不同浓度雌激素对大鼠膀胱颈平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨不同浓度17β-雌二醇(E2)对大鼠膀胱颈平滑肌细胞(BSMC)增殖与凋亡的影响。方法:无菌切取大鼠膀胱颈,应用酶消化法行原代细胞培养。取3-4代传代细胞,用α-平滑肌肌动蛋白抗体免疫组织化学法鉴定细胞成分,选取平滑肌成分大于85%者,分别加入不同浓度E2(0.1-100 nmol/L)。于处理72 h后收获细胞,应用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白CyclinD1,应用Western blotting法检测Bcl-2和Bax表达。结果:E2(0.1-10 nmol/L)促进BSMC从G1期向S过渡(G0/G1期比率显著低于对照组细胞,而S期和G2/M期比率显著高于对照组细胞,P<0.05),并伴随Cyclin D1蛋白表达显著增高。而大剂量E2(100 nmol/L)则使细胞凋亡率显著升高,并伴随Bax表达显著增加。结论:小剂量E2能够促进合成型BSMC增殖,其机制是影响Cyclin D1表达,加速G1期向S过渡;大剂量E2则通过增加Bax促进细胞凋亡。