胎(孕14d)中脑进行原代细胞培养,实验分为对照组和不同浓度(0.1、1... 目的:探讨1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子(MPP+)对小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元的毒性作用及其机制。在体外建立帕金森病(PD)实验研究的细胞模型。方法:采用小鼠胚胎(孕14d)中脑进行原代细胞培养,实验分为对照组和不同浓度(0.1、1、10和15μmol.L-1)MPP+药物实验组,应用酪氨酸羟化酶(TH)免疫化学细胞染色方法和Hoechst33342荧光染色对多巴胺能神经元的损伤及凋亡进行测定。结果:对照组中多巴胺能神经元的数量为(875±23)个/孔。在0.1、1、10和15μmol.L-1MPP+实验组,多巴胺能神经元的数量分别为(612±25)、(586±32)、(459±16)和(435±19)个/孔,与对照组比较,MPP+实验组多巴胺能神经元数量均明显降低(P<0.05),多巴胺能神经元突起的数目和长度明显减少。Hoechst33342染色发现,对照组中凋亡细胞数占总细胞数的(5.45±0.29)%,10μmol.L-1MPP+药物治疗组细胞凋亡率为(26.97±1.36)%,显著高于对照组水平(P<0.05)。结论:0.1、1、10和15μmol.L-1MPP+均引起多巴胺能神经元的数量显著减少,随着药物浓度的增加,多巴胺能神经元减少的程度越显著。MPP+引起的多巴胺能神经元的变性死亡可能通过凋亡途径所诱导。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基四氢吡啶离子 帕金森病 中脑 细胞培养 细胞凋亡
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谷氨酸对小鼠胚胎中脑原代细胞培养中多巴胺能神经元损伤的时程效应 被引量:1
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作者 贾晓晶 张秦玲 +4 位作者 侯吉光 翟成伟 董素光 wolf-dieter rausch 王铁君 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1075-1078,1206,共5页
目的:探讨谷氨酸兴奋性损伤诱导小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元损伤的时程效应,阐明谷氨酸兴奋性毒性在帕金森病(PD)模型中对多巴胺能神经元损伤的作用。方法:取孕14d小鼠胚胎的中脑组织制备成细胞悬液,进行原代培养,分为对照组和... 目的:探讨谷氨酸兴奋性损伤诱导小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元损伤的时程效应,阐明谷氨酸兴奋性毒性在帕金森病(PD)模型中对多巴胺能神经元损伤的作用。方法:取孕14d小鼠胚胎的中脑组织制备成细胞悬液,进行原代培养,分为对照组和谷氨酸用药组。细胞在体外培养第10天,加入500μmol·L-1谷氨酸并作用15min,分别于用药后2、4、6、24和48h进行酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学染色。在显微镜下计数TH染色阳性神经元数量及每个神经元突起数量。结果:对照组中每个培养孔多巴胺能神经元的数量平均为(778.0±18.6)个,谷氨酸用药组2、4、6、24和48h多巴胺能神经元数量平均为(306.0±8.6)、(314.0±15.4)、(298.0±19.1)、(307.0±18.5)及(323.0±23.8)个。谷氨酸用药各组中多巴胺能神经元数量较对照组明显减少(P<0.05),但谷氨酸用药组2、4、6、24和48h多巴胺能神经元数量比较差异无显著性(P>0.05)。随机选取每组100个多巴胺能神经元的突起进行计数,对照组多巴胺能神经元的突起数量平均为(3.440±0.106)个,谷氨酸用药组2、4、6、24和48h时多巴胺能神经元突起数量分别为(2.240±0.105)、(2.390±0.103)、(3.070±0.105)、(3.420±0.987)和(3.420±0.923)个。谷氨酸用药后2和4h多巴胺能神经元的突起数量较其他各组均明显减少(P<0.05)。结论:谷氨酸可在体外诱导小鼠胚胎中脑原代培养中多巴胺能神经元的损伤和死亡,是一个相对急性、不可逆的损伤过程,但随着损伤后恢复时间的延长,损伤的多巴胺能神经元形态可恢复。 展开更多
关键词 谷氨酸 帕金森病 中脑 原代培养
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MPP^+对小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元的毒性作用及作用机制的探讨 被引量:1
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作者 贾晓晶 曲雅勤 +3 位作者 翟成伟 张秦玲 wolf-dieter rausch 王铁君 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第8期1267-1269,共3页
关键词 多巴胺能神经元 毒性作用 原代培养 胚胎中脑 MPP+ 中枢神经系统 神经元变性 小鼠
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MPP^+诱导小鼠胚胎中脑组织原代培养多巴胺能神经元的损伤与死亡
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作者 贾晓晶 杨艳明 +3 位作者 姜新 姜晓燕 wolf-dieter rausch 龚守良 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期784-787,F0003,共5页
目的:探讨1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPP+)诱导小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元损伤。方法:采用OF1/SPF小鼠胚胎(孕14d)中脑进行原代细胞培养,将培养细胞分为对照组和MPP+给药组。... 目的:探讨1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPP+)诱导小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元损伤。方法:采用OF1/SPF小鼠胚胎(孕14d)中脑进行原代细胞培养,将培养细胞分为对照组和MPP+给药组。于体外培养第10天,在MPP+给药组分别加入含有0·1、1·0、10·0和15·0μmol·L-14个不同浓度的MPP+的培养液,持续作用48h后,经酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色,显微镜下观察、计数多巴胺能神经元。于体外培养10d,在MPP+给药组的培养液中加入终浓度为10μmol·L-1MPP+,分别于给药后2、4、8、24、48、72和96h进行TH免疫组化染色,显微镜下计数TH染色阳性神经元,明确MPP+引起多巴胺能神经元损伤和死亡的时程变化。结果:0·1、1·0、10·0和15·0μmol·L-1浓度的MPP+给药组中平均每培养孔中的TH染色阳性神经元的数量分别为对照组的(70·30±6·38)%、(67·39±4·92)%、(51·68±2·95)%和(50·91±5·60)%。MPP+给药组中,多巴胺能神经元的损伤表现为两种不同形态:绝大多数多巴胺能神经元表现为神经突起的数目及长度明显减少,极少数为胞体空虚、丢失,仅存神经突起。10μmol·L-1MPP+分别作用24、48、72和96h的MPP+给药组中,TH染色阳性神经元的数量每培养孔分别为(677·2±6·1)、(411·5±26·6)、(229·0±20·3)和(191·3±15·2)个,与对照组[(839·8±15·5)个/培养孔]相比明显减少(P<0·05)。结论:0·1、1·0、10·0和15·0μmol·L-1浓度的MPP+均可诱导的多巴胺能神经元的损伤和死亡,其损伤程度与MPP+药物浓度和持续作用的时间呈依赖关系;MPP+诱导多巴胺能神经元的损伤和死亡可能存在2种不同的机制。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基-四氢吡啶 帕金森病 中脑 神经元 细胞培养
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Chinese Herb Formulae Inhibit the Proliferation of Human Colon Cancer SW480 Cells by Inducing Cell Apoptosis
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作者 Su Fu Shao-Lin Qin wolf-dieter rausch 《World Journal of Traditional Chinese Medicine》 CAS CSCD 2023年第3期348-354,共7页
Objective:This study aimed to reveal the antitumor effects of Chinese herbal formulae and the underlying mechanisms in treating colorectal cancer,with a focus on developing traditional Chinese medicine(TCM)as a supple... Objective:This study aimed to reveal the antitumor effects of Chinese herbal formulae and the underlying mechanisms in treating colorectal cancer,with a focus on developing traditional Chinese medicine(TCM)as a supplement and alternative therapeutic method for cancers.Materials and Methods:Human colon cancer SW480 cells were treated with three Chinese herbal formulae,Bu Zhong Yi Qi Decoction,Fuzi Lizhong Decoction,and Pulsatilla Decoction at different concentrations(50–600μg/mL)for 24,36,and 48 h,respectively.Cell viability was determined using the resazurin reduction assay,and cell survival rate was evaluated using a colony formation assay.After treatment with different concentrations(50–600μg/mL)of these three formulae for 48 h,the effects of the Chinese herbal formulae on cell apoptosis were investigated using Hoechst/propidium iodide(PI)staining.The positive PI-stained cells were investigated using an EnSpire multilabel plate reader and the positive Hoechst-stained cells were observed under a fluorescence microscope for morphological changes.Results:Bu Zhong Yi Qi Decoction,Fuzi Lizhong Decoction,and Pulsatilla Decoction inhibited SW480 cell proliferation in a dose-and time-dependent manner and induced cell apoptosis.Conclusion:Chinese herbal formulae with a special prescription form of TCM with antitumor effects bring a new perspective in line with the principles of TCM in cancer treatment. 展开更多
关键词 Apoptosis cell proliferation Chinese herbal formulae colorectal cancer SW480 cells
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士的宁对多巴胺能神经元的保护作用 被引量:5
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作者 杨洋 周德生 +3 位作者 wolf-dieter rausch 黄政德 胡华 柯立芝 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第24期223-227,共5页
目的:选择2种神经毒物1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)和谷氨酸在体外诱导多巴胺能神经元退行性损伤,并检测士的宁对此细胞的药理毒理作用,及对其退行性损伤的协同作用或拮抗作用。方法:采用孕14 d小鼠,取出胎鼠中脑,分离出多巴胺能神经元... 目的:选择2种神经毒物1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)和谷氨酸在体外诱导多巴胺能神经元退行性损伤,并检测士的宁对此细胞的药理毒理作用,及对其退行性损伤的协同作用或拮抗作用。方法:采用孕14 d小鼠,取出胎鼠中脑,分离出多巴胺能神经元,调整细胞密度7.5×105/mL,于5%CO2,37℃,100%湿度条件培养,于体外培养的第10天分别加入士的宁0.1,1,5,10μmol.L-1,MPP+10μmol.L-1,谷氨酸500μmol.L-1作用48 h,第12天染色。选取细胞数,神经元树突长度和数量作为观察指标,并做出分析。结果:士的宁对未损伤的多巴胺能神经元在48 h培养过程中无毒性影响。在10μmol.L-1士的宁作用下,多巴胺能神经元数量明显高于对照组(P<0.05);在5~10μmol.L-1士的宁作用下,树突数量与对照组相比也有明显提高(P<0.05)。士的宁(10μmol.L-1)和MPP+共同培养48 h后,细胞计数明显高于MPP+单独培养组(P<0.05);这种保护作用更为明显的表现在细胞形态学变化方面,在10μmol.L-1的士的宁剂量下,神经树突长度明显高于MPP+单独培养组(P<0.05);神经树突的数量在5μmol.L-1士的宁作用下与MPP+单独培养组相比有明显增加(P<0.05)。在对谷氨酸(500μmol.L-1)诱导的神经元损伤模型中,与谷氨酸组相比,10μmol.L-1的士的宁对所有的观察指标的数值都有递增影响(P<0.05)。结论:首次证实士的宁具有可在体外刺激中脑分离出的多巴胺能神经元的生长,并且对此神经元退行性损伤有保护作用。 展开更多
关键词 士的宁 1-甲基-4-苯基吡啶离子 谷氨酸 神经退行性病变 神经保护
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