丹参花药组织培养研究

为了建立丹参花药培养再生体系,进行了丹参花药组织培养技术研究。以丹参花蕾为试验材料,研究了小孢子发育时期的确定方法,明确了小孢子处于单核靠边期的花蕾长度,结果显示,丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时小孢子处于单核靠边期。并利用小孢子处于单核靠边期的花药做外植体,采用正交试验设计,分别比较了不同激素种类及配比对愈伤组织诱导和不定芽诱导的影响。结果显示,6-BA浓度为1.50 mg/L、2,4-D浓度为0.25 mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达到83.33%,且愈伤组织长势较快,体积均匀,呈明显的颗粒状;6-BA浓度为1.25 mg/L、NAA浓度为0.05 mg/L、IBA浓度为0.25 mg/L时,不定芽诱导率最高且明显>其他处理,达到70.00%,且愈伤组织大部分呈鲜绿色,颗粒状明显,丛生苗较多,芽生长速度较快。丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时,小孢子处于单核靠边期,适合进行花药培养;适宜愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.50 mg/L+2,4-D 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;适宜不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.25 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IBA 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L。

基于GC-MS指纹图谱和网络药理学的白术挥发性成分质量标志物预测分析

建立白术挥发油指纹图谱,并结合网络药理学对白术挥发油质量标志物(Q-Marker)进行初步预测分析。采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对白术挥发油进行成分分析,对11批白术饮片挥发性成分进行相似度评价、主成分分析(PCA)和聚类分析(HCA),筛选挥发油中的Q-Marker候选成分;对筛选的Q-Marker候选成分进行靶点搜集和网络药理学分析,构建“成分-靶点-通路”网络,并预测白术挥发油的Q-Marker。结果显示11批白术饮片挥发油的指纹图谱相似度均大于0.990,提示不同产地和批次的白术饮片挥发油成分整体组成上具有一致性;PCA分析显示浙江产区白术分布更集中,HCA分析显示当分类距离为15时,浙江产区的4批白术被聚为一类,这表明道地产区的白术挥发油质量更稳定;根据GC-MS共有成分得到白术挥发油中10个Q-Marker候选成分,网络药理学分析提示这些成分涉及19个关键靶点和66条通路。本研究初步预测棕榈酸、β-桉叶醇、γ-榄香烯、榄香醇和苍术酮是白术挥发油的Q-Marker,为白术的质量控制提供了理论依据,也为其他类似中药材的质量标志物研究提供了理论参考。

基于GC-MS分析不同基原车前草挥发油成分的异同

比较不同基原车前草挥发油成分的异同。采用水蒸气蒸馏法提取14批次车前草挥发油,气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离鉴定各色谱峰的化学成分;将样品挥发油指纹图谱导入指纹图谱相似度评价系统,以平车前草P1为参照图谱,进行多点校正,得相似度;采用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对14批次样品挥发油检测结果进行分析。结果显示,从14批样品挥发油中共鉴定出62种化学成分,9种共有成分,均以棕榈酸、亚油酸、α-亚麻酸为主要成分;14批次样品指纹图谱高度相似,相似度在0.967~0.999;HCA和PCA均不能将两种不同基原的车前草按照品种分为两类。上述结果表明车前草与平车前草挥发油成分相似度较高,其作为同一药材入药具有一定的科学依据。

射干叶固态发酵对其有效成分影响的研究

试验旨在研究射干叶固态发酵对其有效成分的影响。试验采用固态发酵技术,以植物乳杆菌为菌种,对射干叶的发酵条件进行优化,并对发酵后射干叶中总黄酮、总酚、抗氧化活性和5种黄酮类有效成分进行测定。结果表明,经固态发酵增加了射干叶中总黄酮、总酚的含量和抗氧化能力。射干叶最佳发酵条件为不添加碳源、液料比4 mL/g。固态发酵显著提高了射干叶中鸢尾黄素、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素的含量。研究表明,固态发酵技术提高了射干叶有效成分的含量,增强了抗氧化活性。

高效液相色谱法同时测定化妆品中辣椒碱等9种热感剂

建立了测定化妆品中辣椒碱等9种热感剂的高效液相色谱法。样品经80%甲醇超声提取后,过滤,以乙腈-0.5%甲酸水溶液为流动相,采用SymmetryShieldTMRP18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,液相色谱分离,二极管阵列检测器进行检测。在优化实验条件下,9种热感剂的分离度好,专属性高,其质量浓度在0.2~100μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数(r2)均不小于0.999 5,检出限(LOD)为0.001 0~0.003 4 mg/kg。以水基类、乳剂类、膏霜类3种阴性样品作为空白基质,9种热感剂在0.004、0.02、1 mg/kg 3种加标水平下的回收率为75.6%~115%,相对标准偏差(RSD)为0.083%~7.0%。该方法专属性强、灵敏度高、准确度好,可用于化妆品中9种热感剂含量的测定。

超高效液相色谱串联质谱法测定除臭类化妆品中乌洛托品及13种喹诺酮类抗菌物质

目的建立同时测定化妆品中乌洛托品及13种喹诺酮类抗菌物质含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并用于实际样品的检测。方法样品经饱和氯化钠作用,再加入50%乙腈(V/V)超声提取,以5 mmol·L^(-1)甲酸铵-乙腈为流动相,梯度洗脱,在多反应离子监测(MRM)模式下以电喷雾离子源、正离子模式进行扫描,基质匹配标准曲线外标法定量。结果14种目标成分在6.22~256.80 ng·mL^(-1)内与测定值线性关系良好,相关系数均大于0.994;加标回收率为83.7%~115.7%,相对标准偏差均小于5.0%,检测限均低于0.007μg·kg^(-1)。结论该方法简单、快速、灵敏,能够满足化妆品中乌洛托品及13种喹诺酮类抗菌物质的检测需求。

不同频率飞秒激光脉冲序列加工炸药过程安全性的数值计算

为了研究飞秒激光加工炸药技术的安全性,建立了飞秒激光脉冲序列加工炸药的计算模型,考虑了炸药在受热条件下的自热反应。采用数值计算的方法对飞秒激光脉冲序列烧蚀炸药(TNT,TATB和HMX)的过程进行了计算,分析了飞秒激光脉冲序列加工炸药过程的安全性。计算结果表明,飞秒激光脉冲序列频率、炸药自热反应放热量和热扩散系数会显著影响加工过程的安全性。在这三种炸药中,HMX自热反应的放热量最大,热扩散系数最小,因此热累积效应最明显,在三种不同频率(1×10^(3)Hz,1×10^(5)Hz和2×10^(5)Hz)的飞秒激光脉冲序列作用下均发生了点火;相反,TATB的热累积效应最弱,在三种不同频率的飞秒激光脉冲序列作用下均未发生点火;TNT的热累积效应介于HMX和TATB之间,因此只在频率较高的飞秒激光脉冲序列作用下才发生点火。在实际加工过程中,特别是对自热反应放热量较大和热扩散系数较小的炸药,为保证加工过程的安全性,应尽量选用频率较低的飞秒激光脉冲序列对其进行加工。

低温下三组元固体推进剂燃烧波阵面变化规律实验研究

深入了解高能固体推进剂在低温条件下燃烧性能,获得燃烧波阵面变化规律,对评估推进剂在低温条件下的适应性能力具有重要指导意义。本文设计了燃烧波狭缝观测实验装置,采用高速摄影观测技术,对三组元HTPB固体推进剂在常温和低温条件下的燃烧过程进行了观测,获得了燃烧过程中波阵面的图像。结果表明,相比于在常温条件下,固体推进剂在低温条件下出现了燃烧波不稳定的情况。根据燃烧波图像计算出了推进剂的燃速,并与靶线法燃速测量结果进行比较。结果表明,两种方法测量的结果差异较小,推进剂在低温条件下的燃烧速度明显低于在常温条件下,常温条件的燃速在1.717~2.127mm/s,低温条件下的燃速在1.252~1.583mm/s。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫效力研究

为评估重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫保护效果,本研究将该疫苗按照现地免疫程序分别接种10日龄白羽肉鸡和14日龄黄羽肉鸡,疫苗接种前和接种后每周采血,分离血清,检测H5亚型Re-8株和H7亚型H7-Re1株禽流感病毒(AIV)HI抗体滴度,并在初次免疫后3周和出栏时以鼻腔感染方式分别进行攻毒试验。结果显示,免疫前,所有肉鸡血清中H7亚型H7-Re1株AIV HI抗体滴度均低于1log2,H5亚型Re-8株AIV平均HI抗体滴度分别为5.3log2(白羽肉鸡)和4.1log2(黄羽肉鸡);一次免疫的白羽肉鸡在免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度在6.0log2~6.7log2;2次免疫的黄羽肉鸡在初次免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度均在6.0log2以上。在一次免疫后3周时和出栏时,采用高致病性H5、H7亚型AIV攻毒后,对照组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均全部死亡,免疫组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均不发病、不排毒、不死亡,获得100%的免疫保护。本研究结果表明,重组AIV二价灭活疫苗对商品肉鸡具有良好的免疫效果,为该疫苗的现地应用提供了参考依据。

2株H7N9亚型重组禽流感病毒的生物学特性和免疫原性研究

为评估经反向遗传构建的H7N9亚型重组禽流感病毒(AIV)H7-Re1株和H7-Re2株的生物学特性及免疫原性,本研究将这2株病毒分别以10^4倍稀释接种10日龄SPF鸡胚后,36℃培养,观察鸡胚存活情况并检测病毒HA效价,结果显示96 h时,2株病毒接种的鸡胚全部存活,培养至72 h时其HA效价均为9 log2,均显著高于亲本分离株。测定2株病毒的静脉内接种致病指数(IVPI),结果显示均为0。将2株病毒分别以10^6 EID50剂量鼻腔内接种5周龄SPF鸡,进行致病性试验,结果显示,接种后14 d内,2株病毒接种鸡均无临床症状,也不排毒。以2株病毒为种毒分别制备油乳剂灭活疫苗,以0.3 mL/只接种3周龄SPF鸡后3周时检测免疫鸡血清中HI抗体,结果显示,两种疫苗免疫鸡平均HI效价均可达到8.0 log2。于免疫后21 d,H7-Re1株免疫组鸡分别攻击10^6 EID50的H7N9亚型低致病力AIV(PG/SHH/S1069/13株)和10^5 EID50的高致病力AIV(CK/GX/SD098/17株),进行攻毒试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均全部存活,且无发病和排毒出现。H7-Re2株免疫组鸡于免疫后21 d分别以10^5 EID50的剂量进行高致病力H7N9亚型AIV(CK/GX/SD098/17株)和H7N2亚型AIV(DK/FJ/SE0195/18株)的攻毒保护试验,结果显示两种病毒攻毒后免疫鸡均不发病、不死亡、不排毒。以上结果表明,以H1N1亚型A/Puerto Rico/8/34株病毒为内部基因供体、经反向遗传学方法构建的H7-Re1株和H7-Re2株均具有生长滴度高、生物安全性高和免疫原性好的特点。本研究为H7N9亚型禽流感疫苗的研制和应用奠定了基础。

Re-8株H5亚型禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫保护性研究

为评估当前应用的Re-8株种毒相关禽流感灭活疫苗对野鸟源H5N8流感病毒的免疫预防效果,本研究将重组禽流感病毒(AIV)H5亚型Re-8株灭活疫苗(H5N1亚型,Re-8株)和重组AIV(H5+H7)灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7 Re-1株)分别以0.3 m L/只的剂量接种3周龄SPF鸡,免疫3周时进行HI抗体检测和攻毒试验。结果显示,上述2种疫苗免疫的SPF鸡血清中针对H5亚型Re-8株抗原的HI抗体均在8 log2以上,以105EID50的剂量、鼻腔感染途径攻击野鸟源H5N8病毒BHG/QH/2/16和BHG/Tibet/3/16后,所有免疫组鸡在14 d观察期内均全部健活,不排毒,而对照组鸡在攻毒后4 d内全部发病、死亡、排毒。现地免疫重组AIV H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)的商品蛋鸡直接进行HI抗体检测和攻毒试验,结果显示,免疫蛋鸡血清中针对Re-8株抗原的HI抗体平均滴度为8.3 log2,以相同攻毒方式和剂量分别攻击2株H5N8病毒后,免疫鸡也获得完全免疫保护,不发病、不死亡、不排毒。本研究结果表明,含有重组AIV H5 Re-8株抗原的灭活疫苗可有效防控野鸟源H5N8流感病毒,为我国及其他国家H5N8亚型禽流感免疫防控提供了科学依据。

护理伦理学“课程思政”的教学改革与探索

目的探讨本科护理伦理学“课程思政”教学改革的方法及效果。方法选取兰州大学二年级101名护理本科生为研究对象,将思政元素与专业知识有机融合,采用案例讨论、专题活动(辩论赛、角色扮演)、思维导图等教学方法,应用形成性评价和终结性评价相结合的考核方法进行成绩评定,并从我院教学指导委员会、学生和教师3方面总结改革效果。结果我院教学指导委员会专家对课程思政教学改革的总体评价较好;学生对课程思政教学改革的总满意度为92.5%;课程组自我评价认为案例讨论和专题活动的组织有待于进一步改进。结论护理伦理学的“课程思政”教学改革丰富了教学思政内容,有效实施了德育渗透,有助于提高学生的思政素养。

加速康复外科护理对直肠癌患者术后营养状况和康复效果的影响

目的:探讨直肠癌患者应用加速康复护理对术后营养情况及康复效果的影响和价值。方法:选择就诊于南京医科大学附属无锡市第二人民医院的直肠癌患者共96例纳入研究并随机分为观察组和对照组,对照组患者给予围手术期常规护理,观察组患者在常规护理基础上接受加速康复外科护理,比较两组术后营养状况及康复效果。结果:观察组患者术后总蛋白、前白蛋白、白蛋白水平明显高于对照组,差异显著(P <0. 05);观察组术后胃肠功能恢复时间、下床活动时间、并发症发生率均显著优于对照组,以上差别具有统计意义(P <0. 05)。结论:直肠癌手术治疗患者围手术期应用加速康复外科护理,缩短患者胃肠功能恢复时间、降低并发症发生率同时提升患者满意度,值得临床推广。

不同放牧强度对拉萨河谷温性草原主要植物生态位及种间联结的影响

为了探明不同放牧强度如何影响物种的生态位和种间联结,本研究设置三种放牧强度,采用“Levins”方法计算物种的生态位宽度和生态位重叠值,以及使用方差比率法(VR)、卡方检验、联结系数(association coefficient,AC)和Ochiai(OI)指数分析了种间联结性。结果表明,中度放牧和禁牧增加了优势种的生态位宽度,但重度放牧却减小了优势种的生态位宽度;卡方检验表明三种处理下的15个主要物种所组成的105个种对中,分别有53.3%,52.4%,50.5%的种对表现出负联结性;联结系数AC表明,三种放牧强度下白草(Pennisetum centrasiaticum)与高山嵩草(Kobresia pygmaea)和黑褐穗薹草(Carex atrofusca)之间均呈负联结;OI指数表明,随放牧强度的增加,OI指数逐渐降低。因此,重度放牧使拉萨河谷温性草原主要物种生态位宽度和生态位重叠值降低,使群落内物种间联系不紧密,群落处于不稳定状态,不利于植物群落的发展。

4908例孕产妇乙型肝炎病毒感染状况及临床特征

目的对我院近年来孕妇感染HBV状况及临床特征加以调查研究,以指导乙肝母婴阻断工作。方法纳入2016年9月1日至2018年8月30日在西安医学院第二附属医院就诊的门诊及住院孕产妇共4908例,对其HBsAg进行检查,对于阳性患者进一步进行血清学标志物、病毒载量和肝功能的检查,并进行统计学分析。结果检出HBsAg阳性者204例,阳性率为4.16%,HBsAg阳性率在年龄较大组更高。HBsAg阳性患者中,HBeAg阳性者占比25.5%,DNA高病毒载量(≥106 IU/mL)者占比19.6%。HBeAg阳性和阴性两组间病毒DNA载量水平差异有统计学意义(P<0.001,χ^2=35.9),而ALT、AST、GGT和TBiL结果的正常组与异常组两组间的DNA载量水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论育龄妇女在孕前应接受乙肝表面标志物检查,对于表面抗原阳性妇女需要进一步监测DNA病毒载量和肝功指标,保证孕前、孕期病毒复制处于较低水平,提高新生儿阻断成功率。

白术配伍人参前后挥发油调控慢性萎缩性胃炎大鼠AQP3、4表达的比较研究

为探究参术药对配伍治疗慢性萎缩性胃炎的增效机制,本文就白术配伍人参前后挥发油成分物质基础变化及对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织水通道蛋白3(AQP 3)、水通道蛋白4(AQP 4)的影响进行了比较研究。采用水蒸气蒸馏法提取人参白术配伍前后挥发油,以GC-MS法表征挥发油化学特征,并随机将大鼠分成空白组、模型组、白术挥发油组及配伍挥发油组,使用MNNG建立慢性萎缩性胃炎模型,给药后观察各组胃黏膜组织显微、超微结构变化以及AQP 3、AQP 4的表达。结果显示,白术配伍人参后挥发油的提取量升高,经GC-MS测定,配伍后苍术酮相对含量降低,新增少量人参挥发油成分。显微及超微观察显示,模型组大鼠胃组织黏膜折叠皱起,黏膜层和固有层腺体萎缩严重,胃小凹形态改变,上皮细胞破损,炎症细胞大面积浸润,且病理评分明显高于正常组(P<0.05);各药物组与模型组相比,均缓解或改善上述病理结果,且配伍挥发油组表现更优。免疫组化结果显示,模型组大鼠胃黏膜AQP 3、AQP 4表达明显低于空白组(P<0.05);相较模型组,各药物组对胃黏膜AQP 3、AQP 4蛋白的表达有增加趋势或明显增加,且配伍挥发油组优于白术挥发油组。上述结果表明,白术配伍人参前后挥发油对慢性萎缩性胃炎均具有治疗作用,且配伍后效果更佳。其增效机制可能与苍术酮比例的减少、人参挥发油成分的少量加入及AQP 3、AQP 4表达的上调相关。

基于影像组学的多参数磁共振定量指标在膀胱癌肌层浸润分析中的价值

目的:探讨基于影像组学的多参数MRI定量指标在膀胱癌肌层浸润分析中的价值。方法:回顾性收集符合纳入标准的膀胱癌患者225例,其中非肌层浸润性膀胱癌125例,肌层浸润性膀胱癌100例。在MR T2WI、DWI及增强图像上测量肿瘤-壁界面,并运用影像组学软件对肿瘤区域进行勾画及特征筛选,然后基于3组特征的概率值构建单参数及多参数联合模型,选择最优概率值与肿瘤-壁界面构建诺模图模型,在外部验证集中测试其诊断性能。ROC曲线及校准曲线对模型准确性进行评估。结果:最终选用基于6个特征的多参数联合概率值,与肿瘤-壁界面联合构建Nomogram模型,在ROC曲线上训练集和测试集曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.892、0.875,表现出良好的诊断性能,较单独的组学模型或肿瘤-壁界面模型有更好的准确性。外部验证模型的AUC为0.846,进一步证明该模型有较好的预测性能。结论:基于多参数MRI和肿瘤-壁界面构建的Nomogram模型在膀胱癌是否有肌层浸润的鉴别上具有较好的诊断性能及可重复性,可以协助临床医生做出有效评估。

关系数据库SQL代码的自动评分算法研究

针对数据库教学中SQL(结构化查询语言)代码评判的不规范性及不明确性,建立了一个SQL代码自动评分模型。该模型首先对SQL代码进行了预处理,分析语义结构进而提取出代码的特征,同时进行分词处理;然后构建SQL代码的同义库,根据同义库将分词后的代码片段进行同义转换;之后运用最长公共子串算法对代码片段进行相似度匹配,进而赋予各个片段影响因子,得到代码总的相似度;最后分析人工评分数据制定相应的自动评分策略,从而评定出SQL代码的分数。该模型首次构建同义库,有效地提高了SQL代码的评分效率,可以达到比较准确的水平,采用循环匹配也可以对SQL中的长代码进行评分。

MarR家族蛋白Orf17在自溶链霉菌格尔德霉素生物合成中的调控作用

格尔德霉素是自溶链霉菌产生的具有极强抗肿瘤活性的活性物质,但格尔德霉素生物合成的具体调控机制还不清楚.为了深入解析自溶链霉菌中格尔德霉素生物合成的调控机制,对其合成途径中一个MarR家族调控蛋白Orf17的功能及其调控作用进行了研究.HPLC分析显示,敲除了orf17基因的突变株中格尔德霉素的产量相比野生型降低,表明Orf17对格尔德霉素的生物合成起到了正调控作用;RT-PCR检测表明,在orf17突变株中与格尔德霉素合成相关的基因almAI、almF、almM、almH、almRⅠ、almRⅡ和almRⅢ的表达下降,表明这些基因的表达直接或间接地受到了Orf17的调控.进一步从orf17突变株中分离纯化出3个相比野生型产量升高的化合物,经鉴定为洋橄榄叶素及其衍生物.综上所述,Orf17在格尔德霉素生物合成中起到正调控作用,而对洋橄榄叶素的生物合成可能起到负调控作用.

Protective efficacy of an H5/H7 trivalent inactivated vaccine produced from Re-11, Re-12, and H7-Re2 strains against challenge with different H5 and H7 viruses in chickens

We developed an H5/H7 trivalent inactivated vaccine by using Re-11, Re-12, and H7-Re2 vaccine seed viruses, which were generated by reverse genetics and derived their HA genes from A/duck/Guizhou/S4184/2017(H5N6) (DK/GZ/S4184/17) (a clade 2.3.4.4d virus), A/chicken/Liaoning/SD007/2017(H5N1) (CK/LN/SD007/17) (a clade 2.3.2.1d virus), and A/chicken/ Guangxi/SD098/2017(H7N9) (CK/GX/SD098/17), respectively. The protective efficacy of this novel vaccine and that of the recently used H5/H7 bivalent inactivated vaccine against different H5 and H7N9 viruses was evaluated in chickens. We found that the H5/H7 bivalent vaccine provided solid protection against the H7N9 virus CK/GX/SD098/17, but only 50–60% protection against different H5 viruses. In contrast, the novel H5/H7 trivalent vaccine provided complete protection against the H5 and H7 viruses tested. Our study underscores the importance of timely updating of vaccines for avian influenza control.